高磊
- 作品数：14 被引量：7H指数：2
- 供职机构：陕西省微生物研究所更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子绿脓菌素(PCN)合成的影响被引量：1
- 2017年
- 【目的】研究蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子绿脓菌素(PCN)的影响。【方法】通过热处理和分级醇沉等方法得到蝇蛆抗菌肽粗提物,得率11%,制成25μg·μl^(-1)的母液,进一步研究不同浓度蝇蛆抗菌肽粗提液体对铜绿假单胞菌模式菌株PAO1和临床分离菌株PCN合成的影响。【结果】当浓度大于0.5μg·μl^(-1)时,蝇蛆抗菌肽粗提液对PAO1的PCN的合成产生了显著的抑制作用。临床分离的铜绿假单胞菌菌株也有类似的结果。【结论】低浓度(非致死剂量的)蝇蛆抗菌肽粗提物对铜绿假单胞菌毒力因子PCN具有显著抑制作用。
- 高磊王军张琨陈文龙万一
- 关键词：铜绿假单胞菌绿脓菌素
- 秦岭地区羊肚菌根系土样黏细菌的分离
- 2019年
- 通过分离陕西秦岭地区羊肚菌根系土样中的黏细菌,建立黏细菌的分离方法,分析羊肚菌根系土样中黏细菌的多样性。采集自陕西商洛地区种植羊肚菌根系土样,采用不同诱导方法分离土样中的黏细菌,比较不同方法的出菌率,通过菌落形态、显微照片对黏细菌进行观察,并结合16S rRNA序列,分析得到的黏细菌种类。采用活的大肠埃希菌作为诱导底物分离出的黏细菌数量最多,本次实验从羊肚菌根系土样中共分离纯化出17株黏细菌,包括5个属,其中黏球菌属(Myxococcus)12株,珊瑚球菌属(Corallococcus)2株,孢囊杆菌属(Cystobacter)1株,原囊菌属(Archangium)1株,标桩菌属(Stigmatella)1株。结果显示羊肚菌根系土壤有黏细菌存在,其中以黏球菌属居多,为后续探讨黏细菌与羊肚菌之间是否存在互生关系提供参考。
- 王军高磊高磊万一
- 关键词：羊肚菌黏细菌分离纯化
- 秦岭丹江流域黏细菌的分离及其代谢产物研究被引量：2
- 2019年
- [目的]分离陕西秦岭丹江流域土壤中的黏细菌,收集其代谢产物,对代谢产物成分和活性进行分析.[方法]采用大肠杆菌诱导法和滤纸片诱导法分离从丹江流域采集的18份土壤样品中的黏细菌,用摇瓶发酵得到其代谢产物,采用枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和大肠杆菌作为指示菌对代谢产物进行平板抑菌试验;对4种指示菌抑制活性明显菌株的代谢产物成分进行HPLC和薄层色谱(TLC)分析,采用细胞凋亡法测试了代谢产物组分对HepG2肝癌细胞的毒性.[结果]共分离纯化出23株黏细菌,包括黏球菌属(Myxococcus) 15株,珊瑚球菌属(Corallococcus)3株,孢囊杆菌属(Cystobacter)1株,原囊菌属(Archangium)3株,软骨霉状菌属(Chondromyces)1 株.抑菌试验表明15号菌株的2号代谢产物对4种指示菌均有不同程度的抑制作用.对HPLC得到的15号菌株2号代谢产物的5号组分进行研究,结果表明,其能明显增加HepG2细胞凋亡.[结论]秦岭丹江流域土样中的黏细菌具有一定的多样性,得到1株活性菌株,其代谢产物具有抑菌活性和抗肿瘤细胞活性.
- 王军李宏铎张琨张琨万一
- 关键词：黏细菌代谢产物生物活性丹江流域
- 黄酮类化合物用于制备β-内酰胺酶抑制剂的用途
- 本发明提供了黄酮类化合物用于制备丝氨酸β‑内酰胺酶抑制剂的用途。具体的所述黄酮类化合物为槲皮素、漆黄素、木犀草素、3',4',7‑三羟基黄酮、芹菜素、山奈酚和二氢槲皮素中的任意一种或者多种组合，尤其公开了在制备D类丝氨酸...
