刘璐
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
- 供职机构:内蒙古农业大学林学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项内蒙古自治区科技计划项目更多>>
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- 沙柳SpsDREB8基因的克隆与表达分析被引量:1
- 2022年
- 脱水响应元件结合蛋白(DREB)是植物响应非生物胁迫应答的重要转录因子。本研究从沙柳(Salix psammophila)中克隆获得SpsDREB8基因,并对其进行AP2结构域多序列比对、构建进化树和预测蛋白结构等生物信息学分析,采用RT-qPCR方法对该基因在不同组织及逆境下的表达模式进行分析。结果表明,本研究成功克隆获得SpsDREB8基因,该基因全长864 bp,编码287个氨基酸,预测蛋白分子量为31615.84 Da,等电点为5.21,为亲水性蛋白,无信号肽区域,具有AP2保守结构域,属于AP2家族成员;基于系统进化树分析表明,该基因属于AP2/ERF转录因子家族DREB亚组A-2组,与杨柳科植物进化关系较近;实时荧光定量PCR结果显示,SpsDREB8基因在沙柳根、茎、叶、花中都有表达,其中在嫩茎中的表达量最高,根中的表达量最低;在高温、低温和NaCl处理下,SpsDREB8基因在1、2、4 h表达显著高于对照组;干旱处理24 h后,SpsDREB8基因表达显著上调。研究表明沙柳SpsDREB8可能在响应非生物胁迫过程中发挥重要作用。该研究结果为进一步探索沙柳抗逆分子机制提供了理论基础。
- 王雷张鑫李安玉薄高峰郝璞刘璐王文功阿拉腾苏和杨海峰
- 关键词:基因克隆非生物胁迫
- 沙柳SpsLAZY1a、SpsLAZY1b基因启动子克隆及表达分析
- 2022年
- 为研究SpsLAZY1a、SpsLAZY1b基因的表达调控机制,本研究从沙柳中分离了SpsLAZY1a、SpsLAZY1b基因的启动子片段。使用PlantCARE数据库对该启动子片段中顺式作用元件预测显示,SpsLAZY1a和SpsLAZY1b启动子序列中除了包含核心元件CAAT-box和TATA-box外,还含有光、茉莉酸甲酯、脱落酸、低温、乙烯、赤霉素等响应元件。Pro_(SpsLAZY1a)和Pro_(SpsLAZY1b)在烟草中瞬时表达和转基因84K杨中的GUS显色结果表明,Pro_(SpsLAZY1a)和Pro_(SpsLAZY1b)具有启动子活性。对转基因84K杨的GUS酶活检测结果表明,Pro_(SpsLAZY1a)的GUS表达活性强于Pro_(SpsLAZY1b)。对转基因84K杨茎的切片结果显示,蓝色显色反应主要集中于内皮层和韧皮部。上述结果表明,SpsLAZY1a、SpsLAZY1b基因的启动子是非组织特异性表达启动子,并且这两个基因启动子的活性存在差异。本研究结果为解析LAZY基因的上游调控机制提供参考。
- 刘璐贺玉娇王佳琪郝璞王佳濛于凤强阿拉腾苏和杨海峰
- 关键词:沙柳启动子克隆
- INRA717-1B4杂交杨TAC基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及编辑效率检测
- 2021年
- TAC(tiller angle control)基因作为IGT [G?L(A/T)IGT]保守家族的一员,与植物体内各类激素相互作用,共同参与分枝角度的调控。为探究TAC基因的分子结构功能及其调节功能,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统,以INRA717-1B4杂交杨为试验材料构建pDE-CAS9-NPTⅡ表达载体,通过农杆菌介导法侵染叶片进行遗传转化获得阳性植株,并通过测序检测基因编辑效率。最终获得基因编辑转基因株系12株,其中实现基因突变的2株,编辑效率为16.7%。本试验为CRISPR/Cas9系统在杨树TAC基因功能的验证提供了借鉴,为进一步在木本植物中的应用研究提供了技术支持。
- 郝璞薄高峰刘璐白鹤鸣吴凤霞周星雨杨海峰
- 沙柳SpsNAC042基因克隆及逆境表达分析被引量:2
- 2021年
- 采用同源克隆的方法获得沙柳SpsNAC042基因,通过生物信息学分析、组织特异性表达分析、逆境表达分析。结果表明,SpsNAC042基因的开放阅读框序列长度为900 bp,共编码299个氨基酸,测定为亲水性不稳定蛋白。组织特异性表达分析得出花中的基因相对表达量最高,幼叶、茎9~15节间、根、成熟叶的表达量依次降低,茎尖的表达量最低。SpsNAC042基因在干旱处理下与对照组相比整体呈增长趋势,并在8 h处达到最高;在低温处理下,基因表达量迅速积累,在2 h处达到最高,然后维持在较低水平表达;在盐和高温处理下SpsNAC042基因缓慢积累,后期迅速增高,最终在24 h处达到最高。研究表明SpsNAC042基因参与逆境应答反应,为深入开展沙柳NAC基因对生物和非生物胁迫应答研究提供了参考价值。
- 杨海峰薄高峰于兴旺李安玉张鑫郝璞刘璐
- 关键词:沙柳NAC基因克隆
- 大兴安岭南段阔叶次生林草本植物多样性研究被引量:2
- 2017年
- 以大兴安岭南段阔叶次生林为研究对象,在典型性山杨纯林、黑桦纯林、白桦+山杨混交林、白桦纯林和黑桦+白桦混交林等5个林型内,设置1 m×1 m草本植物样方56块。通过野外调查取样,选取Shannon-Wiener多样性指数、Simpson多样性指数、Pielou均匀度指数和Margalef丰富度指数研究了不同林型的阔叶次生林下草本植物的多样性。结果表明:山杨纯林的Shannon-Wiener指数、Simpson指数最高,分别为1.94和0.84。黑桦纯林的Margalef丰富度指数最高,白桦纯林的最低。随着林型的变化,各指数也相应地发生变化。
- 张雅喃赫淑华刘璐石波周梅赵鹏武曾楠
- 关键词:大兴安岭南段阔叶次生林