张丽
- 作品数：11 被引量：26H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市科委地方病重大专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 日本血吸虫重组两歧双歧杆菌（pGEX-Sj32）疫苗构建及鉴定被引量：6
- 2015年
- 目的 构建和鉴定日本血吸虫重组两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum,Bb）pGEX-Sj32疫苗.方法 从重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所构建的重组大肠埃希菌BL21 （pET28α-Sj32）中抽提质粒pET28α-Sj32,通过PCR扩增Sj32抗原编码基因;将Sj32基因定向克隆至大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-Sj32,将该重组质粒转化至大肠埃希菌BL21感受态细胞（DE3）,抽提质粒后进行双酶切鉴定;采用电穿孔法,将重组质粒pGEX-Sj32转化至Bb,构建Bb（pGEX-Sj32）疫苗,再从该疫苗中抽提重组质粒pGEX-Sj32,以其为模板进行PCR鉴定.结果 从抽提质粒pET28α-Sj32中PCR扩增出长度约为1 270 bp的Sj32基因片段;重组质粒pGEX-Sj32经双酶切鉴定,获得长度为4 947 bp的载体片段和长度为1 270 bp的Sj32基因片段;以抽提的疫苗质粒pGEX-Sj32为模板进行PCR扩增,得到了长度约为1 270 bp的Sj32基因片段,与预期结果相符.结论 成功构建了日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj32）疫苗.
- 谭建蓉李文桂张丽
- 关键词：两歧双歧杆菌疫苗
- 帕罗西汀联合小剂量喹硫平治疗抑郁症有效性与安全性的Meta分析被引量：8
- 2015年
- 目的系统评价帕罗西汀联合小剂量喹硫平治疗抑郁症的有效性与安全性。方法计算机检索Pub Med、EMBASE、Cochrane Library、CNKI、CBM、VIP和万方数据库,并手工检索相关文献,检索时间从各数据库建库至2015年9月1日,纳入帕罗西汀联合小剂量喹硫平治疗抑郁症的相关文献,根据纳入排除标准筛选文献并按照改良后的Jadad评分量表评估各研究方法学质量,提取治疗有效率、痊愈率及不良反应等相关数据,采用Stata/SE12.0软件进行Meta分析。结果纳入随机对照试验(RCT)24个,共1678例,所有纳入研究总体质量均较低。Meta分析结果显示,帕罗西汀联合小剂量喹硫平对抑郁症的有效率[RR=1.13,95%CI(1.04,1.24)]及治愈率[RR=1.37,95%CI(1.16,1.60)]均优于单用帕罗西汀;在不良反应方面,二者差异无统计学意义[RR=1.22,95%CI(0.97,1.54)]。结论帕罗西汀联合小剂量喹硫平治疗抑郁症的有效性优于单用帕罗西汀,且联合用药未增加药物的不良反应。
- 陈晓鹭张丽曾金坤蒙华庆
- 关键词：喹硫平帕罗西汀抑郁症META分析
- 日本血吸虫重组质粒pGEX—Sj26GST的构建及在大肠埃希菌BL21（DE3）中的表达被引量：3
- 2013年
- 目的构建日本血吸虫（Schistosomajaponicum，sj）重组质粒pGEX—Sj26GST，并研究其在大肠埃希菌（Escherichiacoli，Ecoli）BL21（DE3）中的表达。方法使用RNeasyMini试剂盒提取研成虫总RNA，实时荧光定量PCR（real—timePCR，RT—PCR）扩增日本血吸虫26kDa的谷胱甘肽-S-转移酶（Sj26GST）编码基因，并将扩增产物定向克隆到pGEX—lhT载体上，构建重组质粒pGEX—Sj26GST；将重组质粒电穿孔转化感受态大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基硫代-B—D-半乳糖苷（IPTG）诱导其表达；通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）分析表达产物及蛋白印迹（Westernblot）试验鉴定表达的融合蛋白的抗原性。结果RT—PCR扩增出676bp大小的Sj26GST抗原编码基因；双酶切试验证实Sj26GST抗原编码基因成功克隆到pGEX—1λT载体中；SDS—PAGE分析出现相对分子质量（Mr）约52×10^5的融合蛋白，薄层扫描分析显示表达的融合蛋白约占总菌体蛋白的20％，Westernblot结果显示融合蛋白可被研感染的兔血清识别。结论成功构建重组质粒pGEX—sj26GST，其在大肠埃希菌BL21（DE3）中可获得表达，且表达的融合蛋白具有特异的抗原性。
