卢帅
- 作品数：19 被引量：42H指数：4
- 供职机构：新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004不同途径给药的大鼠体内药动学研究被引量：4
- 2019年
- 目的:考察去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004不同给药途径在大鼠体内的药动学。方法:分别灌胃(ig)给予Wistar大鼠DH-004 50 mg·kg-1和尾静脉注射(iv)DH-004 10 mg·kg-1。UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中DH-004的浓度,采用Kinetica 5.0药动学软件计算药动学参数。结果:口服给药主要药动学参数Cmax,AUClast,CL,Vz,MRT和t1/2分别为(142.57±34.64)ng·m L-1,(566.40±164.27)ng·h·m L-1,(90.60±23.52)L·h-1,(297.15±57.33)L,(4.01±0.35)h和(2.51±0.74)h。尾静脉注射给药的主要药动学参数Cmax,AUClast,CL,Vz,MRT和t1/2分别为(1 894.78±453.96)ng·m L-1,(1 629.93±352.34)ng·h·m L-1,(5.03±0.97)L·h-1,(7.26±2.68)L,(0.83±0.17)h和(1.53±0.27)h。DH-004的绝对生物利用度为6.94%。结论:DH-004口服和静脉给药后在大鼠体内消除较快,绝对生物利用度低。该结果为DH-004的成药性评估提供了科学依据,为其结构改造与剂型设计提供了重要参考。
- 高惠静巩月红卢帅陈蓓文丽梅王建华
- 关键词：不同给药途径药动学
- 抑制细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤修复基因表达的干扰RNA及其应用
- 本发明涉及生物医药工程技术领域，是一种抑制细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤修复基因表达的干扰RNA及其应用，该抑制细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤修复基因表达的干扰RNA的靶序列为正向CCGUGUUCGUAAGCAGCUUT...
- 王建华赵军温浩卢帅文丽梅巩月红高惠静陈蓓吕国栋张海波郑璇
- 文献传递
- 过氧化氢诱导人肝癌细胞BEL7402产生氧化应激细胞模型的建立被引量：9
- 2019年
- 目的研究过氧化氢(H2O2)构建体外人肝癌细胞BEL7402氧化应激模型的最佳作用浓度及时间。方法采用噻唑蓝(MTT)染色法检测以10、100和1 000μmol/L的H2O2处理0、2、4、6、8、10、12和24 h后BEL7402细胞的存活率;采用双氢罗丹明123(DHR123)探针法、单细胞凝胶电泳技术和分光光度法检测以100μmol/L H2O2处理BEL7402细胞4 h后线粒体活性氧(ROS)含量、DNA损伤、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果100μmol/L H2O2处理BEL7402细胞4 h后,其存活率为(43. 44±5. 74)%,与10μmol/L H2O2处理组(92. 77±5. 51)%相比,细胞存活率降低,差异有统计学意义(P <0. 01); ROS含量结果显示100μmol/L H2O2处理BEL7402细胞40 min时其体内的ROS含量达到峰值,之后呈下降趋势;与健康对照组比较,100μmol/L H2O2组OTM值升高(P <0. 05),MDA含量升高,差异有统计学意义(P <0. 01),SOD和GSH-Px活性均下降(P <0. 05或P <0. 01)。结论 100μmol/L H2O2、预处理4 h,可成功构建BEL7402细胞体外氧化应激模型,可为通过氧化应激机制抗肝病新药的研发奠定基础。
- 文丽梅卢帅卢帅李亚芬郑璇田春艳赵军王建华
- 关键词：人肝癌细胞氧化性应激细胞培养技术彗星试验
- 阿霉素体外抗细粒棘球蚴原头节作用研究被引量：2
- 2019年
