毕旺来
- 作品数：15 被引量：29H指数：4
- 供职机构：武汉轻工大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家高技术研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 1例真空包装卤鸭制品细菌污染的分析和工艺控制被引量：3
- 2011年
- [目的]对某企业生产的真空包装卤鸭制品进行微生物检测与分析。[方法]按国标方法对抽样产品进行菌落总数测定,运用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增分离菌株16S rDNA序列并测序,序列比对后用邻位相连法构建进化树。[结果]产品中污染有耐热的巨大芽孢杆菌和不耐热的大肠杆菌、溶血性葡萄球菌等细菌。建立了SDS-酶裂解法提取卤鸭制品细菌总DNA,并分析致病菌。通过分析HACCP体系的关键控制点,给出了纠偏措施。[结论]试验结果为探索HACCP体系和现代生物学技术在传统卤制品加工行业中的应用提供了技术依据。
- 毕旺来戴诗皎吴严冯登王海滨
- 关键词：微生物检测
- 武汉肉类食品中大肠杆菌O157∶H7分离株stx亚型和毒力特征分析被引量：4
- 2014年
- 从22家市场销售的117份肉类食品中分离出4株大肠杆菌O157∶H7菌株,经PCR检测这4株菌的stx、hly、eae毒力基因均为阳性。采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法对这4株菌的stx亚型进行鉴定。3株菌同时携带stx1、stx2基因,且均为stx1a、stx2a亚型。菌株EC5.11仅携带stx2基因,但在所有的stx2分型PCR反应中都为阴性。用PCR扩增该菌株stx2基因全长并克隆测序,序列分析结果表明EC5.11志贺毒素基因为stx2c亚型。采用Vero细胞毒性实验检测这4株菌产志贺毒素的状况,结果显示这些菌株都具有一定的Vero细胞毒性。
- 郑冬冬毕旺来王宏勋刘志国丁洪波李睿
- 关键词：志贺毒素
- 大肠杆菌O157:H7压力反应基因对EGCG和柠檬酸的转录响应
- 2016年
- 采用反转录荧光定量PCR技术,检测天然防腐剂表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及柠檬酸处理后,大肠杆菌O157∶H7几种压力反应相关基因的转录响应。结果发现,1 mg/mL EGCG处理后,recA转录水平下调,rpoS无明显变化,而oxyR转录水平明显上调;4 mg/mL柠檬酸处理后,recA转录水平小幅上调,rpoS和oxyR转录水平显著上调。1 mg/mL EGCG和4 mg/mL柠檬酸联合作用,recA、rpoS、oxyR基因转录量显著上调,且上调幅度明显大于防腐剂单独处理样本,说明柠檬酸和EGCG具有协同效应。本研究结果证实低浓度的EGCG和柠檬酸均能激活细菌的氧化应激反应,柠檬酸能激活SOS反应,但低浓度EGCG一定程度上能抑制SOS反应。相较柠檬酸,EGCG更适于控制食品中大肠杆菌O157∶H7的污染。
- 毕旺来杜文芳肖洁刘烨谈笑李睿
- 关键词：大肠杆菌O157:H7EGCGRECA
- 一种小龙虾复合保鲜剂及小龙虾保鲜处理方法
- 本发明公开一种小龙虾复合保鲜剂及小龙虾保鲜处理方法，其中，所述小龙虾复合保鲜剂包括以下质量分数的组分：植酸5～7％、柠檬酸20～25％、抗坏血酸7～8％、茶多酚0.2～0.3％、氯化钠14～17％以及海藻糖42.7～53...
