刘帅
- 作品数：28 被引量：54H指数：4
- 供职机构：内蒙古农业大学草原与资源环境学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科技资源平台项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 细菌人工染色体基因组文库构建关键技术研究被引量：6
- 2008年
- 基因组文库是进行分子克隆和基因结构与功能研究的基础,完整覆盖的基因组文库的构建,使基因组任何DNA片段的筛选和获得成为可能。细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)与其它载体系统相比具有转化效率高、嵌合体少、插入片段易回收,高覆盖率、稳定性强,并且具有易分离和操作等特性等优点而被广泛应用。作为物种保护策略的重要部分,构建我国濒危动植物品种基因组BAC文库,对于其遗传资源的保护和研究具有非常重要的作用。在查阅大量国内外相关资料的基础上,就BAC基因组文库构建过程中载体的制备、高分子量DNA的制备、大片段DNA的回收、连接与电击转化、基因组BAC文库质量鉴定等几个重点、难点问题进行了详细的论述和分析,对于构建高分子量插入片段、高覆盖率和稳定性的基因组文库提供理论基础与技术支撑。
- 刘长青吴宏梅包阿东陆涛峰刘帅张洪海唐学玺关伟军马月辉
- 关键词：细菌人工染色体基因组文库构建高分子量DNA
- 动物转基因技术的发展及应用被引量：4
- 2009年
- 综述了动物转基因技术的发展及应用情况,并对目前常用的动物转基因技术及其优缺点做了较系统的概述,指出了该技术目前存在的问题,并对其发展前景进行了展望。
- 余露露刘帅章嘎佟春玲关伟军马月辉卿素珠
- 关键词：转基因技术外源基因核移植
- 内蒙古大兴安岭林区不同采煤方式对植物多样性的影响被引量：1
- 2015年
- 以内蒙古大兴安岭林区内不同开采方式的煤矿为研究对象,采用样方调查法,通过对植物的种类组成、生活型、群落相似性及群落物种多样性等指标的分析,得出以下结论:1露采与井采群落内的第一优势种重要值由大到小为露采天然植被存留区>露采对照区>井采对照区>井采天然植被存留区;2露天开采对一、二年生草本的影响较大,井工开采对多年生草本的影响较大;3群落相似性:井工开采>露天开采;4露采煤矿共有植物7科14属19种,井采煤矿共有植物10科23属29种,均以菊科、禾本科为主,物种数减少比例:露天开采>井工开采,物种多样性指数变化:露天开采>井工开采。
- 尚洁蓝登明赵一阳刘帅王迎迎
- 关键词：大兴安岭林区植物多样性
- 动物生物反应器建立的主要方法与技术被引量：1
- 2008年
- 本文在查阅大量国内外相关资料的基础上,结合具体的实验操作原理和规程,就建立动物生物反应器模型的方法与技术、转基因动物的应用和转基因动物存在的问题等进行了概括性的论述。其目的在于为进一步探讨转基因的科学原理、最佳操作方法和技术,提高转基因的效率,建立理想的动物生物反应器等奠定基础。
- 刘帅刘长青包阿东陆涛峰吴宏梅关伟军马月辉
- 关键词：生物反应器转基因方法
- 细菌人工染色体的修饰及其转基因应用研究
- 2008年
- 细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)是一种新发展起来的DNA载体系统,它具有容量大、遗传特性稳定、易于操作等优点。广泛的应用于基因组文库构建、基因功能分析等方面。随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体进行有目的修饰已成为功能基因组学研究的一个重要环节。BAC载体转基因技术可能成为避开基因打靶获得高效表达的转基因生物的另一途径。本文介绍了BAC作为转基因栽体的几种修饰方法及其在转基因研究上的应用。
- 吴宏梅刘长青刘帅陆涛峰包阿东关伟军马月辉
- 关键词：细菌人工染色体
- 不同样品保存液和保存条件对动物细胞体外培养的影响
- 2009年
