- 拟南芥TGG5基因的克隆、表达和酶学特性被引量：3
- 2010年
- 芥子酶是广泛存在于十字花科植物中的一类降解硫代葡萄糖苷的酶。当植物受到病虫侵袭时,芥子酶与其底物硫代葡萄糖苷结合,释放有毒的水解产物形成植物重要的化学防御系统。TGG5是新发现的一类芥子酶基因,对其研究将有利于揭示芥子酶防御系统的功能。试验克隆了拟南芥TGG5基因cDNA,构建酵母表达载体,转化毕氏酵母GS115。经甲醇诱导表达和Ni亲和层析,获得纯化的TGG5重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量集中在58kD左右,并有较明显拖尾,呈现典型的糖基化蛋白的特征。进一步探讨了TGG5重组蛋白的酶学特性,结果表明:该芥子酶的Km为1.96mmol/L,Vmax为0.084mmol/(min·mg);酶反应的最适pH为5.5;该芥子酶在37～80℃范围内有较广泛的温度适应性,并具有较好的80℃热稳定性;NaCl对该酶有明显的抑制作用;低浓度抗坏血酸具有激活芥子酶的作用,抗坏血酸终浓度为1.5mmol/L时,酶活力最大。RT-RCR分析,证实了TGG5只在拟南芥根中特异表达,这表明TGG5可能代表了一个芥子酶基因新亚家族。
- 辛曙丽张家明
- 关键词：拟南芥芥子酶RT-PCR酶活性
- 拟南芥芥子酶基因TGG5的克隆、表达及酶活特性研究
- 芥子酶是广泛存在于十字花科植物中的一类降解硫代葡萄糖苷的酶。芥子酶及其底物硫代葡萄糖苷组成一种独特的防御系统,即硫代葡糖苷-芥子酶系统。当植物受到病虫侵袭时,芥子酶与硫代葡萄糖苷结合,释放有毒的水解产物形成植物重要的化学...
- 辛曙丽
- 关键词：芥子酶RT-PCR毕赤酵母
- 文献传递
