- 五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外培养模型的建立和TLR2介导炎症相关因子的表达被引量：3
- 2012年
- 【目的】探讨五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外分离培养和鉴定的方法,研究LPS对内皮细胞TLR2表达的影响及TLR2介导内皮细胞炎症因子的表达情况。【方法】以3—4月龄的五指山小型猪近交系为试验材料,取其胸腹主动脉,采用0.1%I型胶原酶消化分离主动脉内皮细胞。利用细胞吸收DiI-Ac-LDL试验和流式细胞仪检测CD31的特异表达两种方法进行内皮细胞的鉴定。1μg.mL-1LPS刺激内皮细胞0、6、8和12 h,实时荧光定量PCR检测TLR2和TLR4的表达量;1μg.mL-1LPS刺激内皮细胞12 h后,10μg.mL-1LTA孵育0、6和12 h,实时荧光定量PCR检测炎症因子IL-6、IL-8和黏附分子ICAM-1的表达量。【结果】分离得到的主动脉内皮细胞呈铺路石样整齐排列,且生长状态良好;细胞膜上表达CD31分子和Ac-LDL的受体,证实分离得到的细胞是血管内皮细胞。LPS刺激后细胞TLR2 mRNA水平的表达量明显升高(P<0.05),而TLR4 mRNA水平表达量无明显变化。添加LTA孵育后,细胞炎症因子IL-6、IL-8和黏附分子ICAM-1的mRNA水平表达量较对照明显升高(P<0.05)。【结论】成功建立了五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外培养模型,并检测到TLR2在LPS刺激内皮细胞后表达量升高,能够介导细胞炎症相关因子的表达。
- 王攀陶晓莉沈祖楠李和刚潘杰牟玉莲李奎
- 关键词：主动脉内皮细胞
- 丙烯酰胺对猪骨髓间充质干细胞NFκB通路的影响
- 骨髓间充质干细胞(BMMSCs)具有免疫调节功能,参与多种免疫反应,在体内具有优先迁移到受损组织器官发挥其修复功能的能力。现阶段的BMMSCs体外分离方法是建立在Friedenstein分离方法的基础上形成的。目前,由于...
- 陶晓莉
- 关键词：骨髓间充质干细胞丙烯酰胺五指山小型猪细胞凋亡免疫反应
- 饲粮蛋氨酸水平对7~8周龄肉鸡生产性能和组织NPY表达的影响
- 索评价饲粮蛋氨酸营养的分子生物学评价方法,将27羽6周龄爱拔益加AA+肉鸡公鸡随机分成3组,每组9羽.饲粮蛋氨酸水平分别为低(0.30％)、适宜(0.41％)和高水平(0.51％).测定每组平均日采食量(ADFI)和平均...
- 任韧苏玉虹朱弘焱陶晓莉田玉民
- 关键词：肉鸡饲料配方蛋氨酸水平
- 猪核转录因子C/EBPβ真核表达载体的构建及表达
- 2013年
- 通过构建猪核转录因子C/EBPβ编码区真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,将猪C/EBPβ异位表达于小鼠成肌细胞C2C12细胞中,为进一步研究C/EBPβ在猪脂肪发育中的调控机制奠定基础。本试验利用RT-PCR扩增C/EBPβ编码区序列并测序,提交GenBank;并将其克隆至真核表达载体pEGFP-N1,通过双酶切和测序鉴定重组质粒。将重组表达体pEGFP-N1-C/EBPβ导入C2C12细胞,荧光显微镜下观察C/EBPβ在细胞中的定位,半定量RT-PCR和Western blot检测C/EBPβ在细胞中的表达情况。本试验成功克隆测序了猪C/EBPβ基因编码区序列,并首次上传到GenBank;成功构建猪C/EBPβ真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,并将其异位表达。结果表明:猪C/EBPβ在脂肪组织中表达量丰富,心肌和背最长肌表达微量,并且正确插入真核表达载体pEGFP-N1,荧光显微镜下观察重组体组主要集中在细胞核;而C/EBPβ基因和蛋白在转染重组体C2C12细胞中均有表达。本研究为提高猪肉肌内脂肪含量方面的研究提供新的思路。
- 陶晓莉吕利英朱弘焱苏玉虹
- 关键词：C2C12
- 饲粮蛋氨酸水平对7～8周龄肉鸡生长性能和组织NPY表达的影响被引量：3
- 2015年
- 为探索评价饲粮蛋氨酸营养的分子生物学方法,将27只6周龄AA+公鸡随机分成3组,每组9只,饲粮蛋氨酸水平分别为低(0.30%)、适宜(0.41%)和高水平(0.51%)。测定每组平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)指标,并用Western blot方法检测各组肉鸡下丘脑和肌肉的神经肽Y(NPY)表达水平。结果表明:与适宜蛋氨酸饲粮组相比,低或高蛋氨酸饲粮组的ADG和ADFI均有降低趋势,且低蛋氨酸组ADG显著降低(P<0.05);高和低蛋氨酸饲粮组下丘脑、十二指肠、空肠、腿肌NPY表达水平均低于适宜蛋氨酸组(P<0.05);下丘脑与其他组织的NPY表达具有协调性,ADG与腿肌NPY表达显著正相关。结果初步表明肉鸡腿肌中NPY与平均日增重之间存在一定的关系,并推测高或低饲粮蛋氨酸水平对肉鸡生长均不利,其可能影响NPY的表达,进而影响采食。
- 任韧苏玉虹朱弘焱陶晓莉田玉民
- 关键词：肉鸡蛋氨酸平均日增重
- 连城白鸭外周血淋巴细胞染色体核型研究
- 2014年
- 本试验通过对连城白鸭外周血淋巴细胞培养、秋水仙素处理后制备染色体标本,并进行染色体核型分析。结果表明,连城白鸭体细胞数目为2n=78±,1号常染色体为亚中央着丝粒染色体;2号常染色体为中央着丝粒染色体;3～9号常染色体及W性染色体为端着丝粒染色体;Z性染色体为亚端着丝粒染色体。本文通过对外周血淋巴细胞染色体核型分析,为进一步研究连城白鸭品种选育奠定基础。
- 陶晓莉朱弘焱苏玉虹
- 关键词：淋巴细胞培养核型分析染色体
