栾英姿
- 作品数：11 被引量：71H指数：4
- 供职机构：山东大学附属济南市中心医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定
- 目的构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒。为进一步研究AFP基因功能莫定基础。方法:沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRN...
- 张玉玲苏占涛郏雁飞郑燕栾英姿汪运山
- 关键词：质粒甲胎蛋白
- 文献传递
- HLA-G在卵巢癌细胞株SKOV-3中表达的实验性研究被引量：2
- 2008年
- 目的:检测卵巢癌细胞株SKOV-3中人白细胞抗原G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)的表达。方法:用逆转录酶聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)、免疫细胞化学法及流式细胞术检测卵巢癌细胞株SKOV-3中HLA-G的表达,以绒毛膜癌细胞株JEG-3中HLA-G的表达为阳性对照。结果:(1)免疫细胞化学显色显示SKOV-3细胞膜及细胞浆内均有HLA-G的表达;(2)RT-PCR结果表明,SKOV-3细胞中有HLA-G mRNA表达;(3)流式细胞术结果提示,SKOV-3细胞中HLA-G阳性率是33.77%。结论:卵巢癌细胞株SKOV-3中HLA-G mRNA及HLA-G蛋白表达为阳性。
- 王琳董建春汪运山栾英姿徐淑媛
- 关键词：卵巢肿瘤
- 氧化苦参碱诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用的实验研究被引量：30
- 2002年
- 目的 探讨氧化苦参碱对卵巢癌细胞SKOV3诱导凋亡作用。方法 采用MTT法、DNA凝胶电泳、生长曲线、荧光染色等实验技术研究氧化苦参碱在体外对SKOV3细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用。结果 氧化苦参碱对SKOV3细胞生长有明显的抑制作用 ,且这种抑制作用呈浓度依赖性。细胞经 0 189mmol·L-1和 0 3 78mmol·L-1的氧化苦参碱作用 48h后 ,即呈现典型的细胞凋亡形态学变化和DNA片段的梯形条带。
- 侯华新黎丹戎栾英姿陈丽
- 关键词：氧化苦参碱卵巢癌苦参MTT法DNA凝胶电泳
- AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础。方法沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列。结果纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的条带(260 bp左右)大小,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符。结论成功构建了针对人AFP基因的miRNA表达质粒。
- 张玉玲栾英姿苏占涛郑燕郏雁飞汪运山
- 关键词：质粒甲胎蛋白基因
- Y染色体微缺失与无精子症少精子症关系的研究被引量：5
- 2009年
- 目的探讨Y染色体微缺失与无精子症、少精子症的关系。方法应用多重聚合酶链反应技术(PCR)对127例无精子症(80例)和严重少精子症(47例)的不育患者及60例正常生育男性进行Y染色体AZF基因、DAZ外显子检测。结果无精子和严重少精子患者Y染色体微缺失7例,缺失率5.51%。其中AZFc缺失2例,DAZ外显子缺失5例。少精子症组缺失率8.51%,无精子症组缺失率3.75%,小睾丸组的缺失率6.54%,正常睾丸组缺失率4.94%,正常生育男性AZF基因和DAZ外显子均未检测到缺失。结论(1) AZF因子、DAZ外显子微缺失可导致无精子症、严重少精子症;(2)绝大部分无精子、严重少精子患者Y染色体AZF因子、DAZ外显子并没有微缺失,有必要再去寻找新的精子发生基因。
- 王恒才栾英姿路西兰侯孟彦张迎春王红霞张意茗
- 关键词：染色体少精子症不育
- 拓扑异构酶与卵巢恶性肿瘤耐药关系的研究进展被引量：1
- 2003年
- 拓扑异构酶(topoisomerase,topo)是参与DNA拓扑结构调整和转录、复制、修复的重要工具酶,由活性Tyr残基向DNA发动亲核攻击,导致DNA单股或双股断裂。Topo蛋白的含量、活性、功能改变是卵巢癌耐药发生的重要机制之一,作用于相关信号传导通路的上游。TopoⅡ蛋白表达增加的卵巢癌患者预后较差。TopoⅠ、Ⅱ抑制剂如TPT、VP-16等在复发卵巢癌的有效率大致为13％～25％,现已成为二线用药的首选。
- 栾英姿李力
- 关键词：卵巢癌耐药性拓扑异构酶VP-16
- 5种耐药卵巢癌细胞株的建立及部分耐药相关基因的表达情况
- 目的：比较耐药与非耐药卵巢癌细胞之间部分耐药相关基因的表达差异。
方法：用SKOV-3,A2780卵巢癌细胞分别建立顺铂、卡铂、泰素耐药的细胞株S-SB,S-KB,A-SB,A－KB和A－TS,验证其有关的生物...
