刘强
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- Notch信号通路在骨形态发生蛋白9诱导的多潜能干细胞成骨分化中的作用初步研究
- 第一部分Hey1基因在骨形态发生蛋白9介导的多潜能干细胞成骨分化过程中表达及其功能研究
目的:明确BMP9介导的MSCs成骨分化中Hey1的表达情况,并探讨Hey1对BMP9介导的MSCs成骨分化作用。方法:利...
- 刘强
- 关键词：多潜能干细胞NOTCH信号通路DAPT
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞Hey1基因表达水平荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：2
- 2010年
- 目的:建立骨髓间充质干细胞中Notch信号通路靶基因Hey1表达水平的荧光定量RT-PCR方法。方法:培养骨髓间充质干细胞(C_2C_(12)),提取总RNA,验证内参基因β-actin和目的基因Hey1的扩增效率,优化PCR条件,分析扩增曲线、融解曲线,凝胶电泳验证定量PCR产物。结果:内参基因β-actin和目的基因Hey1扩增效率一致(扩增曲线斜率差<0.1),提示可以使用比较Ct法对Hey1进行相对定量分析;扩增曲线、融解曲线及凝胶电泳结果提示PCR产物特异性好。结论:本研究所建立的用于Hey1基因表达分析的定量RT-PCR检测方法,准确可靠,可用于Bmp9和Notch信号通路的研究。
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- 关键词：骨髓间充质干细胞荧光定量RT-PCR
- Notch信号通路在骨形态发生蛋白9诱导的多潜能干细胞成骨分化中的作用被引量：9
- 2010年
- 目的初步探讨Notch信号通路对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导多潜能干细胞成骨分化的作用和机制。方法腺病毒表达载体(AdBM P9/AdGFP、AdHey1/AdRFP)和BMP9/GFP条件培养基处理C2C12细胞,细胞化学染色和活性定量检测早期成骨标志物碱性磷酸酶(ALP),定量RT-PCR检测Notch信号通路靶基因Hey1,以了解Hey1在AdBMP9介导的成骨分化作用中的表达和作用;采用细胞密度实验和Notch信号通路抑制剂(DAPT)检测Notch信号通路对成骨的影响;在AdBMP9/AdGFP处理下,检测细胞上Notch信号通路配体、受体表达变化。结果 AdBMP9作用下,1、3、5、7dALP活性持续增加(P<0.05);Hey1一过性升高,其与AdBMP9呈剂量依赖性;Hey1可协助BMP9成骨(P<0.05),不能单独起效。80%和40%细胞密度组ALP量和Hey1表达均高于20%组(P<0.05);DAPT组中ALP活性明显降低(P<0.05);在AdBMP9作用下,Notch信号通路配受体有不同程度的上调,其中受体Notch4和配体Jag-1上调最为明显(分别为11.3倍和5.1倍)。结论 Notch信号通路参与BMP9介导的多潜能干细胞成骨分化,其可能的机制是BMP9通过诱导Notch通路配体、受体表达上调使Hey1升高,后者协同成骨。
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- 关键词：NOTCH信号通路多潜能干细胞DAPT
