翁伟平
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院农业部家畜生殖内分泌及胚胎工程重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- Luman-N-端融合蛋白的表达、纯化及小鼠免疫效果评价
- 2008年
- Luman-N-端基因转化菌BL21在IPTG的诱导下,用SDS-PAGE检测表达情况,经电洗脱法纯化,利用纯化的蛋白免疫BALB/C小鼠,通过间接ELISA和淋巴细胞增殖转化试验评价免疫效果。结果显示:细菌经IPTG诱导后在56 kD处,出现了特异性蛋白条带,与预计融合蛋白大小一致,融合蛋白经电洗脱纯化后免疫小鼠,间接ELISA显示抗体效价达到1∶4000,淋巴细胞增殖试验表明与空白组相比,Luman-N-端融合蛋白质量浓度为10、20、40和60μg/mL时,能显著刺激淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度为80、100μg/mL能极显著地刺激淋巴细胞的增殖(P<0.01)。
- 郭挺伟靳亚平张鸯翁伟平
- 关键词：纯化免疫效果
- Zhangfei融合蛋白的纯化及其免疫效果被引量：5
- 2008年
- 【目的】纯化Zhangfei融合蛋白并检测其免疫原性,为研究其在生殖内分泌调节中的作用提供理论依据。【方法】通过大肠杆菌原核表达系统进行Zhangfei融合蛋白的表达,筛选出最佳诱导表达条件,采用SDS-PAGE凝胶检测Zhangfei融合蛋白的表达情况,比较谷胱甘肽琼脂糖凝胶和电洗脱2种纯化Zhangfei融合蛋白的方法,并测定纯化的Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠和家兔的效果。【结果】成功筛选出了表达Zhangfei融合蛋白的最佳诱导条件为IPTG终浓度3 mmol/L,诱导时间7 h;应用电洗脱方法可得到纯度较高的Zhangfei融合蛋白,其质量浓度为1.269 mg/mL,免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5×103以上,免疫兔的血清抗体效价高达1∶3×106。【结论】电洗脱纯化Zhangfei融合蛋白的方法优于谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化法,Zhangfei融合蛋白具有良好的免疫原性。
- 张鸯史薇靳亚平路保通翁伟平郭廷伟
- 关键词：融合蛋白电洗脱抗体效价
- GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及纯化被引量：4
- 2008年
- 优化GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中的表达条件,并对其表达产物进行纯化。通过改变诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件,SDS-PAGE电泳分析以确定GST-LRF融合蛋白表达的最佳条件。并通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱和电洗脱法纯化目的蛋白。结果表明:重组质粒转化菌E.coliBL21(DE3)在37℃、0.1 mmol/L IPTG诱导5 h时,GST-LRF融合蛋白表达量最高,经电洗脱法纯化得到了GST-LRF融合蛋白。已确定GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌的最佳表达条件,并纯化得到目的蛋白,为进一步制备抗LRF的单克隆抗体及LRF功能的研究奠定了基础。
- 翁伟平张鸯郭挺伟靳亚平秦新喜
- 关键词：融合蛋白纯化
- GST-LRF融合蛋白纯化及单克隆抗体的制备
- Luman募集因子(Luman-recruiting factor，LRF)是碱性亮氨酸拉链蛋白转录因子，是Luman活化过程中必需的辅助因子，募集Luman进入特定的亚核区，促进有活性的转录复合物的形成。目前，对于LR...
- 翁伟平
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞株有限稀释法募集抗体效价
- 文献传递
