郭超
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：天津市科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 粗糙脉孢菌GH45家族内切纤维素酶基因ncGH45在毕赤酵母中表达及重组酶的性质表征被引量：3
- 2016年
- 纤维素酶作为一种重要的糖苷水解酶,在生物质能源生产、饲料、造纸、洗涤和纺织领域都有着非常广泛的应用。粗糙脉孢菌来源的GH45家族内切纤维素酶基因（nc GH45）全长935 bp,包含一个53 bp的内含子（339-391）,编码272个氨基酸,包括一个N-端的GH45家族催化结构域和C-端的1家族碳水化合物结合结构域。该基因在毕赤酵母中得到了分泌表达,且表达蛋白条带单一,酶活性达到20 U/m L。重组酶r Nc GH45的最适p H为4.5～5.0,最适温度为60～65℃,并且在较宽的p H范围（p H 4.0～8.0）和温度范围（30～70℃）都能维持75%以上的酶活。在37℃和50℃,p H 3.0～11.0都有着非常好的稳定性;该酶的热稳定性非常好,在70℃和80℃处理2 h还能剩余89.6%和77.7%的酶活,即使在沸水中煮10 min还能剩余10%的酶活。r Nc GH45的最适底物是地衣多糖（1 116.0 U/mg）,其次是大麦葡聚糖（754.2 U/mg）和CMC-Na（254.6 U/mg）,对大麦葡聚糖和CMC-Na的动力学常数Km和Vmax分别为6.26 mg/m L和997.4μmol/mg·min,19.96 mg/m L和722.1μmol/mg·min。水解产物分析结果表明,r Nc GH45对多糖的水解产物主要是纤维五糖,对寡糖的最小作用底物是纤维三糖,而对纤维二糖没有作用。对纺织品脱毛实验的结果表明,酶的添加量为10 U时,减量率为1.55%。上述结果表明成功构建了r Nc GH45高效表达工程菌株,表达的重组蛋白性质优越,有着良好的工业应用前景。
- 郭超赵军旗齐西珍孙文良刘浩田朝光
- 关键词：脱毛毕赤酵母