- 目的研究阿霉素(Dox)对细粒棘球蚴原头节的体外抑制作用。方法4800个原头节随机分为空白对照组、1%DMSO组、Dox组(25、50、100、200、400、600μmol/L),每组200个原头节,设3个平行组,体外干预24 h。伊红拒染实验检测Dox干预后原头节活力,统计存活率。扫描电镜观察Dox干预后原头节表面超微结构变化。单细胞凝胶电泳实验检测Dox干预后原头节DNA损伤程度。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Dox干预后DNA损伤相关基因共济失调毛细血管扩张症突变激酶(ATM)、p53、DNA拓扑异构酶2A(Topo2a)的mRNA表达水平。结果伊红拒染实验结果显示,空白对照组、1%DMSO组、25、50、100、200、400、600μmol/L Dox组细粒棘球蚴原头节的存活率分别为(99.0±0.5)%、(98.6±0.3)%、(96.0±1.4)%、(80.3±4.8)%、(75.6±6.2)%、(53.2±3.0)%、(26.4±8.1)%和0,IC50为(267.9±7.1)μmol/L。与空白对照组相比,1%DMSO组、25μmol/L Dox组原头节存活率差异无统计学意义(P>0.05),50、100、200、400、600μmol/L Dox组原头节存活率差异有统计学意义(P<0.01)。扫描电镜结果显示,空白对照组、1%DMSO组原头节表面光滑,头节呈球形或椭圆形,顶突完整,微毛清晰可见;400μmol/L Dox组原头节吸盘变形,体部塌陷严重,顶突轻微变形,微毛明显脱落,虫体表层发生皱缩。单细胞凝胶电泳实验结果显示,100μmol/L Dox组原头节出现拖尾现象,彗星尾距(OTM)为16.6±1.7,与空白对照组(0.1±0.0)相比,差异有统计学意义(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,1%DMSO组原头节ATM、p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为1.0±0.1、1.1±0.1、1.3±0.9,与空白对照组(1.0±0.1、1.0±0.4、1.0±0.1)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。100μmol/L Dox组原头节ATM、p53和Topo2a mRNA相对表达量分别为38.6±3.5、10.0±2.5、54.0±0.8,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Dox具有体外抗细粒棘球蚴原头节作用,可引起虫体DNA损伤,可能与ATM、p53、Topo2a�
- 田春艳陈蓓卢帅文丽梅赵军郑璇库尔班泥沙·阿马洪高旖王建华
- 关键词：阿霉素DNA损伤P53
- 细粒棘球蚴胰岛素受体(EgInsR)与人胰岛素(Huins)酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定被引量：4
- 2016年
- 目的构建细粒棘球蚴(Eg)胰岛素受体(InsR)与人胰岛素(Huins)酵母双杂交系统,检测表达蛋白对报告基因的自激活活性及对酵母菌的毒性。方法从Eg cDNA中扩增EgInsR基因和Huins编码序列,分别将EgInsR基因和Huins编码序列克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中并进行限制性酶切鉴定和测序鉴定,鉴定正确的重组载体采用PEG/LiAc法转化酵母菌,检测诱饵蛋白对酵母菌生长的自激活活性和毒性。结果扩增的EgInsR和Huins基因编码区全长分别为1 122bp和261bp。构建的pGADT7-EgInsR及pGBKT7-Huins两组重组质粒转化Y2HGold酵母菌表达的蛋白对Y2HGold无毒性及自激活作用。结论构建的EgInsR基因和Huins基因重组载体表达蛋白对Y2HGold酵母菌无毒性和自激活作用,为研究Eg与中间宿主的交互作用机制奠定了基础。
- 文丽梅王建华卢帅郑海亚吕国栋赵军
- 关键词：酵母双杂交自激活
- 去氢骆驼蓬碱体外诱导细粒棘球蚴原头节凋亡过程中caspase-3及抗氧化酶活性检测分析被引量：5
- 2018年
