董惠
- 作品数:5 被引量:39H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛支原体套式PCR检测方法的建立被引量:26
- 2009年
- 为建立牛支原体检测方法,本研究采用牛支原体的oppD/F基因的两对特异性引物,建立了牛支原体的套式PCR检测方法。该套式PCR可以从100ccu/mL(color change unit颜色变化单位)的牛支原体培养物中检出目的片段;同时还可以从病牛肺脏、病牛鼻拭子中扩增出目的片段,而且结果与病原分离结果一致。特异性试验结果表明,该方法与其它支原体无交叉反应,是一种特异性强、敏感性高的牛支原体检测方法。
- 李媛董惠张美晶陈超曹培丽郭丹姜海芳辛九庆
- 关键词:牛支原体牛传染性胸膜肺炎套式PCR
- 表达猪肺炎支原体P102蛋白的重组腺病毒及其应用
- 本发明公开了表达猪肺炎支原体P102蛋白的重组腺病毒及其应用。本发明首先将猪肺炎支原体P102蛋白的基因进行突变,将突变后的全基因(SEQ ID NO:1)克隆到穿梭载体pShuttle-CMV上,得到重组穿梭载体;经线...
- 辛九庆李媛郭丹郭军陈超曹培丽张美晶董惠姜海芳
- 文献传递
- 表达猪肺炎支原体P102蛋白的重组腺病毒及其应用
- 本发明公开了表达猪肺炎支原体P102蛋白的重组腺病毒及其应用。本发明首先将猪肺炎支原体P102蛋白的基因进行突变,将突变后的全基因(SEQ ID NO:1)克隆到穿梭载体pShuttle-CMV上,得到重组穿梭载体;经线...
- 辛九庆李媛郭丹郭军陈超曹培丽张美晶董惠姜海芳
- 文献传递
- 牛霉形体PCR检测方法的建立被引量:7
- 2009年
- 参考GenBank中牛霉形体和无乳霉形体P81基因的序列差异,设计了针对牛霉形体P81基因的PCR引物,建立了牛霉形体PCR检测方法,并对该方法进行了敏感性和特异性试验。该方法可以从100ccu/mL(ccu:color change unit,颜色变化单位)的牛霉形体培养物中检出目的片段;经对丝状霉形体丝状亚种SC型(MmmSC)PG1株、丝状霉形体丝状亚种LC型(MmmLC)Y-goat株、山羊霉形体山羊亚种(Mccp)87001株、无乳霉形体(M.agalactiae)PG2株、绵羊肺炎霉形体Y-98株等亲缘关系相近的霉形体纯培养物检测,结果证实该方法具有良好的特异性。利用建立的PCR检测方法可以从人工感染牛的鼻拭子和临床发病牛肺中扩增出目的片段,与分离培养结果完全符合,本方法为国内首次建立的敏感、特异、快速的牛霉形体PCR检测方法。
- 李媛董惠张美晶陈超曹培丽郭丹姜海芳辛九庆
- 关键词:牛传染性胸膜肺炎聚合酶链式反应
- 牛支原体双重PCR检测方法的建立被引量:9
- 2010年
- 为鉴别牛支原体(Mycoplasma bovis)与丝状支原体丝状亚种SC(M.mycoides subsp.mycoides SC),本实验通过优化M.bovis特异性引物pMB81-1/pMB81-2s和MmmSC特异性引物SC1/SC2的退火温度,建立了鉴别M.bovis和MmmSC的双重PCR检测方法。该方法能够分别由M.bovis和MmmSC扩增得到528bp和270bp片段。敏感性试验结果显示该方法检测M.bovis和MmmSC培养物的最低浓度分别为106cfu/mL和105cfu/mL。特异性试验结果显示,该方法对无乳支原体代表株PG2、丝状支原体丝状亚种LC型代表株Y-goat、山羊支原体山羊肺炎亚种Mccp、绵羊支原体Y-98、猪鼻支原体BST-7、巴氏杆菌以及结核分枝杆菌扩增结果均为阴性。应用该方法对临床病料的检测结果与培养鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于临床检测。
- 刘洋李媛董惠张美晶姜海芳陈维辛九庆
- 关键词:牛支原体双重PCR