陈知龙
- 作品数：14 被引量：15H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 一种口服酵母携带DNA片段作为新型水产口服DNA疫苗的制备方法及应用
- 本发明一种由口服酵母携带DNA片段活体靶向水产动物肠道免疫细胞，诱导水产动物产生免疫反应的制备方法。该疫苗生产成本低，使用方法简单，适合大规模生产，而且与传统减毒疫苗相比对动物无毒力威胁。可用在鱼类贝类等水产动物的多种细...
- 张智英闫娜娜刘玉万张小晗李欣憶韩宝泉陈知龙
- 猪KLF家族基因克隆及分子特性研究
- KLF(Kruppel-like factor)家族因子是一类羧基端具有高度保守的三个连续Cys2-His2锌指DNA结合结构域的转录调控因子。KLF因子通过特异结合靶基因启动子区GC富含序列包括GC-box或GT-bo...
- 陈知龙
- 关键词：基因克隆染色体定位进化分析转录调控
- 文献传递
- 猪KLF基因家族的克隆，染色体定位及分子特性分析
- KLF(Kruppel-like factors)家族因子是哺乳动物中广泛存在的一类基础转录元件结合蛋白,它们通过羧基端三个连续的 C2H2锌指构成的保守结构域结合靶基因启动子区 CACCC 元件和 GC-rich 的 ...
- 陈知龙甘莉雷霆陈小冬杨在清
- 文献传递
- 《动物基因工程》优质课程建设的探索和实践
- 2013年
- 优质课程建设是高等学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分,对促进教师队伍、教学内容、教学方法、教学管理、教材建设等起到了积极的推动作用。本文论述了《动物基因工程》课程建设的意义,对优质课程建设作了一些有益的探索和实践,从中得出一些体会,为从根本上提高《动物基因工程》的教学质量,提升授课效果奠定了基础。
- 王昕陈知龙张智英
- 关键词：优质课程
- 人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因腺病毒载体的构建及包装被引量：3
- 2012年
- 【目的】构建能够表达人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的腺病毒。【方法】通过对PCI-neo-hTERT质粒的改造,依次构建出JMB293-hTERT、pAdTrack-hTERT载体,将pAdTrack-hTERT经PmeⅠ线性化后与pAdEasy-1载体共转化到BJ5183细菌中进行重组,经卡那霉素抗性筛选获得重组腺病毒载体pAdEasy-hTERT。将pAdEasy-hTERT PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK293人胚肾细胞,培养7d后,收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液;反复扩增3次后,测定重组hTERT腺病毒的滴度。【结果】①利用酶切连接的方法得到了穿梭载体pAdTrack-hTERT;②通过同源重组将外源目的基因hTERT整合到腺病毒骨架载体中,得到重组质粒pAdEasy-hTERT;③成功获得了滴度为6.73×1010 GFU/mL的高滴度腺病毒颗粒。【结论】含有hTERT基因的重组腺病毒颗粒包装成功,为后续哺乳动物原代细胞永生化研究奠定了基础。
- 任充华张婷婷杨涵江王昕陈知龙张智英
- 关键词：重组腺病毒细胞永生化
- 分歧多于保守:人、小鼠、大鼠和猪中klf家族进化分析被引量：1
- 2012年
- 为研究人、猪、大鼠、小鼠中klf家族的进化特征,笔者用Clustal X和MEGA,在线软件GSGD,K es-timator和PAML,在线软件MEME\MAST和InterProScan,PSORT II分别构建进化亲缘关系树、分析基因结构、鉴定选择压力、注释蛋白质模体和确定核定位信号。