李伟
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：西南大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程农业科学生物学更多>>
- 养殖鲈鲤肠道优势菌群组成及来源分析被引量：11
- 2011年
- 采用免培养16S rDNA的PCR-DGGE技术,对单一饲料养殖鲈鲤(Percoypris pingi pingi(Tchang))幼鱼(体重为13.61±1.86 g)肠道菌群(包括肠道壁、肠道内容物)、养殖水体、饲料等菌群结构进行了比较分析。结果显示:人工养殖的鲈鲤幼鱼肠道内容物菌群与肠道壁的菌群存在一定的相似性,肠道内容物菌群比肠道壁菌群丰富。中后肠肠道内容物菌群种类高于前肠,前中后肠道壁菌群无明显差别。鲈鲤幼鱼肠道菌群的来源主要是饲料,肠道内容物与饲料菌群相似性最高可达51.6%,肠道壁与饲料菌群相似性最高可达43.0%,因此在饲料中添加微生态制剂,来提高鲈鲤营养、抗病能力等是可行的。
- 鲁增辉李伟石萍王志坚
- 关键词：肠道菌群DGGERDNA聚类分析
- SPF级KM小鼠与BALB/c小鼠肠道总菌多样性的比较
- 2010年
- 目的分析SPF级封闭群KM小鼠及近交系BALB/c小鼠的肠道菌群总菌多样性,比较两个不同遗传背景肠道总菌的丰富度、Shannon-Wiener指数和均匀度。方法收集SPF级KM小鼠和BALB/c小鼠新鲜粪便,提取粪便总菌DNA,用基于细菌16S rDNA序列的变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析粪便总菌多样性。结果 SPF级KM小鼠及BALB/c小鼠粪便总菌多样性差异无统计学意义(P>0.05),品系内不同性别之间粪便总菌多样性差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论选择SPF级小鼠进行微生态学相关研究时,封闭群KM小鼠及近交系BALB/c小鼠均可作为选择对象,同时可忽略菌群的性别差异。
- 李伟唐欢周晓杨魏泓
- 关键词：KM小鼠BALB/C小鼠
- 残留剂量头孢曲松长期作用对SPF级Balb/c小鼠肠道菌群的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究残留剂量头孢曲松的长期作用对SPF级Balb/c小鼠肠道菌群的影响。方法通过随机饮水方式,连续45 d分别给予SPF小鼠3个浓度的低剂量头孢曲松,模拟残留剂量抗生素的持续作用,活菌计数研究菌群数量变化。结果 300μg/ml及30μg/ml头孢曲松水溶液持续作用,小鼠肠道菌群厌氧总菌、乳杆菌和肠杆菌数量均出现先降后升的趋势,而肠杆菌数量异常增殖,双歧杆菌数量显著减少(P<0.01)且无法恢复,肠球菌无显著变化(P>0.05);3μg/ml头孢曲松处理后小鼠肠道肠杆菌数量显著升高,其余检测细菌数量无显著影响(P>0.05)。结论 300、30及3μg/ml头孢曲松水溶液持续处理45 d均会导致小鼠肠道菌群失调,菌群失调程度与头孢曲松浓度密切相关。
- 唐欢李伟周晓杨袁静曾本华魏泓
- 关键词：头孢曲松肠道菌群食品安全
- 重组人死亡受体6胞外结构域的制备及与淀粉样前体蛋白N端片段相互作用鉴定
- 2016年
- 人淀粉样前体蛋白氨基端切割片段(a cleaved amino-terminal fragment of amyloid precursor protein,N-APP)结合死亡受体6(Death receptor-6,DR6),会触发神经元和轴突依赖天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的自我毁灭过程,从而导致阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发生。为了在分子水平上研究N-APP-DR6诱导神经元退化途径,制备大量纯化的重组DR6胞外结构域以及鉴定NAPP和DR6胞外结构域的结合位点是关键。从甲醇毕赤酵母中成功表达并纯化了重组DR6胞外域(aa42-349),得率高达90 mg/L。为了验证DR6和NAPP的相互作用关系,构建谷胱甘肽转移酶-死亡受体6(GST-DR6)(aa42-349)融合蛋白原核表达质粒,转化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21,表达融合蛋白GST-DR6(aa42-349),同时纯化得到DR6的配体NAPP,GST pull-down结果显示DR6与NAPP能够在细胞外发生相互作用。