- 李睿杨俊毕旺来张剑侯温甫
- 文献传递
- 改良Vero细胞毒性试验法检测志贺毒素
- 2017年
- 采用Vero细胞培养法检测5株肠出血性大肠杆菌O157食品分离株的志贺毒素。在48孔细胞培养板中培养Vero细胞24 h,然后加入梯度稀释的志贺毒素滤液。培养24 h及48h后在倒置显微镜下观察Vero细胞形态。培养48 h后结晶紫染色,测定Vero细胞半致死时,对应的志贺毒素滤液稀释倍数。证实形态观察和结晶紫染色相结合可以准确测定肠出血性大肠杆菌O157食品分离株的志贺毒素。
- 毕旺来杨俊杜文芳李睿
- 关键词：细胞培养志贺毒素
- 一种生物膜抑制剂及其制备方法和应用
- 本发明公开一种生物膜抑制剂及其制备方法和应用，所述生物膜抑制剂包括茶多酚、柠檬酸、Na<Sub>2</Sub>EDTA和无菌水，其中，所述茶多酚、柠檬酸和Na<Sub>2</Sub>EDTA的质量比为(0.1～3)：(2...
- 李睿卢洁元周敏毕旺来
- 文献传递
- PCR-RFLP法分析白酒小曲细菌多样性被引量：4
- 2012年
- 采用CTAB法提取白酒小曲细菌总DNA,用细菌通用引物扩增16S rDNA,并构建16S rDNA克隆文库。采用限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术对16S rDNA文库进行分析,获得76个克隆的酶切指纹图谱。选择酶切带型不同的阳性克隆进行测序并且构建进化树。结果表明,小曲主要细菌种类为黄单胞菌属、沙雷氏菌属、乳杆菌属、木崎氏菌属和片球菌属,其中优势细菌是以戊糖片球菌为主的乳酸菌。
- 翟平平李嘉文毕旺来陈道玉李睿
- 关键词：白酒小曲细菌多样性
- 产志贺毒素大肠杆菌多重PCR检测方法、试剂盒及应用
- 本发明公开了一种产志贺毒素大肠杆菌多重PCR检测方法、试剂盒及应用。该方法及其试剂盒通过三重PCR反应，经电泳染色、紫外观察，能同时检出stx1、stx2、wzy<Sub>O157</Sub>基因，且stx1基因的检测引...
- 李睿王宏勋毕旺来刘文斌伍金娥余晓丽
- 文献传递
- 食品中大肠杆菌O157∶H7疑似菌株的分离和鉴定研究被引量：2
- 2014年
- 采集117份食品样品,经过PCR扩增毒力基因stx1、stx2和O157特征基因rfbO157初筛。将部分PCR阳性的食品样品,经过新生霉素EC增菌液增菌、免疫磁珠富集、血清学鉴定、菌落PCR复筛,分离出5株O157:H7疑似菌株。其中1株O157∶H7疑似菌株EC5.11不能与O157诊断血清产生良好凝集反应,采用血清学方法该菌容易漏筛。采用PCR扩增rfbO157基因和H7鞭毛抗原编码基因fliCH7,EC5.11均呈阳性反应。最终包括EC5.11在内的4株疑似菌株被证实为O157∶H7血清型。本研究提出了一种改良方法筛选、鉴定食品中O157∶H7疑似菌株,比起传统方法,减少工作量的同时提高了筛选的特异性。
- 杨一群陈洋杜文芳侯斌斌毕旺来李睿
- 关键词：食品血清凝集聚合酶链反应
- 武汉市部分菜场肉类食品中产志贺毒素大肠杆菌污染状况分析被引量：3
- 2014年
- 目的对武汉市部分菜场肉类食品中产志贺毒素大肠杆菌(STEC)污染状况进行分析。方法 2011年7月至2012年10月期间,从武汉市汉口30个菜场和超市共采集样品196份,其中猪肉102份,牛肉60份,禽类34份。通过选择性增菌,提取DNA,PCR扩增stx1、stx2、rfb O157、wzy O157基因,分析食品中产志贺毒素大肠杆菌的污染状况。结果猪肉、牛肉、禽类食品中非O157型STEC的阳性检出率分别为18.6%、48.4%和2.9%;O157型STEC的阳性检出率分别为13.6%(猪肉)、6.7%(牛肉)和2.9%(禽类)。菜场样品STEC检出率(35.8%)略高于超市样品(32.4%)。结论武汉市肉类食品中STEC检出率较高,应定期跟踪监测,了解菌株流行和毒力变化状况。
- 毕旺来谈笑陈程程登陆龙程钰王宏勋李睿
- 关键词：产志贺毒素大肠杆菌O157PCR鉴定食源性致病菌