结果显示:进化亲缘树及基因结构分析都将KLF家族分为α,β,γ,δ和ε5个亚类,亚类内各基因结构相似,家族各成员基因随机分布于不同染色体,klf1和klf2紧密簇集,猪klf17定位于6号染色体而非15号染色体,猪的两对旁系同源基因:klf9和klf9a,klf10和klf10a,及相似家族成员klf1和klf2,分别起源于近期和远期的基因串联复制事件;适应性进化选择压力分析表明,klf13和klf17经历了正选择,其他基因都受到严格的负选择作用;KLF蛋白羧基端都有3个高度保守的串联锌指结构,核定位信号(NLS)位于3串联锌指内或其紧邻上游,氨基端模体则相对多样化,KLF3,KLF4,KLF8和KLF12以其共有的PVDLS/T模体(单字母氨基酸缩写)结合转录辅因子CtBP(C-terminus-binding protein)进而调控靶基因转录,KLF9,KLF10,KLF11,KLF13,KLF14和KLF16共享转录辅因子Sin3结合结构域SID(Sin3-interacting domain),KLF7中发现的亮氨酸拉链模体表明其以二聚体的形式参与转录调控。klf家族基因结构和氨基端模体的多样化、羧基端保守锌指结构及进化中经历的负选择压力表明家族进化中经历了转录调控方式和调控功能的多样化,同时保留了结合富含GC启动子的基本模式。
- 杨红文陈知龙
- 关键词：进化特征亲缘关系基因结构
- 一种新型提高HDR效率的 CRISPR/Cas9-Gal4BD 供体适配基因编辑系统被引量：2
- 2022年
- 近年来,CRISPR基因编辑及衍生技术迅速发展,在生命科学、生物医学研究以及动植物育种领域得到了广泛应用。基于DNA双链断裂(double-stranded break,DSB)同源指导修复(homology-directed repair,HDR)机制的基因敲入和点编辑是基因编辑的重要策略,但效率偏低亟待提高。本文提出了驱动供体DNA富集至DSB处以提高HDR效率的新策略,并设计了一套CRISPR/Cas9-Gal4BD供体适配基因编辑系统(donor adapting system,DAS)。该系统主要利用Gal4 DNA结合域(Gal4 binding domain,Gal4BD)作为配体蛋白与Cas9融合表达,将Gal4BD结合序列(Gal4 binding sequence,Gal4BS)作为受体序列与双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)供体结合,以期提高HDR效率。使用HEK293T-HDR.GFP报告细胞系的初步研究结果表明当dsDNA供体同源臂在一定长度(100~60 bp)时该系统能够提高HDR效率2~4倍。进一步的优化研究表明,融合端口和融合使用连接子(linker)的选择会影响Cas9表达效果及活性,而GGS5作为Cas9-Gal4BD融合的连接子则影响较小。同时,本研究还发现Gal4BS-dsDNA供体的差异化设计也会影响HDR效率,将Gal4BS添加到dsDNA供体5′-端的效果最佳。综上所述,本研究利用CRISPR/Cas9-Gal4BD DAS在AAVS1和EMX1位点上实现了HDR编辑效率的提高,为进一步利用该系统进行动物分子设计育种研究提供了参考和借鉴。
- 张潇筠徐坤沈俊岑穆璐钱泓润崔婕妤马宝霞陈知龙张智英魏泽辉
- 水产动物病害学理论与实践教学的创新改革研究被引量：1
- 2013年
- 为了培养学生的创新精神和实践能力,针对水产动物病害学理论与实践教学中存在的一些缺点和不足,探讨了水产动物病害学理论与实践教学创新改革的措施,包括教学内容与结构的优化,利用教学基地开辟第二课堂以及理论与实践教学方法等方面。最后,提出了进一步改革水产动物病害学教学的方向。
- 凌飞王高学陈知龙
- 关键词：理论教学实践教学
- 畜牧专业细胞生物学教学改革的探索与实践被引量：3
- 2015年
- 细胞生物学是支撑现代畜牧学科发展的基础课程之一,但是目前农林院校畜牧专业的细胞生物学教学仍停留在简单模仿综合院校"三生"专业或医学专业的层面上,很难满足培养优秀畜牧人才的需要。为探索适合畜牧专业的细胞生物学教学方法,该文针对教学内容、教学方法和考核方式等方面的改革进行了一些探索和尝试。
- 李晓陈知龙潘传英曾文先
- 关键词：畜牧专业细胞生物学教学改革
- 阿维链霉菌aveC基因缺失对产素调控的影响被引量：3
- 2007年
- 通过构建仅含有aveC基因两端交换臂的缺失载体,与阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)染色体中aveC基因发生同源重组,以阻断该基因,从而获得aveC缺失突变株。并经摇瓶发酵和高效液相色谱检测不同阿维菌素组分产量。结果显示,aveC缺失突变株的阿维菌素的总产量与出发菌株的总产量差异不显著;而阿维菌素组分1的产量下降约58%,组分2的产量提高约52%。
- 彭敏杨红文陈知龙彭音杨在清
- 关键词：阿维菌素基因缺失
