杨敬宁
- 作品数：55 被引量：304H指数：8
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- 可溶性HLA-G1抗原肽复合物的体外折叠及其功能研究被引量：6
- 2005年
- 目的:体外折叠形成可溶性HLA G1抗原肽复合物,并研究其生物学功能。方法:以原核表达的可溶性HLA-G1的重链及轻链β2m,与人工合成的抗原九肽体外进行共折叠复性。将折叠产物通过SephadexG75层析柱纯化,经Westernblot进行构象鉴定。探讨可溶性HLA-G1分子对NK细胞杀伤活性的影响,对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响,以及对活化T细胞凋亡的影响。结果:折叠产物可与mAbW6/32特异性结合,在Westernblot的鉴定中呈阳性反应。可溶性HLA-G1可有效地抑制NK细胞的细胞毒作用,抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖,促进活化T细胞发生凋亡。结论:体外折叠成功地形成可溶性HLA-G1抗原肽复合物,该复合物具有抑制NK细胞和T细胞的活性。
- 杨敬宁吴雄文梁智辉韩军艳黄亚非龚非力
- 关键词：细胞毒作用增殖凋亡
- 硒化壳聚糖促进体外培养皮肤成纤维细胞增殖被引量：1
- 2010年
- 目的研究硒化壳聚糖对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法用不同剂量(25、50、100、200、400mg/L)硒化壳聚糖作用于成纤维细胞,光镜下观察药物对细胞形态的影响;MTT法、3H-TdR掺入法、细胞生长动力学研究用于检测药物对细胞增殖影响,LDH漏出率检测药物对细胞增殖及损伤的影响,并以等体积细胞培养液处理为对照组。结果各药物浓度组处理细胞后,细胞形态未见明显改变,均可使细胞吸光度值增加,细胞倍增时间缩短,促进表皮细胞对3H-TdR的掺入(P<0.05),降低LDH漏出率(P<0.05)。结论硒化壳聚糖对体外培养皮肤成纤维细胞增殖具有促进作用。
- 邓守恒杨敬宁曹凤军蔡晓军邓守平陈萍
- 关键词：硒化壳聚糖皮肤成纤维细胞细胞增殖
- 可溶性丙型肝炎病毒E2糖蛋白抑制人活化CD4^+T细胞的促炎细胞因子分泌
- 2020年
- 目的探索可溶性丙型肝炎病毒(HCV)E2糖蛋白对人活化CD4^+T细胞的免疫调节作用。方法真核表达质粒pcDNA3.1-HCV sE2转染HEK293T细胞,细胞培养上清经Ni-NTA树酯亲和层析纯化可溶性HCV E2蛋白。应用流式细胞术分选健康捐献者外周血CD4^+T细胞,经1.0μg/mL小鼠抗人CD3单克隆抗体、1.0μg/mL小鼠抗人CD28单克隆抗体刺激培养48 h。刺激后的CD4^+T细胞分成空白对照组、(2、5、10)μg/mL HCV E2蛋白组,后者经HCV E2糖蛋白处理。培养36 h后,流式细胞术检测CD4^+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达变化,ELISA检测细胞培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果与空白对照组比较,HCV E2蛋白组CD4^+T细胞PD-1表达轻微降低,但差异无统计学意义。与空白对照组比较,可溶性E2蛋白组CD4+T细胞分泌TNF-α水平明显降低,并呈剂量依赖性;可溶性E2蛋白组CD4^+T细胞分泌IFN-γ水平明显降低,但高低剂量组无明显差异。结论可溶性HCV E2蛋白抑制人活化CD4^+T细胞促炎细胞因子的分泌。
- 杨敬宁杨敬宁
- 关键词：CD4^+T细胞
- 硒化壳聚糖对急性早幼粒细胞性白血病NB4细胞的作用及其机制探讨
- 邓守恒陈萍曹凤军曾小华张正洪蔡晓军王贤和杨敬宁李林均类健翔俞远东苟志斌许涛佐志刚张军
- 白血病的发病原因及其病理生理机制十分复杂，治疗效果不令人满意，该课题针对这一难题在体外观察了一种新合成的有机硒(硒化壳聚糖)对急性早幼粒性白血病NB4细胞增殖、凋亡、分化的影响并探讨了其可能的作用机制，为这一领域的重要突...
