刘笙腩
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- miRNA-34c实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2013年
- 为建立稳定有效检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,采用茎环结构法设计了反转录引物,并通过梯度浓度及梯度温度PCR法对miR-34c的最佳退火延伸温度和模板浓度进行了确定,最后通过实时荧光定量PCR对miR-34c进行检测。试验成功建立了精确检测miR-34c的实时荧光定量技术体系,其中miR-34c最佳退火延伸温度为62.4℃及每个实时定量反应体系中cDNA对应的RNA量最适浓度为50ng/μL,并得到重复性高、特异性强的检测结果。该技术体系的建立不仅为检测miR-34c提供了精准便捷的方法,而且可为设计检测其他miRNA提供技术支持。
- 刘笙腩颜润川李玲玲张雅妹陈树林赵善廷
- 关键词：实时荧光定量PCR退火温度
- miR-34c在小鼠大脑中枢神经系统中的时空表达模式
- microRNA（miRNA）是一类小的内源性单链非编码RNA，长度约21~24个碱基，是由一个具有发夹结构的pre-miRNA（长度约70~80nt）剪切而成。成熟的miRNA以转录后调控者的身份存在于细胞质中，与靶基...
- 刘笙腩
- 关键词：荧光实时定量荧光原位杂交技术中枢神经系统发育
- 文献传递
- microRNA-34c在不同发育时期雄性小鼠脑组织中的表达分析
- 2014年
- 【目的】研究microRNA-34c(简称miR-34c)在出生后不同发育时期小鼠嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的表达情况,并分析其与小鼠行为活动之间的相关性。【方法】以出生后0,3,7,14,21,28,60和90d的雄性昆明小白鼠为试验动物,以5SrRNA为内参基因,运用荧光实时定量PCR技术,检测miR-34c在小鼠出生后8个不同发育时期嗅球、大脑皮质、小脑皮质和海马中的相对表达量以及在成年鼠脑组织中4个不同部位的相对表达量。【结果】随着小鼠的发育,miR-34c在嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的相对表达量均呈现不同程度的递增趋势。在成年鼠中,miR-34c在嗅球、大脑皮质、小脑皮质、海马中的相对表达量差异显著,其中海马中最高,小脑皮质次之,嗅球最低。【结论】miR-34c在出生后不同发育时期小鼠嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的表达趋势,与小鼠各种行为活动的出现具有一定的相关性。
- 刘笙腩于萌颜润川张伟段明慧胡新德华进联陈树林赵善廷
- 关键词：小鼠脑组织实时定量PCR
- 小鼠海马发育过程中丝切蛋白及其磷酸化调节基因表达差异分析被引量：1
- 2013年
- 论文旨在研究小鼠海马发育不同时期丝切蛋白及其磷酸化状态调节基因的表达量变化模式,为进一步研究丝切蛋白在海马发育过程中的功能以及其活性调节奠定基础。用半定量PCR检测不同时期丝切蛋白及其磷酸化调节基因相对表达量,通过ImageJ对结果进行分析,得出丝切蛋白及其磷酸化调节基因在小鼠海马发育不同时期表达量的变化趋势。结果表明,在小鼠海马发育不同时期丝切蛋白一直处于高表达状态,随着海马发育成熟丝切蛋白的表达量呈缓慢下降趋势。在这个过程中丝切蛋白磷酸化基因表达量呈明显下降趋势,P0时期LIMK1的表达量是P14时期的5.05倍(n=3)。与此相反,随着海马的发育中丝切蛋白去磷酸化基因表达量呈明显上升趋势,在P60时期CIN的表达量约是P0时期CIN表达量的2.88倍(n=3),P14时期SSH3的表达量约是P0时期的26.5倍(n=3)。其中LIMK2、TESK1、TESK2、SSH1和SSH2在这个过程中的表达量变化不明显。以上结果表明在小鼠海马发育过程中机体主要是通过调节丝切蛋白活性以满足不同发育时期对其活性的需求,其中LIMK1、CIN和SSH3是主要的丝切蛋白活性调节因子。
- 胡新德张伟刘笙腩李玲玲宋玲珍柴学军陈树林赵善廷
- 关键词：海马发育丝切蛋白磷酸化