- 张丽李文桂向进平
- 关键词：血吸虫质粒大肠埃希菌
- 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST)疫苗免疫BALB/c小鼠脾细胞动态观察被引量：2
- 2014年
- 目的观察日本血吸虫重组Bb（pGEX—Sj26GST）疫苗免疫BALB／c小鼠后脾细胞增殖、亚群和凋亡的动态变化。方法将疫苗分别经皮下注射（SC组）和鼻腔粘膜接种（IN组）免疫BALB／c鼠，在免疫后O～22周每2周每组随机剖杀4只小鼠，无菌取脾，制成单个悬浮脾细胞，用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测脾细胞增殖水平、用流式细胞仪（FACsort）检测T细胞亚群和脾细胞凋亡状况。结果未刺激及sjAWA刺激时SC组小鼠脾细胞增值水平于免疫后4～20周明显升高，ConA刺激时于4～18周显著升高，均于免疫后8周达最高水平；IN组脾细胞增殖水平原液组、SjAwA组和ConA组分别于2～18周、2～10周及14～18周、2～8周和12～18周显著升高，均于免疫后4周达最大值（P〈0．01或P〈0．05）。SC组和IN组CD＋T细胞分别于免疫后2～14周、2周及6～16周升高，并于8周达峰值（P〈0．01或P〈0．05）；两组CD＋T细胞均于2～20周轻微升高，分别于8周和6周达较高值（P〉0．05）。未刺激和ConA刺激时SC组脾细胞凋亡水平分别于免疫后2～4周、2～6周升高显著，均于免疫后2周达最大值（P〈O．01或P〈O．05）；IN组均于4周显著升高并达峰值（P〈O．01）。结论日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj26GST）疫苗可诱导脾细胞的增殖，增加cD＋T细胞的数目，抑制脾细胞的凋亡而发挥保护性免疫应答。
- 张丽李文桂谭建蓉
- 关键词：日本血吸虫脾细胞增殖脾细胞凋亡
- 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗免疫小鼠脾细胞增殖、亚群及凋亡的动态变化被引量：4
- 2013年
- 目的探讨日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗免疫BALB/c小鼠后脾细胞增殖、亚群及凋亡的动态变化。方法 96只雌性BALB/c小鼠随机均分为2组,用rBb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗分别经口服灌胃(PO)及鼻腔黏膜(IN)接种两种途径免疫小鼠,于免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周每组各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用日本血吸虫成虫抗原(SjAWA抗原)刺激培养,MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖反应,同时设原液、刀豆蛋白A(ConA)组对照;用流式细胞术(FCM)检测免疫小鼠脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比;脾细胞经ConA刺激培养,流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率,并设原液组作为对照。结果 PO组增殖水平于免疫后4周达高峰,而IN组于免疫后12周达高峰;PO组脾CD4+T细胞亚群于免疫后4周达最高水平,IN组CD4+T细胞亚群于免疫后12周达最高水平;PO组脾CD8+T细胞亚群于10周达峰值,IN组CD8+T细胞亚群于免疫后6周达最高水平;PO组小鼠脾细胞凋亡率于免疫后6周达最高,而IN组脾细胞凋亡率于12周达最高水平。结论日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗在免疫早期可引起脾细胞增殖,诱导CD4+和CD8+T细胞参与宿主的免疫保护,抑制小鼠脾细胞的凋亡。
- 向进平李文桂张丽
- 关键词：脾细胞增殖脾细胞亚群凋亡日本血吸虫
- 日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21中的表达
- 2014年