- 关键词：
- 关键词：急性早幼粒细胞性白血病病理生理机制化疗药治疗硒化壳聚糖
- 卵裂球细胞乙型肝炎病毒FISH检测法的建立被引量：1
- 2009年
- 目的：建立一种灵敏、特异的卯裂球细胞乙型肝炎病毒（HBV）感染的检测方法。方法：根据HBV基因上的保守序列设计并合成引物，应用PCR技术制备探针并进行生物素标记。废弃的胚胎卯裂球经激光打孔，活检2～4个卵裂球细胞，利用生物素标记的探针，应用荧光原位杂交技术（FISH）检测HBV感染情况。结果：在HBV的感染者的38例子代胚胎卵裂球细胞，11例呈现阳性信号，健康对照组未检测到阳性信号。结论：荧光原位杂交技术（FISH）可用于卵裂球细胞HBV感染的检测，在体外受精-胚胎移植（IVF—ET）实践中对降低HBV垂直传播有重要意义。
- 张昌军杨敬宁王华罗清炳彭海英董毅飞
- 关键词：乙型肝炎病毒卵裂球荧光原位杂交技术
- 人可溶性单链β2m-HLA-A2-BSP融合蛋白表达载体的构建及其表达被引量：2
- 2006年
- 目的构建并表达了人可溶性单链β2m-HLA-A2-BSP(scHLA-A2)融合蛋白表达载体,为进一步制备HLA-A2四聚体及其功能研究奠定了基础。方法应用重叠延伸PCR(overlap-PCR)对编码HLA-A2的cDNA序列进行一个碱基的同义突变,并将β2m和HLA-A2胞外段亚单位两段编码序列的cDNA通过一疏水性多肽接头(Gly4Ser)3的DNA序列进行前后拼接,并利用引物所带的BSP编码序列,构建单链β2m-HLA-A2-BSP融合基因,将测序正确的β2m-HLA-A2-BSP融合基因插入原核表达载体pET-22b中,转化BL21(DE3)细菌,SDS-PAGE检测其表达,融合蛋白于体外抗原肽存在条件下稀释复性后由Western blot鉴定其空间构象。结果经DNA序列分析表明:同义突变与预期结果一致,β2m和HLA-A2-BSPl、inker的连接顺序、方向及序列完全正确,表达载体转化BL21(DE3)细菌后可表达β2m-HLA-A2-BSP融合蛋白,SDS-PAGE显示该融合蛋白分子量为45 kD,与理论值一致,将融合蛋白与特异性抗原肽在体外进行稀释复性后经Western blot鉴定表明该复合物能与HLA-Ⅰ类分子特异性结合的单克隆抗体W6/32结合。结论人可溶性单链β2m-HLA-A2-BSP融合蛋白的构建及其表达获得成功,经体外复性可获得HLA-Ⅰ类分子天然构象。
- 熊敏杨敬宁李青吴雄文
- 氧化低密度脂蛋白抑制人外周血CD4^+T细胞Notch1、Notch2的表达被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人CD4+T细胞Notch分子表达的影响。方法:采用密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,分离淋巴细胞,经流式细胞术分选CD4+T细胞,然后分为4组:空白对照组,低、中、高浓度组,加入浓度分别为0、50、100、200 mg/L的ox-LDL培养72 h,流式细胞术检测CD4+T细胞Notch1、Notch2分子的表达变化。结果:流式细胞术检测显示,空白对照组,低、中、高浓度组的Notch1表达分别为(3.81±0.34)%、(1.68±0.25)%、(0.73±0.21)%、(0.31±0.17)%。与空白对照组比较,低、中、高浓度组Notch1表达率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组,低、中、高浓度组的Notch2表达分别为(15.75±1.48)%、(26.33±2.68)%、(12.42±3.19)%、(9.87±1.65)%。与空白对照组比较,低浓度组Notch2表达率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),中、高浓度组Notch2表达率反而明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的ox-LDL能明显抑制人外周血CD4+T细胞Notch1、Notch2分子表达,可能与ox-LDL抑制Th2分化而促进Th1异常分化有关,参与动脉粥样硬化的发生、发展。
- 杨敬宁郭阳陈俊李平飞赵俊杰
- 关键词：氧化低密度脂蛋白CD4+T细胞
- 硒化壳聚糖对NB4细胞的诱导分化作用
- 目的：研究硒化壳聚糖对人急性早幼粒细胞性白血病NB4细胞分化的影响，并且探讨这种影响与细胞CD11b抗原分子的关系。方法：NBT还原法检测NB4细胞分化，流式细胞术检测CD11b抗原分子的表达。结果：经50 mg·L~-...
- 邓守恒陈萍邓守明杨敬宁
- 关键词：硒化壳聚糖NB4细胞诱导分化白血病抗原性
- 文献传递
- 黄柏对大鼠口腔溃疡的作用及其对TNF-α水平的影响被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨黄柏对大鼠口腔溃疡的治疗效果及其作用机制。方法:采用90%苯酚灼烧的方法制备大鼠口腔溃疡模型,观察不同浓度黄柏的治疗效果。采用ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量。结果:黄柏可明显缩短口腔溃疡病程。口腔溃疡造模后大鼠血清TNF-α含量明显升高,与正常对照组相比,有显著性差异(P<0.01);黄柏治疗后,高、低剂量组大鼠血清TNF-α含量明显降低,尤以高剂量组TNF-α的含量降低明显,低于模型对照组(P<0.05)。结论:黄柏可降低血清TNF-α含量,减轻炎症损伤,这可能是黄柏治疗口腔溃疡的机制之一。
- 杨敬宁袁敏邹每伶陈冰蒋婧婧张微观刘明超周清梓
- 关键词：口腔溃疡口腔溃疡病理学
- 心脏骤停后综合征动物模型的建立被引量：16
- 2010年
- 目的 建立一种稳定的、能进行心脏骤停后综合征研究的动物模型.方法 大耳白兔30只,随机分为3组,每组10只.兔麻醉后逆行气管插管、右侧股动脉插管,静脉注射司可林后,在呼气末夹闭气管插管,当达到心脏骤停标准后,分别维持4、5、6 min,然后开始进行常规心肺复苏,观察动脉血压变化、复苏后综合征发生情况和生存时间.结果 夹闭气管插管后5～7 min内,所有兔均达到心脏骤停标准.心脏骤停持续4、5、6 min组心肺复苏即刻成功率分别为100%、86%、77%,24 h存活率分别为100%、63%、27%,兔存活时间分别为（120.00±0.00）h,（58.00±41.52）h,（28.00±39.80）h,差异有统计学意义（P＜0.01）.复苏后综合征发生情况则随心搏停止持续时间的延长而加重.结论 兔心脏骤停持续时间以5 min为适宜,心肺复苏成功率及复苏成功后24 h生存率高.该模型稳定,可重复性好,可作为心脏骤停后综合征研究的动物模型.
- 肖敏吕军刘菊英张绪国罗明陈静宜李小燕杨敬宁
- 关键词：心脏骤停心肺复苏心脏骤停后综合征动物模型