- 栾英姿李力黎丹戎张纬唐步坚
- 关键词：卵巢癌癌细胞株化疗药物
- 文献传递
- FUT3基因靶向miRNA表达载体的构建及鉴定
- 2008年
- 背景:研究发现,Lewis血型抗原与多种恶性肿瘤关系密切,岩藻糖基转移酶(fucosyltransferase,FUTs)是参与合成Lewis抗原的关键酶,FUT3是其中之一。目的:设计并构建靶向FUT3基因的miRNA干扰质粒,为探索肿瘤基因治疗新途径奠定基础。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-05/10在济南市中心医院医学实验诊断中心完成。材料:BLOCK-iTTM PolⅡmiR RNAi Expression Vector Kits(含荧光基因GFP)、T4DNA连接酶购自invitrogen公司;大肠杆菌菌株One Shot TOP10购自invitrogen公司。方法:根据GenBank中FUT3的序列,应用www.invitrogen.com网站的设计软件设计、合成针对FUT3 miRNA的相应Oligo DNA,退火后与BLOCK-iTTM Pol ⅡmiR RNAi Expression Vector相连接,转化感受态E.coliTOP10。主要观察指标:①重组质粒DNA序列分析。②质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳检测。③紫外分光光度计检测。④聚合酶链反应鉴定。结果:经测序鉴定和聚合酶链反应鉴定证实成功构建针对人FUT3基因的miRNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-FUT3-miR;质粒DNA的琼脂凝胶电泳检测和紫外分光光度计分析结果确认所提质粒纯度较高,可以用于后续试验。结论:FUT3靶向miRNA表达载体构建成功。
- 辛永红岳庆祝宋玉和汪运山张玉玲苏占涛栾英姿
- 关键词：MIRNARNA干扰靶向治疗
- P53突变型胃癌细胞株细胞凋亡及基因调控机制的研究
- 目的:研究顺铂作用于p53野生型AGS、p53突变型MGC- 803、SGC-7901三种胃癌细胞株后,引起细胞凋亡及p53下游基因表达的变化,探讨其发生机制。方法:不同浓度顺铂(浓度分别为0μg/ml、1μg/ml、2...
- 肖东杰徐淑媛栾英姿王琳汪运山
- 文献传递
- 五种卵巢癌耐药细胞系的建立及其部分耐药相关基因的表达被引量：28
- 2004年
- 目的 建立 5种卵巢癌耐药细胞系 ,并比较耐药与其非耐药卵巢癌细胞系之间部分耐药相关基因的表达差异。方法 用卵巢癌细胞系SKOV3、A2 780分别建立顺铂、卡铂、紫杉醇 (商品名 :泰素 )耐药的细胞系SKOV3/DDP、SKOV3/CBP、A2 780 /DDP、A2 780 /CBP、A2 780 /toxol,验证其有关的生物学指标 ;并用RT PCR技术检测耐药与其非耐药卵巢癌细胞系之间部分基因的表达差异。结果 (1)所有耐药细胞系对相关药物的耐药指数 (RI)较其非耐药细胞系均升高约 3倍或以上 ,并对临床常用的一些化疗药物表现出不同程度的耐受性 ,RI达 2～ 2 0倍 ;耐药细胞的生长速度较其非耐药细胞明显减慢 (P <0 0 1) ;群体倍增时间明显延长 1 4～ 2 4倍 (P <0 0 1) ,但G1、G2 、S期细胞比例无明显改变 (P >0 0 5 ) ;耐药细胞中药物浓度较其非耐药细胞中下降约 2 0～ 8 5倍 (P <0 0 5 )。 (2 )在检测的耐药相关基因中 ,耐药细胞较其非耐药细胞中表达下降的有p5 3、肺耐药蛋白 (LRP 1)、多药耐药相关蛋白 (MRP 1)基因 ,表达升高的有蛋白激酶C(PKC)、拓扑异构酶 (topo)Ⅰ、topoⅡβ基因 ,无明显改变的有谷胱甘肽 S 转移酶 (GST pi)、topoⅡα基因 ,多药耐药蛋白 (MDR 1)基因的表达改变不确定 ,包括升高和下降。
- 栾英姿李力黎丹戎张玮唐步坚
- 关键词：卵巢肿瘤抗药性MDR基因