- 本研究取矮脚油鸡7日龄胚胎作为试验材料,用MEM、全培养基和PBS3种不同的液体对鸡胚组织进行保存,同时在不同保存温度条件下按不同保存时间梯度,采用组织块贴壁培养法进行体外细胞培养。对细胞的保存液变化,细胞形态、细胞生长等情况进行研究,分析样品保存条件对细胞体外培养和细胞系构建的影响。结果发现,4℃保存的组织块培养效果明显优于室温保存;无论在4℃或常温,基础培养基保存的组织块培养效果明显优于保存液,全培养基效果最好。常温保存48h以内3种保存液培养效果差别甚微,48h后培养效果均急剧下降,96h后保存在PBS中的组织失活,未长出细胞。本研究结果为建立细胞系采集样品的保存提供了一定的参考。
- 吴宏梅娜日苏刘帅陆涛峰包阿东张文秀关伟军马月辉
- 关键词：动物细胞体外培养
- 北京油鸡ADSL基因的克隆、表达及其结构与功能分析被引量：5
- 2008年
- 采用RT-PCR与RACE方法扩增出北京油鸡腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)基因全长cDNA序列,亚克隆和序列分析结果表明:该基因开放阅读框长为1455个碱基,编码485个氨基酸;5′端非转录调控区具有典型管家基因的特征,在临近起始密码子-27号碱基发生C→T突变,该突变使得本来不是核呼吸因子2(NRF-2)结合位点的CTCC突变为NRF-2结合位点CTTC。将ADSL基因完整开放阅读框重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成北京油鸡ADSL基因融合表达载体pGEX-ADSL,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性克隆,IPTG诱导表达。经SDS-PAGE电泳显示重组融合蛋白在约80.5kD处有特异蛋白条带出现,与预期分子量大小一致,等电点为6.79。该蛋白的表达量随诱导时间的延长而增加,5h达最高值,达到细胞总蛋白的26.9%,且主要以不可溶的包涵体形式存在,经优化表达条件,成功地获得了可溶性的融合蛋白,经Glutathione Sepharase4B凝胶纯化后Western blotting检测表明其为北京油鸡ADSL蛋白,为其进一步的生物学功能及其应用研究鉴定基础。
- 刘长青刘帅包阿东陆涛峰吴宏梅张洪海唐学玺关伟军马月辉
- 关键词：北京油鸡基因表达
- 畜禽体外培养细胞生长规律研究被引量：4
- 2008年
- 本研究利用组织块贴壁培养法对鲁西黄牛、蒙古马、北京鸭和狼山鸡等4个品种体外培养细胞的生长、分化规律进行了研究。通过绘制其生长曲线和在激光共聚焦显微镜下拍摄细胞生长过程,初步分析成纤维细胞的生长、分化规律。试验结果表明,4个品种的细胞生长曲线均呈明显的"S"形,家畜和家禽的细胞潜伏期和停滞期的长短以及细胞群体倍增时间均有明显差异,蒙古马和狼山鸡体外培养细胞的单个细胞分裂期也有显著差异,蒙古马为97 min,而狼山鸡为85 min。本试验构建的4个品种成纤维细胞系不仅使畜禽遗传资源在细胞水平永久保存下来,而且为分子生物学研究提供宝贵材料。
- 陆涛峰刘长青吴宏梅张艳艳刘帅包阿东张文秀关伟军马月辉
- 关键词：畜禽成纤维细胞
- 蒙古马耳缘组织成纤维细胞系及其培养方法
- 本发明利用蒙古马耳缘组织进行细胞初代培养、传代培养最终获得高活率、高纯度蒙古马成纤维细胞系，其保藏编号为CGMCC No.1876属于细胞生物学领域。本发明培养出的成纤维细胞无上皮细胞等，细胞纯度高；冻存细胞质量稳定，且...
- 马月辉关伟军吴宏梅乌云其其格丁鸿刘帅
- 文献传递
- 影响畜禽肉质、风味、生长及抗病性状重要基因的分析被引量：2
- 2008年
- 作者在查阅大量国内外相关资料的基础上,结合具体的实验操作原理和规程,就影响畜禽肉质、风味、生长及抗病性状重要基因进行概括性的论述。其目的在于通过对影响家禽肉质、风味、生长及抗病等重要特色功能基因的论述和探讨,以期为家禽转基因研究、品种改良和新品种创新提供坚实的理论基础和技术支持。
- 刘帅道尔吉刘长青包阿东吴宏梅关伟军马月辉
- 关键词：畜禽抗病基因
