赖肖芬
- 作品数：9 被引量：6H指数：2
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PinX1基因靶向调控端粒酶活性及其诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究
- 背景：鼻咽癌是我国南方诸省及东南亚发病率高,危害大的恶性肿瘤之一。遗传因素及包括EB病毒(Ebstein Barr病毒)在内的环境因素可能是鼻咽癌发病中最具危险性的因素。鼻咽癌治疗以放疗为主,辅以化疗等方法。近年来虽然放...
- 赖肖芬
- 关键词：RNA干扰端粒酶活性鼻咽癌细胞凋亡基因治疗
- 文献传递
- hTERTp/TK/pGL3靶向抑制端粒酶活性及其对鼻咽癌干细胞的杀伤作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨hTERTp/TK/pGL3载体靶向抑制端粒酶活性及其杀灭鼻咽癌CD133+干细胞的作用机制。方法:将已构建的hTERTp/TK/pGL3载体及其对照处理因素(CMV/TK/pGL3和TK/pGL3载体)转染至鼻咽癌CD133+干细胞、CD133-肿瘤细胞、人脐静脉内皮细胞(ECV)(对照组)和鼻咽癌SUNE未分选细胞中,采用Stretch PCR法检测4种细胞端粒酶活性改变。MTT法测定CD133+干细胞和ECV细胞存活率。结果:CD133+鼻咽癌干细胞体外培养7d后细胞逐渐增多,CD133+鼻咽癌干细胞体内成瘤实验阳性。CD133+鼻咽癌干细胞转染hTERTp/TK/pGL3或CMV/TK/pGL3后端粒酶活性降低;而ECV细胞端粒酶为阴性表达;CD133+鼻咽癌干细胞分别转染TK/pGL3、CMV/TK/pGL3和hTERTp/TK/pGL3后细胞存活率平均为(87.4±0.4)%、(20.5±0.4)%和(27.9±0.2)%,ECV对照细胞组转染TK/pGL3、CMV/TK/pGL3和hTERTp/TK/pGL3后细胞存活率平均为(90.7±0.1)%、(18.1±0.2)%和(86.2±0.1)%,hTERTp/TK/pGL3杀灭鼻咽癌CD133+干细胞效率明显高于ECV细胞组(P<0.01)。结论:hTERTp/TK/pGL3载体可以通过下调端粒酶活性靶向抑制端粒酶阳性的鼻咽癌CD133+干细胞。
- 杨柯柯申聪香文忠关小芳赖肖芬钱宇虹
- 关键词：肿瘤靶向治疗端粒酶
- 糠酸莫米松鼻喷雾剂(内舒拿)联合螨特异性脱敏治疗对过敏性鼻炎早期症状改善的临床研究
- 目的:比较糠酸莫米松鼻喷雾剂联合螨特异性脱敏治疗、单纯螨特异性脱敏治疗与单纯糠酸莫米松鼻喷雾剂治疗三者之间对过敏性鼻炎早期症状控制的疗效比较,为指导舌下含服脱敏治疗联合用药提供循证医学证据。
- 文忠于超生申聪香谢民强赖肖芬王军旗
- 文献传递
- 靶向增强型TK表达载体在鼻咽癌细胞中的作用研究
- 2010年
- 目的探讨hTERT启动子及CMV增强子双调控机制的增强型表达载体pGL3-bas-ic-EGFP-TK-hTERTp-CMV enhancer在鼻咽癌细胞中的靶向杀伤效应。方法构建靶向性增强型hTERT启动子及CMV增强子双调控TK表达载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp-CMV enhancer,并以单启动子载体pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp作为对照组,分别转染端粒酶阳性的人鼻咽癌细胞株5-8F、人乳腺癌细胞MCF-7(阳性对照)及正常人血管内皮细胞ECV(阴性对照)。荧光显微镜下观察其TK基因绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量PCR方法检测转染细胞中TK基因mRNA定量表达差异,Stretch PCR法检测肿瘤细胞端粒酶活性,MTT法分析杀灭鼻咽癌细胞的效果等作为检验指标。结果①该增强型表达载体转染5-8F细胞及MCF-7细胞后的绿色荧光表达及TK基因的mRNA表达均强于单启动子pGL3-basic-EGFP-TK-hTRETp组;而ECV细胞只有极微弱的绿色荧光和极弱的TK基因的mRNA表达。实时荧光定量PCR显示,增强型载体组A值较对照组单启动子组明显增高,是单启动子组的2～5倍。StretchPCR法检测转染前后5-8F细胞端粒酶活性明显被抑制。②加入GCV后增强载体组对鼻咽癌5-8F细胞及乳腺癌MCF-7细胞体外增殖均有明显抑制作用,均高于单启动子载体组、不加GCV的增强型载体组、空载体组及空白对照组。结论以hTERT启动子及CMV增强子双调控机制介导TK基因的新型靶向增强型表达载体能够高效靶向性杀灭鼻咽癌细胞,这种新型高效靶向增强型载体有可能成为一种针对包括鼻咽癌在内的具有较为广泛抗癌谱的恶性肿瘤临床靶向基因治疗的新策略。
- 钱宇虹文忠赖肖芬于超生关小芳
- 关键词：鼻咽癌端粒酶
- 增强型表达载体调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌的体内外实验研究
- 目的探讨经改良构建的增强型表达载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌细胞及裸鼠移植瘤的效应。方法将改良构建后的增强型载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3及单启动子载体h...
