马鑫
- 作品数：15 被引量：24H指数：3
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- 相关领域：生物学医药卫生天文地球更多>>
- 早期胃腺癌原代细胞适配子的筛选与鉴定被引量：2
- 2013年
- 胃腺癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一,由于没有针对早期胃腺癌有效的诊断方法,目前胃腺癌手术治疗还主要针对中晚期患者,预后差.本文应用cell-SELEX技术,筛选早期胃腺癌原代细胞的适配子,为早期胃腺癌的诊断提供新的思路.从早期胃腺癌组织中分离得到早期胃腺癌原代细胞,应用体外合成全长88 bp中间含52 bp随机序列的单链DNA文库,通过对PCR扩增条件的优化,借助生物素-链霉亲和素磁珠系统,经cell-SELEX反复筛选,可获得针对早期胃腺癌原代细胞的特异性适配子.经12轮cell-SELEX筛选,ssDNA文库与早期胃腺癌原代细胞的亲和力由1 560上升到4 336,表明亲和力较高的适配子得到逐步富集.经克隆和测序,应用软件分析可知,30个克隆子中编号为C17和C27的2个序列完全一致,具同源性,二级结构预测可知单链DNA形成不同的茎环结构可能是适配子与早期胃腺癌原代细胞作用的结构基础.特异性分析显示,胃腺癌原代细胞组与正常胃粘膜上皮细胞、空白对照组之间荧光强度值差异非常显著(P<0.01);正常胃粘膜上皮细胞组与空白对照组之间差异不显著(P>0.05).经亲和力测定,各适配子与早期胃腺癌原代细胞的解离系数达到nmol/L,具有很高的亲和力.利用cell-SELEX技术成功筛选到早期胃腺癌原代细胞的适配子,为胃腺癌的早期诊断与治疗药物靶点方面的研究奠定了实验基础.
- 郭鹏习静张雪燕姚海燕马驰马鑫杨敏冯慧婷侯纯荣徐先云韩跃武
- 关键词：胃肿瘤腺癌适配子
- 低氧对人骨髓间充质干细胞基因表达谱的影响被引量：2
- 2007年
- 低氧可以促进人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stem cells,hMSCs)增殖。为探讨其可能机制,本实验采用cDNA芯片技术动态检测低氧促进hMSCs增殖过程中基因表达的变化,用RT-PCR验证芯片结果。结果显示,在含21 329条基因探针的芯片上,检测到282个基因差异表达,其中代谢类基因最多;差异表达基因的数目随低氧时间不同而变化,其中24 h时差异表达基因的数目最多。差异表达基因中4个为已知的低氧诱导因子-1(hypoxia- inducible factor 1,HIF-1)靶基因,在低氧处理36 h时都基本上调。此外,差异表达基因中有10个连续变化的基因,这些基因中既有上调基因也有下调基因。4个HIF-1靶基因和连续变化的基因的RT1-PCR结果大部分与cDNA芯片结果一致。结果提示,低氧促进hMSCs增殖是多基因参与的过程,可能与HIF-1及其下游信号通路有关。
- 吴恩惠李海生赵彤樊俊蝶马鑫熊雷李伍举朱玲玲范明
- 关键词：低氧人骨髓间充质干细胞CDNA芯片差异表达基因
- 参与小鼠神经发育的mCcd1基因的组织表达
- 2006年
- 介绍了一种可能在神经发育过程中起重要调节作用的基因mCcd1在小鼠发育过程中的mRNA和蛋白质水平的表达变化。通过对新生和成年小鼠多组织免疫杂交(Western Blot)和反转录PCR(RT-PCR)检测发现:该基因在多种组织中广泛表达,但脑部显示高表达,并且新生鼠各组织表达均高于成体。小鼠11.5 d胚胎切片免疫组化实验也支持这一结果。mCcd1在神经系统发育早期的表达暗示它可能参与了神经系统的发育过程。
- 马鑫景孝堂刘淑红吴燕范文红王子仁范明
- 关键词：神经发育基因表达小鼠
- Ccd1基因表达及功能研究
- 人Ccd1基因是从胎脑中分离出的一个新基因,定位于染色体11q23.1,在D11S1391和D11S1347位点之间。基因组序列大约为44.58kb,含有17个外显子,mRNA全长4803bp,含一个1419bp的完整开...
