李华
- 作品数：9 被引量：28H指数：3
- 供职机构：首都医科大学医学实验与测试中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金首都医科大学校长研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 低氧预处理重塑海马兴奋/抑制平衡促进神经细胞生存被引量：2
- 2012年
- 目的观察急性低氧和重复低氧预处理对小鼠海马组织兴奋性与抑制性氨基酸含量的影响,同时观察海马组织尼氏染色,初步探讨低氧预处理保护神经组织的机制。方法小鼠随机分为对照组、急性低氧组及低氧预处理组,3组动物分别进行海马组织氨基酸神经递质检测和尼氏染色。结果急性低氧可显著增加海马组织天门冬氨酸的含量,并降低抑制性氨基酸甘氨酸的含量,兴奋与抑制氨基酸递质失衡。重复低氧预处理并不增加海马组织天门冬氨酸的含量,但甘氨酸含量显著增加,天门冬氨酸与甘氨酸含量之比逆转。尼氏染色显示急性低氧组与重复低氧预处理组海马组织变性细胞数目无显著差异,均显著高于对照组。但急性低氧组神经细胞内尼氏体数量明显减少。结论重复低氧预处理可通过重塑低氧组织的兴奋与抑制平衡,使低氧组织处于相对的稳态,改善神经细胞的生存环境。
- 李华张福康安仰原崔秀玉
- 关键词：低氧预处理海马
- OGD增加小鼠离体海马组织内cPKCβII和nPKCε的膜转位
- 2005年
- 目的:通过观察无糖低氧(OGD)刺激对小鼠海马脑片内蛋白激酶C(PKC)特定亚型膜转位水平(激活程度)的影响,进一步证实我们在整体低氧预适应小鼠模型上所获实验结果,并为离体海马脑片缺血/低氧预适应(I/HPC)模型建立及后续药物干预实验打下基础。方法:急性分离小鼠海马组织、制备400!μm厚度的脑片,并用无糖低氧(OGD)人工脑脊液(ACSF)模拟缺血/低氧刺激;应用SDS-PAGE和Westernbolt等生化技术,并结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测OGD刺激2、5、10、15和30min后海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平。结果:OGD刺激可增高海马脑片内cPKCβII和nPKCε的膜转位水平,且这种增高从刺激5min开始持续至30min均有显著差异(P<0.001,n=6)。结论:实验结果进一步证实cPKCβII和nPKCε可能参与脑缺血/低氧性预适应的形成过程,并提示OGD10min作为制备离体海马脑片I/HPC模型的预处理刺激较为合理。
- 李华贾军韩松李俊发
- 关键词：脑低氧预适应膜转位海马脑片
- 仅采用PCR进行分子克隆的方法探索被引量：4
- 2014年
- 目的针对目前各种费时且易失败的克隆方法和价格昂贵的试剂盒等问题,对一种仅采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分子克隆方法进行了探索。方法利用高保真的DNA聚合酶具有3’-核酸外切酶活性的特点,采用PCR把载体和插入片段扩增出来,二者的扩增产物先加限制性内切酶Dpn I后再按一定比例混合来消化甲基化的DNA模板,最后把Dpn I消化产物直接转化到感受态细胞来得到克隆基因。结果是一种简单、高效、可靠、且仅采用PCR的分子克隆方法,并利用此方法成功地把构建在载体p ET上的α-突触核蛋白全长基因和构建在p CDNA3.1上的乙酰胆碱受体亚基的全长基因分别重新构建在载体p GEX-4T-1和p GEMHE上。结论在PCR扩增时能够通过引物设计来确定克隆位点,所以该方法可以把任何DNA片段插入到质粒载体内的任何位置,而不需要考虑载体多克隆位点限制的问题。此外,该方法省去了传统的酶切消化、纯化回收和连接过程。
- 薛奋勤许晴魏华李华薛冰
- 关键词：分子克隆聚合酶链反应DNA聚合酶
- 应用超高分辨力小动物超声影像系统三维重建技术测量严重联合免疫缺陷小鼠卵巢体积被引量：3
- 2014年
- 目的探讨超高分辨力小动物超声影像系统三维成像技术测量严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠卵巢体积的方法及应用价值。方法选用11只C.B17/SCID纯系雌性小鼠,应用超高分辨力小动物专用超声影像系统及45 MHz探头,以三维成像体积测量技术测量SCID小鼠卵巢的体积,将所得卵巢体积与二维成像进行比较和相关分析。结果应用超高分辨力小动物超声影像系统获得了清晰的SCID小鼠卵巢的二维平面及三维立体图像。二维超声与三维超声测量的SCID小鼠卵巢体积分别为(5.26±0.51)mm3和(5.47±0.58)mm3(P>0.05),二者呈高度正相关(r=0.84,P<0.05)。结论超高分辨力小动物三维超声成像体积测量技术无创,操作简便,能够精确测量小鼠卵巢体积,可作为在体研究卵巢癌小动物模型的重要实验工具。
