董玉凤
- 作品数:9 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家麻类产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 基因拆分技术的理论基础及其在限控转基因飘流中的应用
- 2014年
- 随着转基因作物种植面积的逐年增长,转基因安全性问题引起越来越多的争论,其中花粉扩散引起的转基因向近缘种飘流的问题是人们关注的焦点问题之一。基因拆分技术为采用生物学措施控制转基因飘流提供了新的思路和途径。基因拆分技术是基于内含肽intein介导的蛋白剪接功能而建立起来的。目前已在拟南芥、烟草、小麦等作物中证明多个基因拆分后能重新组装成有活性的功能蛋白,这为通过基因拆分技术控制转基因飘流提供了理论基础和实验支撑。本文对基因拆分技术的理论基础及其用于限控转基因飘流方面的研究进展进行了综述。
- 董玉凤王旭静唐巧玲王志兴
- 关键词:内含肽
- 抗虫耐除草剂转基因玉米SW-1目标性状测试及多重PCR检测被引量:5
- 2017年
- 以转基因玉米IE034和12-5为亲本,通过杂交复合获得同时含有cry1Ie、cry1Ab/cry2Aj和G10evo-EPSPs基因的复合性状转基因玉米SW-1。农艺性状检测证明SW-1同时具有抗虫和耐除草剂的特性。通过引物特异性筛选、退火温度和引物浓度等条件优化,建立了SW-1的多重PCR检测体系。多重PCR检测体系所用的内标基因为zSSIIb,反应体积为30μL,最佳退火温度为62℃,各引物加入量为0.3μL(10μmol/L)。利用此多重PCR检测体系,当产品中SW-1的质量百分比超过0.5%时,目标基因cry1Ie、cry1Ab/cry2Aj和G10evo-EPSPs都能同时被检测出来。研究结果为复合性状转基因玉米SW-1的分子特征检测提供了良好的技术支撑,同时也为含有cry1Ie、cry1Ab/cry2Aj和G10evo-EPSPs基因的其他转化体的多重PCR检测提供了科学数据。
- 张欣董玉凤王旭静王志兴
- 关键词:抗虫耐除草剂转基因玉米多重PCR检测
- 克隆转基因生物中外源基因整合位点处侧翼序列的方法
- 本发明公开了一种克隆转基因生物中外源基因整合位点处侧翼序列的方法。该方法包括:1)根据转基因生物中已知外源基因设计6条引物,按照在所述外源基因上的位置自5’到3’依次记为F1、R2、R3、AD、F2和F3;2)设计随机引...
- 王志兴王旭静唐巧玲董玉凤张小兵
- 文献传递
- 一种鉴定草甘膦抗性水稻的方法
- 本发明公开了一种鉴定草甘膦抗性水稻的方法。本发明提供了一种引物组合,由引物对甲和引物对乙组成;引物对甲由En‑F和En‑R组成;引物对乙由Ec‑F和Ec‑R组成;En‑F如序列3所示;En‑R如序列4所示;Ec‑F如序列...
- 王旭静王志兴董玉凤
- 文献传递
- 克隆转基因生物中外源基因整合位点处侧翼序列的方法
- 本发明公开了一种克隆转基因生物中外源基因整合位点处侧翼序列的方法。该方法包括:1)根据转基因生物中已知外源基因设计6条引物,按照在所述外源基因上的位置自5’到3’依次记为F1、R2、R3、AD、F2和F3;2)设计随机引...
- 王志兴王旭静唐巧玲董玉凤张小兵
- 文献传递
- 利用基因拆分技术培育耐草甘膦转基因水稻的研究被引量:1
- 2019年
- 耐除草剂转基因水稻基因飘流可能产生的环境安全问题是人们关注的焦点之一,并已成为耐除草剂转基因水稻能否在我国生产上发挥效益的限制因素。基因拆分技术能够有效地控制转基因目标性状飘流,为培育耐除草剂转基因水稻提供新的途径和思路。本研究将耐除草剂基因G2-aroA拆分成N端(EPSPSn,1~295aa)和C端(EPSPSc,296~435aa),分别与SspDnaE蛋白内含肽的N端(Intein-N)和C端(Intein-C)连接形成融合基因EPSPSn-In与Ic-EPSPSc,并分别通过农杆菌介导法转入受体材料中花11。Southern杂交证明转基因水稻En-12和Ec-22中外源基因为单拷贝插入。侧翼序列分析证明转基因水稻En-12和Ec-22中外源基因分别插入第2和第6染色体。利用四引物法筛选出转基因水稻En-12和Ec-22的纯合系,并通过有性杂交获得同时含有EPSPSn-In与Ic-EPSPSc的转基因水稻En×Ec。草甘膦抗性分析发现,单独含有1个基因片段的转基因水稻En-12和Ec-22不具有耐受草甘膦特性,而同时含有2个基因片段的转基因水稻En×Ec具有耐受草甘膦的特性,说明拆分后的2个蛋白片段在intein的介导下重新组装成完整有功能蛋白,并赋予转基因水稻耐受草甘膦的特性。转基因水稻En×Ec与含有完整G2-aroA转基因水稻G2-6相比,其耐受草甘膦的能力有所下降,但能够满足生产需求。本研究结果为利用基因拆分技术培育转基因耐草甘膦水稻提供了科学依据,同时也为利用基因工程手段培育转基因杂交稻提供了新的技术平台。
- 董玉凤王旭静宋亚亚靳茜王志兴
- 关键词:转基因水稻
- 双T-DNA多基因共转化植物表达载体的构建与应用
- 因复合性状是当前转基因植物发展的主要特色,而且在转基因产品安全评价中,要求去除选择标记基因,以避免选择标记基因可能带来的安全性问题.因此,培育多性状无选择标记基因的转基因植物是当前研究的热点问题之一.目前已提出多种去除筛...
- 王旭静苏月焱唐巧玲杨江涛董玉凤庞为民张小兵王志兴
- 关键词:转基因植物多基因表达
- 文献传递
- 一种鉴定草甘膦抗性水稻的方法
- 本发明公开了一种鉴定草甘膦抗性水稻的方法。本发明提供了一种引物组合,由引物对甲和引物对乙组成;引物对甲由En‑F和En‑R组成;引物对乙由Ec‑F和Ec‑R组成;En‑F如序列3所示;En‑R如序列4所示;Ec‑F如序列...
- 王旭静王志兴董玉凤
- 黑龙江亚麻产业发展前景分析被引量:5
- 2018年
- 文章从亚麻纺织品需求和市场的角度对亚麻产业的发展前景进行了分析。我国为世界亚麻产品的生产基地,从纱、布市场看,出口量稳步增加。劳动力成本低廉、产业基础雄厚,随着创新能力的提升,服装等高附加值产品呈现出了巨大的市场潜力。亚麻在建筑材料、农业等方面的利用,展现出了更广泛的市场空间,亚麻多用途开发利用对增产、增效和市场扩展有着积极意义。在农业种植上,黑龙江省具有充足的土地,可满足亚麻种植的需求。我国亚麻产业发展在黑龙江具有良好的前景。
- 吴广文袁红梅宋喜霞谢冬微姜卫东赵德宝康庆华于莹姚玉波董玉凤
- 关键词:亚麻纺织