- 目的观察不同浓度去氢骆驼蓬碱体外诱导细粒棘球蚴原头节生长凋亡过程中虫体活力、Caspase-3及相关抗氧化酶活性变化。方法将体外培养的细粒棘球蚴原头节分为空白对照组、溶剂组、阿苯达唑(ABZ)阳性对照组及不同浓度去氢骆驼蓬碱(25、50μmol/L)处理组进行体外干预试验,于48、96、144、192、240、288h后取样,经0.1%伊红染色后置于倒置显微镜下观察原头节活力。试验重复验证3次,绘制活力曲线图。用ELISA试剂盒检测作用48h、96h后各浓度组原头节caspase-3及抗氧化酶HO-1和NQO-1的活性变化。结果去氢骆驼蓬碱处理组从作用第48h开始原头节活力开始下降,培养至第240h时25μmol/L组原头节死亡率为97.9%,50μmol/L组原头节均死亡。ELISA法测定25、50μmol/L去氢骆驼蓬碱作用原头节48h后caspase-3活性分别为(32.776±8.437)ng/ml和(52.129±5.949)ng/ml,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);ELISA法测定25、50μmol/L去氢骆驼蓬碱作用48、96h后原头节抗氧化酶HO-1和NQO-1活性分别为(0.563±0.031)ng/ml、(1.832±0.10)ng/ml和(0.425±0.011)ng/ml、(1.288±0.05)ng/ml,差异均有统计学意义(P<0.05),且呈时间及剂量依赖性。结论去氢骆驼蓬碱能抑制体外培养的细粒棘球蚴原头节的生长,并能降低caspase-3及抗氧化酶活性,具体机制有待进一步研究。
- 巩月红高惠静卢帅郑璇文丽梅陈蓓赵军王建华
- 关键词：去氢骆驼蓬碱活性
- 阿苯达唑纳米微粉及其制备方法
- 本发明涉及阿苯达唑加工技术领域，是一种阿苯达唑纳米微粉及其制备方法，该阿苯达唑纳米微粉，联合球磨、高速剪切、高压均质和喷雾干燥技术制备阿苯达唑纳米微粉。本发明采用球磨、高速剪切、高压均质联合喷雾干燥技术制备阿苯达唑纳米微...
- 赵军陈蓓王建华温浩高惠静巩月红张玉欣陈国儒文丽梅卢帅陈渤松
- 文献传递
- UPLC-Q-TOF-MS法测定绵羊血浆中阿苯达唑及其3种代谢产物的浓度及药代动力学研究被引量：4
- 2018年
- 目的建立同时测定绵羊血浆中阿苯达唑(ABZ)、阿苯达唑亚砜(ABZSO)、阿苯达唑砜(ABZSO_2)、阿苯达唑氨基砜(ABZSO_2-NH_2)浓度的超高效液相色谱-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法,并研究阿苯达唑脂质体混悬液在健康绵羊体内的药代动力学特征。方法 6只绵羊单剂量灌胃给予阿苯达唑脂质体混悬液(10mg/kg)后,不同时间点颈静脉采血,血浆样品经乙腈沉淀蛋白法处理后,采用UPLC-Q-TOF-MS法测定血药浓度,内标为甲苯咪唑(MBZ),色谱柱为ACQUITY UPLC~? BEH C_(18)(2.1mm×50mm,1.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速为0.4mL/min,进样量为2μL,柱温为40℃,采用电喷雾离子化(ESI)源,正离子扫描模式,选择监测离子检测(SIM),ABZ m/z 266.096,ABZSO m/z 282.091,ABZSO_2m/z 298.086,ABZSO_2-NH2m/z 240.081,内标MBZ m/z 296.104,应用Kinetica程序计算药代动力学参数。结果阿苯达唑浓度为6.2～798.0ng/mL,阿苯达唑亚砜浓度为5.2～5 370.0ng/mL,阿苯达唑砜浓度为3.3～3 168.0ng/mL,阿苯达唑氨基砜浓度为8.6～1 100.0ng/mL,线性关系良好(r=0.999 5、0.998 1、0.999 4、0.998 8),定量下限分别为6.2、5.2、3.3、8.6ng/mL,提取回收率均>95.3%,日间、日内精密度RSD均<15.0%,在本实验涉及的条件下样品稳定。绵羊灌胃给予阿苯达唑脂质体混悬液后,血浆中检测不到ABZ母体药物;给药后36、48h可检测到较低浓度ABZSO_2-NH_2。用非房室模型测得主要药代动力学参数,ABZSO和ABZSO_2的T_(1/2)、C_(max)、AUC_(0-∞)分别为(5.13±2.00)h、(3.78±0.78)μg/mL、(59.10±6.24)μg×h/mL和(3.29±0.09)h、(0.53±0.070)μg/mL、(13.66±1.54)μg×h/mL。结论本方法可靠、专属性强,适用于ABZ及其代谢物的血药浓度测定和药代动力学研究,为综合评价阿苯达唑脂质体混悬液提供参考。