- 文忠申聪香牟少凤关小芳赖肖芬于超生
- 鼻内镜术后囊泡形态学变化及其对鼻腔预后转归影响的临床观察研究
- 目的探讨慢性鼻窦炎(伴或不伴鼻息肉)鼻内镜术后术腔囊泡形成过程、形态学变化规律对鼻腔术后黏膜愈合转归过程的影响,为缩短术后恢复时间提供理论依据。方法1对象按照慢性鼻窦炎、鼻息肉诊断和治愈标准(2007 EPOS),纳入慢...
- 文忠王军旗申聪香于超生赖肖芬王海丽钟品能杨柯柯
- 文献传递
- 83例单螨及双螨过敏性鼻炎舌下特异性免疫治疗临床疗效分析
- 目的观察比较舌下特异性免疫治疗对单螨及双螨过敏的过敏性鼻炎的疗效分析。方法选择2009-2010年在我院门诊就诊的83例对尘螨过敏的过敏性鼻炎患者,诊断标准、评分及疗效参考2004年兰州标准,对符合入组标准的患者进行各症...
- 文忠于超生申聪香赖肖芬王军旗杨柯柯
- 文献传递
- PinX1基因靶向抑制端粒酶活性诱导鼻咽癌细胞凋
- 目的探讨PinX1基因靶向抑制端粒酶活性诱导鼻咽癌细胞凋亡作用和意义。方法1、构建包含全长人PinX1基因序列的克隆载体pEGFP-C3-PinX1。2、半定量RT-PCR法检测鼻咽癌细胞转染前后PinX1 mRNA的表...
- 文忠赖肖芬申聪香于超生
- 端粒酶抑制因子PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及作用效应分析被引量：4
- 2011年
- 目的探讨PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及其作用效应分析。方法构建包含全长人PinX1基因序列的质粒载体pEGFP-C3-PinX1及PinX1的小干扰RNA,PinX1-FAM-siRNA。脂质体法转染人鼻咽癌5-8 F细胞,采用RT-PCR检测PinX1基因和端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA的表达;分别采用Stretch PCR、MTT及流式细胞仪检测肿瘤细胞端粒酶活性、增殖能力及凋亡改变。结果成功构建PinX 1基因质粒载体及合成其小干扰RNA。转染鼻咽癌5-8 F细胞后,PinX1 mRNA的表达水平显著提高,hTERT mRNA的表达水平下降了2 9.9%,端粒酶活性显著降低,肿瘤细胞增殖能力受到抑制,诱导鼻咽癌细胞凋亡率从未转染的19.27%±0.76%增加至转染后的49.73%±2.70%(P<0.05);转染PinX1基因的小干扰RNA(PinX1-FAM-siRNA),结果显示PinX1 mRNA的表达水平下降70%,而鼻咽癌5-8 F细胞的增殖能力、端粒酶活性和hTERT的表达以及细胞凋亡率未受到显著影响。结论外源PinX1基因可在鼻咽癌细胞中高表达,显著抑制该肿瘤细胞中端粒酶活性及其hTERT mRNA表达,抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡增加。沉默鼻咽癌细胞中PinX1基因后,PinX1基因的抑制性功能相应地受抑制。施加正反调节因素后的结果表明PinX1基因是一个潜在的端粒酶活性抑制剂,可能通过靶向抑制端粒酶途径来影响肿瘤的发生发展,本研究将为鼻咽癌的靶向基因治疗开辟新领域。
- 赖肖芬申聪香文忠钱宇虹
- 关键词：鼻咽癌小干扰RNA端粒酶凋亡