- 牛纯青高香罗金华李伟刘秋萍陈韵刘堰
- 关键词：淀粉样前体蛋白GSTPULL
- 稀有鮈鲫HMGR基因全长克隆及雄鱼经五氯酚暴露基因表达的分析
- 2014年
- 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)是甲羟戊酸(mevalonic acid,MVA)途径中的第一个关键限速酶.克隆稀有鮈鲫HMGR基因全长,分析该基因在不同组织及雄鱼经不同浓度五氯酚(pentachlorophenol,PCP)暴露的表达差异,探索PCP对类固醇激素前体(胆固醇)合成水平基因转录调控的内分泌干扰机制.采用同源克隆策略及cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE),从稀有鮈鲫肝脏中首次克隆得到3 101碱基(bp)的HMGR基因cDNA全长,基因命名为GrHMGR(GenBank accession No:KF885724).GrHMGR编码884个氨基酸,系统发育树分析表明,GrHMGR编码的蛋白与其他鱼类来源的HMGR氨基酸序列同源性较高.Real-time PCR分析表明GrHMGR的表达有组织特异性,在大脑,性腺和肝脏中均有表达,性腺中表达量最高.稀有鮈鲫雄鱼经不同浓度PCP暴露后,GrHMGR在大脑和性腺的表达随PCP浓度的增加显著下降,然而在肝脏组织中表达趋势有所不同.HMGR的表达下降会减少胆固醇的合成.说明PCP暴露会通过干扰稀有鮈鲫的胆固醇合成途径,进而对内分泌系统产生影响.
- 邓川毛思予熊力张晓峥李伟高香刘秋萍陈韵刘堰
- 关键词：基因克隆HMGR五氯酚
- 巴马小型猪肝硬化前后肠道乳杆菌的比较研究
- 2010年
- 目的比较巴马小型猪诱导型肝硬化造模前(正常猪)和造模成功后(肝硬化猪)肠道乳杆菌的变化情况,探讨小型猪肝硬化模型在肝硬化肠道微生态研究中的适用性。方法收集肝硬化造模前和CCl4诱导肝硬化造模成功后巴马小型猪的新鲜粪便,提取粪便总菌DNA,用乳杆菌特异性引物进行PCR扩增,对扩增产物进行变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel-Electrophoresis,DGGE),即用PCR-DGGE分析巴马小型猪肝硬化前后肠道乳杆菌的相似性和多样性。结果聚类分析和主成分分析显示巴马小型猪肝硬化前(正常猪)和肝硬化后混杂排列,无明显界限;多样性数据分析显示巴马小型猪肝硬化前后肠道乳杆菌的丰富度(S)、微生物区系Shannon-Wiener指数(H′)和均匀度(E)差异均无统计学意义(P>0.05)。结论巴马小型猪肝硬化后肠道乳杆菌与正常猪比较差异无统计学意义。
- 周晓杨唐欢李伟魏泓
- 关键词：巴马小型猪肝硬化乳杆菌PCR-DGGE
- 五氯酚对稀有鮈鲫卵黄蛋白原及p53的诱导效应被引量：3
- 2012年
- 采用中国特有鱼种稀有鮈鲫为实验动物,研究五氯酚(PCP)对其肝脏卵黄蛋白原(VTG)、VTG基因及抑癌基因p53的诱导效应,评价PCP的内分泌干扰作用,并从蛋白和基因表达水平上筛选PCP检测的敏感生物标志物.1.5、15、40、80、120、150、160μg.L-1PCP暴露稀有鮈鲫,同时设置空白、溶剂对照和17α-雌二醇(EE2)阳性对照,运用SDS-PAGE,ELISA法检测经PCP暴露后稀有鮈鲫肝脏VTG蛋白的表达差异;克隆稀有鮈鲫新的VTG和p53基因序列片段,运用实时荧光定量PCR方法检测PCP暴露对基因表达的影响.结果表明,40、80、120、160μg.L-1PCP均能诱导雌雄稀有鮈鲫肝脏VTG蛋白的表达,具有显著的浓度-效应关系;1.5、15、150μg.L-1PCP暴露后,雄性稀有鮈鲫肝脏VTG和p53基因表达均明显升高,具有显著的浓度-效应和时间-效应关系.证明PCP具有雌激素效应,稀有鮈鲫肝脏的VTG蛋白、VTG及p53基因可作为PCP检测的敏感分子生物标志物.
- 熊力马永鹏张晓峥金帮明李伟苏永良毛思予刘堰
- 关键词：五氯酚P53分子生物标志物
