马莉莉
- 作品数：9 被引量：21H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛病毒性腹泻黏膜病毒E2基因的原核表达与免疫原性分析被引量：2
- 2017年
- [目的]原核表达牛病毒性腹泻黏膜病毒(BVDV)E2基因编码蛋白。[方法]采用PCR方法从BVDV中扩增E2基因片段,与原核表达载体pET-32a连接,构建重组表达质粒pET-32a-E2,转化E.coli(Rosetta)感受态细胞,重组菌用1 mmol/L IPTG诱导表达E2蛋白,进行SDS-PAGE电泳,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白,经Western blot分析鉴定免疫原性。[结果]重组质粒pET-32aE2经PCR及酶切鉴定证明构建正确,重组质粒能够在大肠杆菌中大量表达,表达产物的分子质量大小约为58 kDa,纯化后E2重组蛋白浓度0.521 mg/mL,Western blot分析表明,其能被BVDV阳性血清识别,具有很好的免疫原性。[结论]E2蛋白成功表达,为后续建立BVDV检测方法奠定了基础。
- 王宇婷马莉莉李晓月王士霞毕莹倪宏波
- 关键词：E2基因原核表达
- 猪圆环病毒和大肠杆菌混合感染的诊断
- 2017年
- 黑龙江省大庆市某猪场暴发猪病,临床主要表现猪体温升高、腹泻、日渐消瘦等症状。为了确诊该猪场的发病原因,实验室无菌提取病猪肺脏的DNA、RNA,经分离纯化进行PCR检测,同时进行细菌鉴定,生化试验等,最终PCR扩增结果诊断为猪圆环病毒和大肠杆菌的混合感染。药敏试验结果分析表明该分离菌对畜炎宁(克拉维酸+阿莫西林注射液)、头孢唑啉、阿米卡星和头孢噻呋高度敏感,并给猪场提出了有效的防治措施,为猪场对该类疾病的防控提供了参考。
- 马莉莉常春龙常敬伟倪宏波
- 关键词：猪圆环病毒大肠杆菌药敏试验
- 仔猪蓝耳病病毒、圆环病毒和链球菌混合感染的诊断
- 2017年
- 为诊断黑龙江省某猪场暴发的猪病,采用流行病学调查、临床检查和病理剖检以及实验室检测技术,通过PCR检测、革兰氏染色、生化试验等方法对无菌采集的病料进行检测。PCR检测结果显示猪圆环病毒和蓝耳病病毒为核酸阳性条带,革兰氏染色和生化试验结果为链球菌,最终证明该群病猪为圆环病毒、蓝耳病病毒和链球菌混合感染。本文提出了一些预防保护措施,也为猪圆环病毒病和蓝耳病的防治提供了参考。
- 马莉莉王宇婷倪宏波
- 关键词：圆环病毒蓝耳病毒链球菌
- 猪混合感染牛病毒性腹泻病毒、猪瘟病毒、蓝耳病病毒和大肠杆菌的诊断被引量：4
- 2016年
- 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)不仅感染奶牛和黄牛,还会感染猪、鹿和羊等多种动物。猪感染BVDV会出现类似于猪瘟的临床症状和病理变化。本试验通过对黑龙江大庆市某猪场送检的病猪进行实验室诊断,确诊该病猪为牛病毒性腹泻病毒、猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒和大肠杆菌混合感染。
- 王宇婷常敬伟李超马莉莉周玉龙倪宏波
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒猪瘟病毒大肠杆菌
- 牛呼吸道合胞体病毒流行病学的研究被引量：1
- 2016年
- 牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)是一种有包膜单股负链RNA病毒,属于副粘病毒科中肺病毒属病毒成员。自从20世纪70年代初BRSV被确认为是牛犊中引起呼吸道疾病的主要原因。众多免疫学和分子生物学方法的出现方便BRSV的研究。尽管如此,流行病学、分子流行病学和病毒的进化等许多方面仍然没有完全了解。自然感染过程的复杂使诊断更难,急需更好的治疗预防措施控制疾病。了解BRSV才能够建立感染机制,才能防止病毒和疾病的传播。本文综述了有关BRSV流行病学和分子流行病学的重要信息,并突出了病毒进化在病毒传播中的重要性。
- 马莉莉倪宏波
- 关键词：基因型
- 牛病毒性腹泻病毒感染MDBK细胞后差异表达基因分析被引量：3
- 2019年
- 目的利用高通量测序技术(Illumina平台)对感染牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的MDBK细胞进行转录组学分析,并对筛选出的差异表达基因进行功能归类及相关分子机制研究。方法用BVDV感染MDBK细胞,分别在12、24、48和72 h收集细胞,提取总RNA进行转录组学分析。通过信号通路数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)及基因功能(Gene Ontology,GO)对差异基因进行功能的注释和富集分析。结果与未接毒的细胞相比,在0～12、13～24、25～48、49～72 h分别共有差异基因56、390、487、164个。感染病毒后12与24 h、24与48 h、48与72 h分别有9、55、270个相同差异基因;经KEGG和GO分析,在感染病毒24、48、72 h后,差异基因主要富集到P53、FoxO、NF-kB和PI3K-AKT信号通路等;筛选出感染后与免疫等相关的差异基因P21、FOXO1、GABARAPL1等,主要集中在细胞周期复制、凋亡和免疫等相关信号通路上。结论本研究通过对筛选出的差异表达基因初步归类分析,为后续BVDV感染MDBK细胞并在细胞内复制的相关分子机制研究奠定了基础。
- 马莉莉陈月季翟军军倪宏波
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒转录组学差异表达基因
- 多杀性巴氏杆菌和猪圆环病毒混合感染的诊断被引量：6
- 2016年
- 大庆市某猪场发生以高热稽留、呼吸困难以及食欲废绝等为临床症状,部分仔猪甚至死亡的疫情。无菌采集病料,提取病变组织DNA或RNA进行猪瘟病毒、圆环病毒的PCR或RT-PCR检测,同时进行细菌分离培养等试验。PCR扩增出700 bp的猪圆环病毒特异性条带。诊断为多杀性巴氏杆菌和猪圆环病毒混合感染。
- 马莉莉王宇婷赵微翟军军倪宏波
- 关键词：圆环病毒巴氏杆菌
- 牛病毒性腹泻黏膜病疫苗的研究进展被引量：1
- 2016年
- 牛病毒性腹泻黏膜病由牛病毒性腹泻黏膜病病毒引起,该病普遍存在于世界各地的牛群中,给养牛业带来的主要影响有腹泻、黏膜病、持续感染、免疫抑制等,并伴随严重的经济损失。本文综述了该病疫苗在国内外使用情况及研究进展,为我国牛病毒性腹泻黏膜病疫苗研究提供依据。
- 马莉莉常敬伟王宇婷倪宏波
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒疫苗经济损失
- 猪圆环病毒和链球菌混合感染的诊断被引量：6
- 2016年
- 2016年7月,黑龙江省大庆市某猪场爆发猪病,临床主要表现体温升高、食欲废绝等症状。无菌提取病猪肺脏DNA、RNA,经分离纯化后PCR进行检测,同时进行细菌鉴定、生化试验等。PCR扩增结果诊断为猪圆环病毒和链球菌的混合感染。药敏试验结果表明该分离菌对强力霉素、头孢咪唑、氟哌酸高度敏感,并给猪场提出了有效的防治措施,为猪场对该类疾病的防控提供了参考。
- 马莉莉王宇婷倪宏波
- 关键词：猪圆环病毒链球菌药敏试验