- 马鑫
- 关键词：基因表达神经发育亚细胞定位
- 文献传递
- 脑胶质瘤相关新基因表达的微阵列基因芯片分析被引量：3
- 2007年
- 目的用基因芯片技术获取人脑胶质瘤组织和人正常脑组织中差异表达的相关基因，并对部分基因在不同级别胶质瘤中的表达进行初步研究。方法用含有218个与人类神经系统发育相关基因的表达谱芯片，提取正常脑组织及胶质瘤组织总RNA制备探针并杂交芯片，用ScanArray4000扫描芯片，对其中差异表达基因进行生物信息学分析，并用实时定量PCR方法验证smad1、Hmp19和TRIP3的mRNA在不同级别胶质瘤中的表达改变。结果与正常脑组织相比，胶质瘤中明显差异表达基因10个，包括细胞周期相关基因、转录和细胞转导相关基因、增殖和分化相关基因。其中表达下调基因5个，表达上调基因5个，经实时定量PCR验证smad1、Hmp19和TRIP3的表达结果与芯片检测结果相符，且随胶质瘤恶性级别的不同而变化。结论胶质瘤发生发展中存在多类基因表达的改变，表达谱基因芯片技术能快速有效地反映肿瘤发展过程中的基因改变，为胶质瘤的侵袭性和预后判断提供依据以及为导向治疗和基因治疗提供更多的靶基因。
- 刘爽田增民郑国强吴海涛靳燕彬马鑫范文红范明
- 关键词：脑胶质瘤基因芯片
- GLI1蛋白在小鼠胚胎颌面部发育中的表达
- 2012年
- 目的通过研究GLI1蛋白在小鼠胚胎颌面发育阶段的表达,探讨GLI1蛋白在颌面部发育中的功能。方法利用免疫组化技术研究GLI1蛋白在小鼠胚胎11-14.5dpc(days postcoitum)阶段颌面部的表达情况。结果发现GLI1蛋白在颌面形成阶段11-14.5 dpc时在颌面部不同来源组织中表达不同,且主要在间质表达,在Meckel's软骨中特异性表达。结论 GLI1在颌面不同来源组织中功能不同,主要参与间质来源组织功能调控。
- 杜娟范志朋马鑫刘淑红吴燕范明王松灵
- 关键词：GLI1颌面发育间质
- 敦煌盆地侏罗纪地层沉积与构造演化
- 我国西北地区发育一系列中-新生代沉积盆地，蕴藏了丰富油气资源。是研究我国西北地区构造演化和盆-山耦合的重要载体。敦煌盆地位于青藏高原北缘，受阿尔金断裂活动控制，盆地分为安墩坳陷和阿克塞坳陷两个次级构造单元，河-湖相沉积地...
- 马鑫
- 关键词：侏罗纪地层沉积物源分析
- Sonic hedgehog在小鼠胚胎下颌突Meckel's软骨发育过程中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的:研究Sonic hedgehog(Shh)基因在小鼠胚胎颌面部Meckel's软骨发育不同阶段的表达,探讨Shh基因在下颌骨体发育骨化中的功能。方法:利用原位杂交和免疫组化技术检测Shh基因mRNA在小鼠胚胎11～14.5 dpc(days post coitum)阶段下颌突Meckel's软骨中的表达情况。结果:在颌面形成的早期阶段(11～12.5 dpc),Shh基因mRNA和蛋白在Meckel's软骨有表达且有增强趋势,但在颌面发育完成(14.5 dpc)后表达消失。结论:Shh基因可能参与下颌骨体早期发育。
- 杜娟范志朋马鑫刘淑红吴燕范明王松灵
- 关键词：HEDGEHOG下颌骨
- 整体原位杂交研究mCcd1在小鼠胚胎发育过程中的表达被引量：1
- 2005年
- 目的: 研究mCcd1新基因在小鼠胚胎发育过程中的基因表达,为其功能研究提供线索. 方法: 用地高辛标记mCcd1 RNA探针, 对E9～E11.5小鼠整体胚胎进行原位杂交,检测胚胎发育过程中基因的表达.结果: 在E9～E11.5都有不同程度的表达,E9和E10.5全身都表达,但表达量低.在E11.5的小鼠胚胎开始神经特异性表达,在中脑、眼原基、端脑、菱脑、间脑和脊髓观察到清晰的杂交信号.结论: mCcd1在胚胎发育过程中的表达有阶段性,在E9和E10.5广泛表达,而在E11.5该基因表现出神经系统特异性表达,这些提示它可能参与了神经系统的发育.
- 景孝堂吴燕刘淑红马子敏刘毅马鑫范文红范明
- 关键词：胚胎发育原位杂交基因表达
- GST-Ccd1融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：4
- 2008年
- 目的:利用大肠杆菌DH5α表达GST—Ccd1融合蛋白,并用亲和层析分离纯化,进行动物免疫制备多克隆抗体。方法:利用本室构建好的pGEX-5X-1-Ccd1-N原核表达重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达。经谷胱甘肽Sepharose 4B介质填充的层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫动物,得到Ccd1的兔源多克隆抗体。结果:ELISA结果显示血清抗体效价可以达到1∶40 000。免疫组化分析表明自制的抗体能特异性与Ccd1蛋白相互作用,可以用于实验分析。结论:制备了效价高特异性良好的抗Ccd1多克隆抗体,经实验验证获得的抗体能够满足针对Ccd1的免疫印迹和免疫组化检测的实验要求,为今后深入研究Ccd1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有用的实验工具。
- 吴燕景孝堂马鑫范文红范明
- 关键词：多克隆抗体ELISA
