陈银银
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校优势学科建设工程资助项目江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪小肠上皮细胞分离培养与鉴定被引量：11
- 2015年
- 为建立功能性永生化的猪小肠上皮细胞系,并为猪肠道营养吸收与免疫调控以及仔猪肠道疾病发病机制的研究提供细胞模型,本试验采用组织块培养法来分离纯化猪小肠上皮细胞,并通过细胞角蛋白18、细胞增殖曲线、核型分析来鉴定猪小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块培养法能够成功培养猪小肠上皮细胞并稳定传11代。2)本试验获得的猪小肠上皮细胞角蛋白18抗原鉴定为阳性,染色体核型为二倍体。3)倒置显微镜下观察培养至第11代的猪小肠上皮细胞仍然保持着上皮细胞的特征,呈现"铺路石"和上皮样形态。培养11代后的猪小肠上皮细胞间隙开始变大,规则不明显,细胞开始凋亡。第15代的猪小肠上皮细胞则出现大量凋亡并从瓶底脱落,仅有很少细胞贴壁生长。综上所述,采用组织块培养法能够获得生物学功能稳定的猪小肠上皮细胞系并能正常传11代,可为细胞的永生化提供试验素材。
- 詹康左晓昕陈银银贡笑笑占今舜赵国琦
- 关键词：功能性永生化
- 奶牛乳腺上皮细胞系的培养与鉴定被引量：10
- 2015年
- 本试验旨在培养功能性奶牛乳腺上皮细胞系,为奶牛泌乳调控和奶牛乳房炎发病机制研究提供功能性的细胞模型。采用组织块细胞培养法来分离纯化并鉴定奶牛乳腺上皮细胞;采用有限稀释法单克隆奶牛乳腺上皮细胞;采用噻唑蓝（MTT）法来分析奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线是否为正常的＂S＂形;观察细胞角蛋白18免疫荧光来证明所培养的细胞为上皮型;选择培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞进行染色体核型分析。结果表明：1）利用组织块细胞分离法能够成功获得奶牛乳腺上皮细胞并传至20代。2）培养5~6 d成纤维细胞迅速增殖且周围分裂出少量的上皮细胞。培养8 d奶牛乳腺上皮细胞迅速增殖,形成岛屿状集落,呈单层＂鹅卵石＂和＂铺路石＂形态生长。3）奶牛乳腺上皮细胞角蛋白18鉴定为阳性。4）培养至10和20代的奶牛乳腺上皮细胞染色体数为60条,具有正常的细胞二倍体核型。综上所述,采用组织块培养细胞能够获得具有稳定性、功能性的奶牛乳腺上皮细胞,但不是永生化细胞。
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- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞乳房炎功能性核型分析
- 鸡胚小肠上皮细胞的体外分离培养和鉴定被引量：6
- 2015年
- 本试验旨在提供鸡小肠上皮细胞的体外分离方法,为进一步研究鸡肠道疾病的致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收与免疫机理提供模型。本试验采用组织块培养法来分离培养鸡小肠上皮细胞。运用刮除法、酶消化法、有限稀释法纯化鸡小肠上皮细胞。利用噻唑蓝(MTT)法来鉴定鸡小肠上皮细胞生长情况。通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测鸡小肠上皮细胞特异性基因的表达来鉴定鸡小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块细胞培养法能够成功获得鸡小肠上皮细胞系。2)接种组织块8h内鸡小肠上皮细胞开始大量增殖。3)鸡小肠上皮细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律。4)传至第5代的鸡小肠上皮细胞体积开始变大,细胞形态模糊并开始衰老凋亡;细胞传代时进行接种,大量的细胞未贴壁。综上所述,采用在6孔板内接种鸡小肠组织快,能够获得具有稳定性的鸡小肠上皮细胞,为鸡肠道疾病致病机理、鸡肠道营养物质转运吸收和永生化鸡小肠上皮细胞提供细胞素材。
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- 关键词：稳定性永生化
- 不同培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异被引量：1
- 2015年
- 本试验旨在研究二维和三维培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异。利用组织块培养细胞来分离奶牛乳腺上皮细胞,利用有限稀释法克隆奶牛乳腺上皮细胞。通过显微镜观察细胞在基质胶中的形态,并用Western blot法检测酪蛋白的诱导表达。结果表明:1)采用组织块培养细胞能够成功分离奶牛乳腺上皮细胞,克隆得到的细胞能稳定传至20代。2)细胞接种12h之后,二维培养的奶牛乳腺上皮细胞并没有形成明显的细胞簇,细胞间也没有相互连接;三维培养的奶牛乳腺上皮细胞形成明显的细胞簇,在基质胶内的层黏连蛋白作用下形成交织网状结构。培养2d细胞间交织网状结构逐渐消失,细胞开始形成单个的成细胞簇,使细胞间更加紧密的相连。3)二维培养奶牛乳腺上皮细胞不能诱导表达酪蛋白,但三维培养细胞可诱导表达κ-酪蛋白。综上所述,三维培养奶牛乳腺上皮细胞能够改变细胞的形态和功能,诱导κ-酪蛋白的表达,三维培养的奶牛乳腺上皮细胞可作为奶牛的泌乳机制研究的体外模型。
- 詹康左晓昕贡笑笑陈银银占今舜赵国琦
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白体外模型
- 奶牛乳腺上皮细胞系的培养与鉴定
- 为培养功能性奶牛乳腺上皮细胞系,为奶牛泌乳调控和奶牛乳房炎发病机制研究提供功能性的细胞模型,本试验采用组织块细胞培养法来分离纯化并鉴定奶牛乳腺上皮细胞,利用有限稀释法单克隆奶牛乳腺上皮细胞。运用MTT法来分析奶牛乳腺上皮...
- 詹康贡笑笑左晓昕陈银银占今舜赵国琦
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞乳房炎功能性
- 文献传递