- 万一张月娟高磊秦川张绪王军
- 白藜芦醇联合酮康唑在制备抗真菌产品中的应用
- 本发明公开白藜芦醇及白藜芦醇联合酮康唑在制备抗真菌感染疾病药物中的应用。本研究首次利用白藜芦醇和酮康唑药物联用具有协同抗真菌的作用，能显著降低酮康唑的使用浓度，对白色念珠菌、红色毛癣菌及石膏小孢子菌的抑菌效果均优于单独使...
- 万一王军张绪高磊张月娟王璐
- 一株异常球菌H-1及其在产生红色素中的应用
- 本发明公开一种异常球菌H‑1及其在产生红色素中的应用。通过在南极腐殖土壤中分离筛选并经过系列鉴定获得一株新菌种异常球菌（<I>Deinococcus sp.</I>）H‑1 CGMCC N0.16333，利用分离出的菌种...
- 万一张琨訾静王军张绪高磊
- 文献传递
- 重组发光铜绿假单胞菌PAO1-lux在医用材料细菌粘附性检测中的应用
- 本发明涉及重组发光铜绿假单胞菌PAO1‑lux在医用材料细菌粘附性检测中的应用，其特征在于，采用重组发光菌株PAO1‑lux，M9培养基，37℃，pH6.2培养，发光值检测窗口期为6h‑24h，可应用于金属铝、金属锌、玻...
- 万一王璐高磊王琰
- 文献传递
- 一株异常球菌H-1及其在产生红色素中的应用
- 本发明公开一种异常球菌H‑1及其在产生红色素中的应用。通过在南极腐殖土壤中分离筛选并经过系列鉴定获得一株新菌种异常球菌（<I>Deinococcus sp.</I>）H‑1 CGMCC N0.16333，利用分离出的菌种...
- 万一张琨訾静王军张绪高磊
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌RhlR抗血清制备被引量：2
- 2019年
- 目的在原核系统中表达铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)PAO1的调控蛋白RhlR,制备兔抗RhlR抗血清。方法构建重组表达载体pGEX-4T-1-rhlR和pET-22b-rhlR并转化至大肠埃希菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达GST-RhlR和His-RhlR蛋白,经GST或Ni^(2+)亲和层析纯化重组蛋白。将His-RhlR蛋白免疫新西兰大白兔,制备RhlR抗血清,GST-RhlR蛋白包被ELISA板,检测效价。结果构建的表达载体pGEX-4T-1-rhlR和pET-22b-rhlR经双酶切及测序鉴定证明构建正确;构建的工程菌表达的目的蛋白His-RhlR和GST-RhlR相对分子质量分别为29 000和54 000,表达量均约占菌体总蛋白的85%,纯度大于90%。制备的RhlR抗血清效价可达1∶80 000。结论获得高效价的RhlR抗血清,为PA中rhl调控系统的研究奠定基础。
- 訾静王军高磊张琨张绪万一
- 关键词：铜绿假单胞菌原核表达抗血清
- 铜绿假单胞菌LasR蛋白的表达及抗血清制备被引量：2
- 2017年
- 目的将铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)中的调控蛋白LasR在原核系统中进行表达,制备LasR抗血清,为PA中las调控系统的研究奠定基础。方法以PA模式菌株PAO1全基因组为模板,PCR扩增lasR基因,PCR产物用Bam HI/EcoRI双酶切连接至p GEX-4T-1载体,获得重组表达载体p GEX-4T-1-lasR;PCR产物经Nco I/Xho I双酶切连接至p ET28a载体,获得重组表达载体p ET28a-lasR。将重组表达载体分别转化至大肠杆菌感受态细胞BL21中,分别以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达GST-LasR和His-LasR蛋白,通过GST或Ni^(2+)亲和层析纯化重组蛋白。将纯化后的His-LasR蛋白免疫新西兰大白兔,制备LasR抗血清;纯化后的GST-LasR蛋白用于LasR抗血清ELISA效价的检测。结果 lasR基因序列大小为717 bp;成功构建p GEX-4T-1-lasR和p ET28a-lasR表达载体。构建的工程菌能够有效表达目的蛋白His-LasR和GST-LasR,蛋白纯度大于95%;LasR抗血清的效价为1∶60 000。结论在原核系统中成功表达了可溶性LasR重组蛋白,并获得高效价的LasR抗血清,为PA中las调控系统的研究奠定了基础。
- 訾静王军高磊张琨张绪万一
- 关键词：铜绿假单胞菌原核表达抗血清
