牛姣
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
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- 中国野生毛葡萄白粉菌诱导响应VqAP基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2013年
- 【目的】克隆中国野生毛葡萄"商-24"天冬氨酸蛋白酶(AP)基因的cDNA序列,明确其在葡萄抗病防御机制中的作用。【方法】在前期获得的中国野生毛葡萄株系"商-24"AP基因(VqAP)EST序列的基础上,采用RT-PCR克隆AP基因的cDNA序列,对其序列及编码产物进行生物信息学分析,并通过实时定量PCR和半定量PCR,分析VqAP基因在白粉菌诱导不同时间(0,6,12,24,48,72,96和120h),不同激素(100μmol/L水杨酸,50μmol/L乙烯和0.5g/L茉莉酸甲酯)刺激及不同组织(嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须)中的表达情况。【结果】序列分析表明,VqAP基因序列长度为1 377bp,具有开放阅读框,编码458个氨基酸残基,相对分子质量为50.48ku,等电点为8.73。保守结构域分析表明,VqAP编码产物含有2个保守的具有催化活性的天冬氨酸残基,位于Asp-Thr/Ser-Gly(DT/SG)结构域,该基因编码的氨基酸序列属于植物天冬氨酸蛋白酶A1家族,为非典型的天冬氨酸蛋白酶。荧光定量PCR结果表明,接种白粉菌后6h,VqAP基因表达量为0h的6倍多,之后迅速下调;不同激素处理后,该基因也均诱导表达,这可能是由于VqAP基因参与了植物早期的抗病反应,以及由不同激素诱导的发病相关基因的调节作用。半定量PCR结果表明,在葡萄嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同组织中VqAP基因的表达量不同,这可能与它参与了植物不同组织中功能蛋白的合成与降解有关。【结论】VqAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控,可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。
- 牛姣王西平
- 中国野生毛葡萄白粉病响应基因克隆及表达分析
- 葡萄白粉病（Uncinula necator (Schw.）Burr.)是一种危害欧洲葡萄的世界性真菌病害，严重危害葡萄的产量和质量。中国野生毛葡萄对白粉病具有很高的抗性，因此进行毛葡萄抗白粉病基因克隆及其表达研究，对于...
- 牛姣
- 关键词：毛葡萄
- 中国野生毛葡萄病原菌诱导响应VqCOI1基因的克隆及表达分析被引量：3
- 2012年
- 【目的】为了验证COI1基因在葡萄抗病防御机制中的作用,【方法】在前期通过抑制消减杂交技术(SSH)获得中国野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’COI1基因EST序列的基础上,采用RT-PCR从毛葡萄‘商-24’中分离到COI1基因cDNA序列,并通过实时定量PCR和半定量PCR分析了COI1基因的表达特异性,以期验证其在葡萄抗病防御机制中的作用。【结果】序列分析表明,VqCOI1基因长2 455 bp,编码598个氨基酸残基,相对分子量为67.87 ku,等电点为5.85。同源性分析表明,它与已克隆的大豆(Glycine max)COI1基因(GenBank登录号:AAZ66745.1)相似性最高为79%。实时定量PCR技术用来检测VqCOI1基因在受到病原菌侵染和激素处理时在抗病品种‘商-24’中的表达情况,结果表明,在白粉菌诱导初期,抗病的毛葡萄株系‘商-24’VqCOI1基因表达量升高,这可能是因为它参与了病原菌诱导的JA信号调节途径。水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、乙烯(Eth)处理表明VqCOI1基因表达受激素分子调节,这些信号分子可能交叉调节这一基因的表达。在嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同葡萄组织中的表达表明Vq-COI1基因的表达具有空间差异性。【结论】这些结果暗示着VqCOI1的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控,很有可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。
- 牛姣周存田王西平
- 关键词：中国野生葡萄克隆
- 中国野生葡萄病原菌诱导响应VqSAP基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2012年
- 【目的】为了验证SAP基因在葡萄抗病防御机制中的作用，【方法】在前期通过抑制消减杂交技术（SSH）获得中国野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相关蛋白（SAP）基因EST序列的基础上，采用RT—PCR从毛葡萄‘商-24’中分离到SAP基因cDNA序列，并通过实时定量PCR和半定量PCR分析了SAP基因的表达特异性。【结果】序列分析表明该基因具有完整的的开放阅读框，序列长度为819bp，编码272个氨基酸残基，相对分子质量为30．56ku，等电点为8．78，将其命名为VqSAP。多重比较结果显示VqSAP基因与油棕、玉米、萱草、拟南芥、水稻等植物SAP基因的同源性为65％～74％。实时定量结果表明，在白粉菌诱导初期，抗病的毛葡萄株系‘商-24’和感病的华东葡萄株系‘湖南-1’VqSAP基因表达量均升高，这可能是因为它参与了病原菌诱导的细胞程序性死亡过程。水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、乙烯（Eth）处理表明衰老相关蛋白基因表达受激素分子调节，但在抗病和感病株系中基因的表达量有所差异。在嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同葡萄组织中的表达表明VqSAP基因的表达具有空间差异性。【结论】这些结果暗示着VqSAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控，很有可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。
- 牛姣张玉成郭荣荣王西平
- 关键词：毛葡萄克隆
- 葡萄醛脱氢酶(ALDH2)基因进化、表达及启动子功能的生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】研究葡萄醛脱氢酶ALDH2基因家族中ALDH2B4、ALDH2B8和ALDH2B9 3个成员的进化关系,对其在病原菌侵染、非生物胁迫及激素处理下的表达进行分析,为揭示ALDH2基因在植物逆境胁迫下的作用机理提供理论依据。【方法】运用生物信息学方法,鉴定葡萄ALDH蛋白序列;通过葡萄和拟南芥ALDH2基因的系统发育树、基因结构及同线性分析探讨其进化关系;利用葡萄Affymetrix芯片数据,分析葡萄ALDH2(ALDH2B4、ALDH2B8和ALDH2B9)基因在病原菌侵染、非生物胁迫和激素处理下的表达谱;采用在线软件PlantCARE分析3个葡萄ALDH2基因的启动子元件组成差异。【结果】在葡萄基因组中共鉴定出23个ALDH基因,并发现了ALDH2基因的可变剪接现象。基因结构分析结果表明,3个葡萄ALDH2基因的内含子/外显子组成高度相似,且均是通过大规模基因倍增产生的;仅有ALDH2B4具有剪接变体。葡萄与拟南芥的ALDH2基因位于同线区域,表明葡萄与拟南芥的ALDH2基因具有共同的祖先,ALDH2基因先于植物分化而存在。表达分析结果表明,VvALDH2B8是一个多病原菌和非生物胁迫响应基因,VvALDH2B4是一个渗透胁迫响应基因。葡萄的3个ALDH2基因的启动子区域均含有逆境胁迫响应元件,在VvALDH2B8上还发现了病原菌侵染响应元件Box-W1。【结论】葡萄的3个ALDH2基因虽然具有共同的祖先,但其在逆境条件下的表达差异很大,VvALDH2B8和VvALDH2B4可能在植物抵抗逆境胁迫中起重要作用。
- 张玉成牛姣徐晓召王华王西平
- 关键词：葡萄醛脱氢酶逆境胁迫启动子
