董华凰
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 金纳米探针结合PCR检测HIV-1 p24抗原的研究被引量：2
- 2012年
- 目的建立以金纳米探针结合终端PCR技术超灵敏检测HIV-1p24抗原的方法。方法采用单克隆抗体1G12和1D4建立的夹心ELISA法检测合成的HIV-1p24抗原。挑选拟南芥基因组中一段47bp的DNA作为条形码DNA，与5’端修饰巯基的捕获DNA（条形码DNA的互补序列）杂交形成双链DNA。在金纳米粒子表面连接1D4，并与双链DNA通过巯基连接，制成金纳米探针。微孔板上包被1G12，与待检的重组HIV-1p24抗原及金纳米探针夹心结合。将结合的条形码DNA通过加热解离下来作为检测信号，设计并合成引物进行PCR检测及4％凝胶电泳分析，进而鉴定p24抗原的含量，然后与ELISA法灵敏度进行比较。结果采用单克隆抗体1G12和1134建立夹心ELISA法，检测HIV-1p24抗原最低检测限为1000pg／ml，采用相同抗体对建立金纳米探针法，通过PCR凝胶电泳法间接检测HIV-1p24抗原，显示PCR产物电泳条带的强弱与所检测p24抗原含量具有良好的对应关系，最低检测限可达到1pg／ml。结论金纳米探针结合PCR凝胶电泳法可以对HIV-1p24抗原进行检测，与ELISA法比较，其灵敏度可提高3个数量级。
- 董华凰刘建礼朱红张桂云孟令章邢文革邱茂锋肖瑶姚均潘品良蒋岩
- 关键词：金纳米粒子琼脂凝胶
- HIV阳性的IDU人群和MSM人群血浆IgG及其亚型特征
- 2010年
- 目的探索艾滋病病毒(HIV)阳性的静脉吸毒(IDU)人群和男男性行为(MSM)人群,IgG、IgG1-4是否有差异。方法抽取652份血清/血浆样品,其中正常人315份,HIV阳性静脉吸毒者222份,HIV阳性男男性行为者115份。HIV阳性血浆根据CD4+T淋巴细胞数量分为两组:<350细胞/μl组和≥350细胞/μl组;并且用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测IgG水平,用竞争ELISA方法检测IgG1-4水平。结果 HIV阳性IDU人群:其IgG与健康人群相比无差异,其IgG1和IgG2低于健康人群,IgG3和IgG4高于健康人群;HIV阳性MSM人群:其IgG、IgG1和IgG3高于健康人群,但CD4+≥350μl组的IgG和IgG1与健康人群相比无差异,IgG2低于健康人群,IgG4则是CD4<350/μl组与健康人群相比无差异,而CD4+≥350/μl组高于健康人群。结论 HIV阳性IDU人群和MSM人群之间IgG、IgG1和IgG4的变化趋势有差异,IgG2和IgG3的变化趋势相同。
- 孟令章赵晶陶钧苏雪丽董华凰刘勇韩梅赵净洁肖瑶蒋岩
- 关键词：静脉吸毒者男男性行为者CD4+T淋巴细胞
- 纳米生物条形码方法检测蛋白的关键技术及其发展
- 2011年
- 蛋白生物标志物的检测对了解疾病的发生和发展至关重要,在很多疾病早期,蛋白标志物的浓度通常很低,常用的ELISA法经常无法检出,灵敏度尚不能满足临床的需要.纳米BCA技术是将DNA标记技术与目标蛋白结合起来,将与蛋白识别过程相关的信号进行放大,通过标记DNA的鉴定来实现蛋白的检测,为生物标记物的高灵敏度检测打开了新的局面[1],在生物分子检测、传染病监测、肿瘤早期发现和监测等各个方面有着广泛的应用前景.
- 董华凰蒋岩
- 关键词：蛋白标志物纳米条形码传染病监测疾病早期ELISA法
