唐华
- 作品数：15 被引量：17H指数：2
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- 西藏小型猪肋软骨细胞的分离培养及鉴定
- 目的 分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，并对其进行甲苯胺蓝染色鉴定。方法 取3日龄西藏小型猪，二步消化法分离培养西藏小型猪肋软骨细胞；对所分离培养的软骨细胞进行甲苯胺蓝染色。结果 成功分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，甲苯胺蓝染...
- 刘薇史俊文陈佩雯张婷婷唐华袁进顾为望肖东
- 关键词：西藏小型猪软骨细胞甲苯胺蓝
- 西藏小型猪骨髓间充质干细胞分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记间充质干细胞
- 2012年
- 目的建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外分离培养及纯化方法，并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统。方法密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs，差速贴壁法不断纯化，流式细胞仪检测第3代BMSCsCD45、CD90和CD105表达；此外，用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs，倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率。结果①密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性。②借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs，感染效率为84．1％。结论利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs，基于BMSCs建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统。
- 唐华毕文浩艾威李德胜潘光辉史俊文刘薇黄威肖东顾为望
- 关键词：西藏小型猪慢病毒
- 西藏小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养及借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪皮肤成纤维细胞
- 目的 分离培养西藏小型猪皮肤成纤维细胞,并借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪皮肤成纤维细胞。方法 取3日龄西藏小型猪,冷胰酶消化法分离培养西藏小型猪皮肤成纤维细胞；按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒(...
- 刘薇史俊文唐华陈佩雯李静张婷婷袁进顾为望肖东
- 关键词：慢病毒绿色荧光蛋白
- 西藏小型猪与高原藏猪的血液生理、生化值的比较
- 目的：比较西藏小型猪与高原藏猪的血液生理、生化指标的差异。方法：采用全自动血液细胞和生化分析仪测定21个血液生理生化指标。结果：藏猪与西藏小型猪之间，红细胞、白细胞、血小板计数、总胆固醇、血清甘油三酯指标的测定差异显着，...
- 岳敏范沛唐华黄威顾为望
- 关键词：西藏小型猪血液生理血液生化指标
- 文献传递
- 西藏小型猪胰岛细胞体外分离和纯化方法
- 2013年
- 的确定成体西藏小型猪胰岛细胞体外分离、纯化的理想条件，为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛细胞。方法对比不同质量浓度的胶原酶（1mg／ml，2mg／ml，3mg／ml，4mg／m1）和同一质量浓度不同时间点（0min，15min，30min，45min，60min，75min，90min）分离获得胰岛细胞的数量和效果；使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心和静置4种方法纯化胰岛细胞悬液，比较最终收集到的胰岛细胞数量和效果；用DTZ染色计算胰岛细胞的纯度；用AO／PI染色计算胰岛细胞存活率。结果确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛细胞的最佳时间，胶原酶lmg／ml和2mg／ml组为45min，3mg／ml和4mg／ml组为30min，各组在最佳时间点获得胰岛细胞的数量最多的为1mg／ml组，胰岛细胞形态完整；4种纯化方法中，收集的胰岛细胞数量由多到少依次为静置组〉Ficoll400密度梯度离心组〉离心组〉淋巴分离液离心组。经AO／PI染色后检测胰岛细胞的存活率为95．00％以上。结论在组织块剪碎消化的情况下，胶原酶质量浓度lmg／ml、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛细胞，Ficoll400密度梯度离心的纯化手段收集到的胰岛细胞效果最好。
- 戚文军汪亦男胡强唐华那顺巴雅尔顾为望
- 关键词：西藏小型猪胰岛细胞纯化
- 慢病毒载体法制备遗传工程猴和小型猪的现状及应用前景展望
- 较小鼠等啮齿类动物而言，猴和小型猪等大型实验动物在亲缘关系上与人类更为接近，在解剖、生理生化代谢及疾病发病机制等多方而与人类更接近，使它们在复制人类疾病模型，研究疾病发病机制和新药研发等中有无可替代的应用。而制备遗传工程...
- 刘薇贾俊双唐华林晓琳袁进顾为望肖东
- 关键词：小型猪体细胞核移植
- 小型猪胰岛细胞异种移植治疗Ⅰ型糖尿病的实验研究
- 研究背景 糖尿病（diabetes mellitus, DM）是严重影响人类健康和生命的高发病。糖尿病又分为Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型糖尿病为胰岛素依赖型,大约5-10%的糖尿病患者为Ⅰ型糖尿病。Ⅱ型糖尿病为非胰岛素依赖型,...
- 唐华
- 关键词：西藏小型猪胰岛异种移植糖尿病
- 文献传递
- DKK1转基因体细胞克隆西藏小型猪的制备
- 目的 DKK1基因是wnt通路的阻断因子,有研究显示,在小鼠皮肤特异性过表达DKK1基因,会导致小鼠出现无毛表型.本研究利用转基因体细胞核移植的方法制备皮肤特异性过表达DKK1基因的转基因体细胞克隆西藏小型猪,以创制无毛...
- 刘薇吴丽红岳敏那顺巴雅尔唐华史俊文袁进肖东顾为望
- 关键词：西藏小型猪DKK1慢病毒体细胞核移植
- 3种腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率被引量：1
- 2012年
- 目的比较3种不同血清型腺相关病毒(AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率。方法原代分离培养西藏小型猪胚胎成纤维细胞并进行形态学鉴定,按照感染复数(MOI)为103、104、105转染传代两次的猪胚胎成纤维细胞,流式细胞学检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率,并在倒置显微镜下观察转染后绿色荧光的表达强度;同时,应用MTT方法检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的毒性。结果腺相关病毒AAV2-EGFP对PFF的转染效率随MOI值的增加而增高,MOI为103、104、105时,转染效率分别为(33.68±1.18)%、(50.80±2.59)%和(60.08±1.08)%,而其他两种血清型病毒感染效率均低于AAV2-EGFP。3种病毒转染PFF过程中,细胞生长正常,MTT显示各个转染组与对照组(未转染组)在D570处吸光度无显著差异。结论AAV2血清型载体对体外培养的猪胚胎成纤维细胞的感染效率显著高于其他几种血清型,AAV8和AAV9对PFF感染能力极差,筛选AAV2作为西藏小型猪基因打靶的最适病毒载体;同时,3类血清型病毒载体对猪胚胎成纤维细胞均无明显细胞毒性。
- 黄威毛莹莹刘薇唐华揭飞龙李红卫顾为望
- 关键词：腺相关病毒西藏小型猪胚胎成纤维细胞绿色荧光蛋白流式细胞技术
- 西藏小型猪肋软骨细胞的分离培养及鉴定
- 目的 分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，并对其进行鉴定。方法 实验采用3日龄西藏小型猪，二步消化法分离培养西藏小型猪肋软骨细胞(PCCs)，同样的方法分离培养小鼠的肋软骨细胞(MCCs)，观察两个物种软骨细胞的形态，并分别以...
- 刘薇史俊文岳敏张婷婷唐华袁进肖东顾为望
- 关键词：西藏小型猪软骨细胞甲苯胺蓝蛋白聚糖