- 目的构建日本血吸虫(Sj)重组质粒pGEX-Sj32并研究其在大肠埃希菌BL21中的表达效率。方法从该实验室保存的BL21(pET28α-Sj32)重组菌中抽提质粒pET28α-Sj32,PCR扩增Sj32抗原编码基因,定向克隆入穿梭载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Sj32。将重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达;表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果 PCR成功扩增出Sj32编码基因,并成功构建了重组质粒pGEX-Sj32;SDS-PAGE显示相对分子质量约为58×103的重组蛋白,薄层扫描分析显示表达蛋白约占菌体总蛋白的21%;Western blot显示重组蛋白可被日本血吸虫感染兔血清识别。结论成功构建日本血吸虫重组质粒pGEX-Sj32,该重组质粒在大肠埃希菌BL21中得到了高效表达,且表达蛋白具有特异的抗原性。
- 谭建蓉李文桂张丽
- 关键词：日本血吸虫聚合酶链反应大肠埃希菌
- 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗免疫BALB/c鼠血清抗体及细胞因子的动态观察
- 2014年
- 目的研究日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗免疫BALB/c小鼠后血清抗体IgG及其亚类、IgE和IgA及其细胞因子IL-10、IL-12的动态变化。方法将96只BALB/c小鼠随机分为2组,每组48只,用重组Bb(pGEXSj26GST-Sj32)疫苗分别经口服灌胃和鼻腔粘膜两种途径免疫小鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周每组各剖杀4只小鼠,分离血清,ELISA法测定血清抗体及细胞因子。结果口服免疫组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA水平分别在免疫后6、8、8、4、6、12和6周达峰值;血清IL-10、IL-12水平分别在免疫后12、6周达峰值。鼻腔粘膜组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA水平分别在免疫后4、2、6、2、4、8和8周达峰值;血清IL-10、IL-12水平分均于免疫后6周达峰值。结论日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗在免疫早期可诱导小鼠产生Th1和Th2型混合保护性免疫应答。
- 向进平李文桂张丽
- 关键词：日本血吸虫抗体细胞因子
- 日本血吸虫融合基因疫苗的研究进展被引量：2
- 2013年
- 日本血吸虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,研制疫苗防治该病是当前研究的热点领域。国内外学者对日本血吸虫融合基因疫苗进行了研究,本文综述了该疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究新进展。
- 张丽李文桂
- 关键词：融合基因疫苗免疫
- 双相障碍的免疫学研究进展被引量：4
- 2017年
- 双相障碍是一类病程复杂、治疗难度大、致残率高的慢性精神疾病。在过去的几十年中,虽然对双相障碍的研究取得了一定进展,但其确切的病因及发病机制仍不明确。近年来,越来越多的研究显示免疫系统失调可能是双相障碍的一个发病机制。本文总结了双相障碍患者外周血及中枢神经系统炎症因子的研究,并探讨了以炎症因子为靶点的免疫治疗方法在双相障碍治疗中的研究进展。
- 张丽蒙华庆
- 关键词：双相障碍免疫系统细胞因子小胶质细胞免疫治疗
- 日本血吸虫重组两歧双歧杆菌(pGEX-Sj26GST)疫苗的构建及鉴定被引量：3
- 2013年
- 目的构建日本血吸虫重组两歧双歧杆菌(pGEX-Sj26GST)疫苗,并对其进行鉴定。方法采用RNeasy Mini试剂盒提取日本血吸虫成虫总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得Sj26GST抗原编码基因;将该编码基因与pGEX-1λT载体进行连接,得到重组质粒pGEX-Sj26GST,并对其进行双酶切鉴定;将重组质粒电转化入两歧双歧杆菌中,构建重组两歧双歧杆菌(pGEX-Sj26GST)疫苗,PCR鉴定疫苗。结果 RT-PCR扩增出的日本血吸虫成虫Sj26GST基因片段长度为676bp;双酶切证实Sj26GST抗原编码基因成功插入pGEX-1λT载体中;PCR证实从重组两歧双歧杆菌疫苗中扩增出长度为676bp的Sj26GST基因片段。结论成功构建了日本血吸虫重组两歧双歧杆菌(pGEX-Sj26GST)疫苗。
- 张丽李文桂向进平
- 关键词：日本血吸虫两歧双歧杆菌疫苗
