王丹
- 作品数：9 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南通大学航海医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 铁调节蛋白1真核表达质粒的构建及功能初步研究
- 2012年
- 目的:构建人来源铁调节蛋白1(IRP1)真核表达质粒,检测该质粒在人肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对转铁蛋白受体1(TfR1)和二价金属转运体1(DMT1)表达的影响。方法:从HepG2细胞中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应获得IRP1的cDNA。根据不同的酶切位点分别构建IRP1 4个分段目的基因,依次连接4段基因并将其构建入真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证碱基序列。用FuGENEHD将质粒pcDNA3.1(+)-IRP1瞬时转染至HepG2。以QRT-PCR方法检测转染pcDNA3.1(+)-IRP1质粒,观察对IRP1以及其调控基因TfR1和DMT1表达的影响。结果:扩增出IRP1全长cDNA,构建真核表达质粒,4个质粒经相应酶双酶切后,分子量分别为1261bp、502bp、600bp、310bp。经检测质粒转染至HepG2细胞后,IRP1表达显著高于转染空载质粒细胞。结果显示与对照组相比,转染真核pcDNA3.1(+)-IRP1质粒后IRP1表达显著上调约50倍,TfR1表达增加约3倍,DMT1表达增加约1.5倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建人IRP1基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IRP1,并证明其能在HepG2细胞内高表达,从而影响IRP1调控基因的表达。
- 成春明王丹朱俐
- 关键词：真核表达质粒构建逆转录聚合酶链反应原发性肝细胞癌
- 低氧条件下铁调节蛋白1在维持SH-SY5Y细胞铁稳态中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的：研究低氧条件下铁调节蛋白1（iron regulatory protein 1,IRP1）对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞铁稳态的影响。方法：1%O2处理SH-SY5Y细胞0,1,2,4,6 h,蛋白质印迹法检测铁蛋白轻链（ferritin light chain,Ft-L）以及膜铁输出蛋白（ferroportin,Fpn）的表达;Calcein-AM法检测SH-SY5Y细胞对Fe2＋的吸收以及细胞可变铁池（labile iron pool,LIP）;采用硫氰酸盐分光光度法测定细胞总含铁量;特异性siRNA下调IRP1后检测SH-SY5Y细胞低氧2 h铁稳态的变化。结果：低氧0~6 h,SH-SY5Y细胞Ft-L和Fpn表达增加,Fe2＋摄入和LIP增加,但细胞总铁水平不变。siRNA下调IRP1表达后再低氧2 h,Ft-L蛋白表达和LIP明显增加,Fpn表达和Fe2＋摄入没有明显变化,细胞总铁水平增加。结论：低氧条件下,IRP1是SH-SY5Y细胞铁稳态的重要调节者。
- 郁敏燕王丹朱俐
- 关键词：低氧SH-SY5Y细胞
- 藁本内酯对帕金森病多巴胺能神经元的保护作用及其机制研究
- 目的:帕金森氏病(Parkinson’s disease,PD)是常见的中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征是患者大脑黑质致密部多巴胺能神经元进行性丢失,纹状体内多巴胺递质含量显著减少,临床表现为肌强直、肢体震颤和运动减...
- 陈蕾吴小梅王丹朱俐
- 人低氧诱导因子1α真核表达质粒的构建和鉴定
- 2009年
- 目的:构建人低氧诱导因子1α(HIF-1α)真核表达质粒及其在人肝癌细胞(HepG2)中的表达。方法:从HepG2细胞中提取总RNA,通过RT-PCR逆转录,获得HIF-1α的cDNA,双酶切后构建真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证碱基序列。用脂质体法将质粒pcDNA3.1(+)-HIF-1α转染至HepG2,以免疫荧光和Western Blot法分别对转染细胞进行HIF-1α表达分析。结果:扩增出HIF-1α全长cDNA,构建真核表达质粒,测序结果正确。经检测的质粒转染至HepG2细胞后,HIF-1α蛋白水平高于转染空载细胞。结论:成功构建人HIF-1α基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HIF-1α,并证明其能在HepG2细胞内表达。
- 王丹骆倩倩朱俐
- 关键词：低氧诱导因子1Α真核表达质粒构建
- USH1G过表达抑制人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化
- 目的 探讨USH1G过表达对人胃癌MGC803细胞迁移和粘附的影响。方法 转染人胃癌MGC803细胞系,构建USH1G过表达的稳定细胞系;经G418筛选,蛋白质印迹法检测USH1G蛋白水平;Wound Healing划痕...
- 杨磊王丹
- 关键词：胃癌EMT
- 虾青素对Aβ25~35诱导小鼠皮层神经元损伤的保护作用
- 本研究首次以Aβ25～35诱导小鼠皮层神经元损伤为模型研究虾青素对Aβ的神经毒性的抑制作用，并为深入研究虾青素的神经保护作用机制提供参考。
- 陆亚鹏赵育王丹陈忠平朱俐
- 关键词：虾青素实验药理阿兹海默症神经保护
- 低氧通过低氧诱导因子1调控二价金属转运体1的表达
- 目的:研究低氧对培养细胞二价金属转运体1(Divalent metal transporter 1,DMT1)转录和蛋白表达的影响,探讨低氧诱导因子1(Hypoxia inducible factor-1,HIF-1)对...
- 王丹朱俐
- 关键词：低氧诱导因子1低氧反应元件基因表达调控
- 核呼吸因子1影响人低氧诱导因子1α表达的初步研究
- 章洁王丹朱俐
- 关键词：低氧诱导因子1基因表达调控
- 藁本内酯对帕金森病多巴胺能神经元的保护作用及其机制研究
- 目的:帕金森氏病(Parkinson''''s disease,PD)是常见的中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征是患者大脑黑质致密部多巴胺能神经元进行性丢失,纹状体内多巴胺递质含量显著减少,临床表现为肌强直、肢体震颤和...
- 陈蕾吴小梅王丹朱俐
- 文献传递