- 张海波张海波卢帅卢帅李志强陈蓓
- 关键词：阿苯达唑脂质体药代动力学参数
- 抑制细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤修复基因表达的干扰RNA及其应用
- 本发明涉及生物医药工程技术领域，是一种抑制细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤修复基因表达的干扰RNA及其应用，该抑制细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤修复基因表达的干扰RNA的靶序列为正向CCGUGUUCGUAAGCAGCUUT...
- 王建华赵军温浩卢帅文丽梅巩月红高惠静陈蓓吕国栋张海波郑璇
- siRNA特异性干扰EgRad9基因表达对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响被引量：1
- 2018年
- 目的研究小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)特异性干扰Eg Rad9基因表达后对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响。方法利用电穿孔法将Eg Rad9-si RNA干扰序列和阴性对照干扰序列转染细粒棘球蚴原头节,实验分为Eg Rad9-si RNA-354、-614、-971干扰组,阴性对照组和空白对照组。电转染3 d后,加入自然状态下原头节最大耐受浓度的H_2O_2处理1 h,伊红染液染色后,倒置荧光显微镜下观察原头节活性并计算存活率。收集各组原头节的培养液,进行碱性磷酸酶活性的检测。电转染3 d后,加入自然状态下原头节耐受H_2O_2的最大耐受浓度处理1 h后,TRIzol法提取总RNA。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测Eg Rad9m RNA的表达。采用彗星实验检测干扰Eg Rad9基因表达后细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤情况,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测干扰Eg Rad9基因表达后细粒棘球蚴原头节体内ROS的含量,采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析。结果自然状态下细粒棘球蚴原头节体外耐受H_2O_2的最大浓度为0.4 mmol/L,干预时间为1 h;电穿孔法可将绿色荧光干扰序列有效的导入原头节体内,实验组和阴性对照组的原头节体内均有明亮的绿色荧光斑点;而空白对照组原头节体内无绿色荧光斑点。Eg Rad9-si RNA-354、-614、-971干扰组原头节的存活率分别为(42.99±4.03)%、(29.86±5.87)%和(56.48±4.64)%,初步筛选最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。si RNA-354、-614、-971干扰组碱性磷酸酶活性分别为0.024±0.001、0.004±0.001、0.039±0.002,其中Eg Rad9-si RNA-614组碱性磷酸酶活性与阴性对照组(0.095±0.001)和空白对照组(0.099±0.001)相比,差异均有统计学意义(t=10.227、10.934,均P<0.01),表明该组原头节Eg Rad9基因经干扰后对其活性影响最大,最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。Eg Rad9-si RNA-354、614、971干扰组Eg Rad9 m RNA表达量分别为0.432±0.055、0.291±0.079、0
- 郑璇卢帅赵军吕国栋文丽梅李亚芬田春艳王建华
- 关键词：小干扰RNADNA氧化损伤