- 许晴魏华李华薛奋勤薛冰
- 关键词：卵巢体积小鼠严重联合免疫缺陷
- 生物医学大型仪器分析第二课堂探索与实践被引量：1
- 2013年
- 探讨了在基础医学专业学生中开展生物医学大型仪器分析第二课堂活动,以调动学生学习的积极性,以点带面,培养学生掌握大型仪器操作的基本技能,注重动手能力、科研思维能力的培养。开设生物医学大型仪器分析第二课堂为基础医学专业的学生提供了深度接触大型仪器的机会,将理论知识转化为科研能力,为将来能利用这些大型仪器解决实际科研中遇到的问题打下基础。
- 许晴魏华李华薛奋勤张进禄薛冰
- 关键词：仪器分析第二课堂
- 机能学实验与测试平台大型仪器管理的探索
- 2011年
- 文章介绍了首都医科大学机能学实验与测试平台在管好用好大型仪器设备,提高大型仪器设备的利用率方面所采取的措施。提出了在大型仪器设备集中管理模式下,完善管理制度,重视大型仪器设备管理技术队伍的建设并提高其业务素质,实现大型仪器设备的资源共享等措施建议。
- 李华
- 关键词：大型仪器
- 持续性低氧环境下人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C各亚型的膜转位现象(英文)
- 2005年
- 背景:蛋白激酶C家族有3组,经典型蛋白激酶C及非典型蛋白激酶C和新奇型蛋白激酶C。一些实验证实在低氧环境中,蛋白激酶C家族在脑缺血低氧预刺激中发挥了重要作用。目的:建立细胞缺氧模型,观察在细胞水平上低氧激活经典型蛋白激酶C各亚型(α,βⅠ,βⅡ,γ)膜转位现象的影响。设计:以细胞为对象,随机区组设计。单位:首都医科大学基础医学院神经生物学系。材料:实验于2004-05在首都医科大学神经生物学系细胞培养室完成。由本实验室培养的传代细胞,具有神经元特性的人神经母细胞瘤细胞系。方法:应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学等生化技术,观察培养的细胞经过0～24h不同时间段,低氧环境为体积分数0.01的氧气,体积分数0.05的二氧化碳,体积分数0.94的氮气,对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平的影响。主要观察指标:①观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析检测。②观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用免疫细胞化学方法检测。结果:①经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平均随持续性低氧时间的延长而明显增高(P<0.05),尤以经典型蛋白激酶C-βⅠ亚型在持续性低氧4h后的增高最为显著(P<0.001)。②无论在常氧还是在持续性低氧状态下,在人神经母细胞瘤细胞内均未检测到经典型蛋白激酶C-γ亚型的蛋白表达。应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学实验检测的结果均一致。结论:①在持续低氧的条件下存在于人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ亚�
- 祖鹏宇李俊发韩松曲彦明李华牛晨晨徐群渊
- 关键词：低氧蛋白激酶C
- 大型仪器设备共享平台中膜片钳系统的开放使用被引量：1
- 2016年
- 作为大型仪器设备共享平台,首都医科大学医学实验与测试中心的根本任务是保证仪器设备正常运转,满足不同科研人员的实验需求。本文以膜片钳系统的开放使用为例,介绍了膜片钳系统开放使用的特点,对其开放管理进行总结和探索,从而更好地为我校科研创新、学科发展和人才培养服务。
- 魏华许晴李华薛奋勤刘丽娜
- 关键词：共享平台
- 流式细胞仪工作原理与临床应用被引量：17
- 2011年
- 流式细胞术(flow cytometry,FCM)为当代最先进的细胞定量分析技术,目前普遍应用于临床医学检测和基础医学研究领域。本文阐述了流式细胞仪的结构和原理,总结了其在临床医学领域中诸多方面的应用。
- 李华常莹
- 关键词：流式细胞术白血病肿瘤
