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应用高分辨熔点曲线分析区分类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型被引量：4: 2010年; 为评价高分辨熔点曲线分析在快速鉴别类猪圆环病毒因子P1和猪圆环病毒2型中的应用。在Cor-bett Rotor-Gene 6000定量PCR仪上,利用EvaGreen荧光染料对靶核苷酸序列进行扩增,建立HRM分析P1和PCV2的工作流程。在优化各种条件基础上,利用HRM分析可区分相差1个碱基的靶序列。因此,HRM分析可为P1和PCV2的分子诊断提供一种新的技术手段。; 温立斌何孔旺杨汉春郭容利钟书霖周俊明李成仁陈梦海; 关键词：猪圆环病毒2型

类圆环病毒因子P1感染对猪外周血T淋巴细胞含量和增殖活性的影响被引量：4: 2009年; 探讨类猪圆环病毒因子P1感染对猪细胞免疫功能的影响。将12头30日龄广西巴马小型猪随机分成试验组和对照组,每组6头。在猪感染P1后第3,8,17,24,31和40天,采用血常规和单色流式细胞术分析猪外周血T淋巴细胞的含量,通过WST法对其增殖活性进行检测。P1感染组的T淋巴细胞数量(绝对数和相对数)整体趋势低于对照组,而两组的T淋巴细胞增殖活性没有显著差别。P1感染对机体的细胞免疫功能有一定程度的影响。; 温立斌何孔旺杨汉春郭容利钟书霖周俊明陈梦海; 关键词：广西巴马小型猪 T淋巴细胞计数

两株猪圆环病毒2型病毒的分离鉴定及其序列分析被引量：1: 2009年; 利用PK15细胞从猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）临床发病与死亡猪中分离到2株病毒；分别命名为Haian（登录号为FJ712216）和Xuancheng（登录号为FJ712215）。利用间接免疫荧光（IFA）和聚合酶链式反应（PCR）对其进行鉴定，并对其全基因组序列进行了测定和分析。结果表明，分离株感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核中，2分离株的基因组全长为1767nt，与世界上其他地区的PCV2分离株密切相关，核苷酸序列同源性达93．7％-97．7％，属于毒力较强的Genotype1。; 郭容利何孔旺钟书霖温立斌潘群兴; 关键词：猪圆环病毒2型

猪感染类猪圆环病毒因子P1后血小板的变化被引量：2: 2009年; 探讨类猪圆环病毒因子P1感染对广西巴马小型猪血小板参数的影响。将12头30日龄的广西巴马小型猪随机、平均分成两组,实验组经腹股沟淋巴结途径接种类猪圆环病毒因子P1的分子克隆。采用自动血液分析仪检测接种后3d、8d、17d、24d、31d及40d猪的外周血血小板参数。统计分析显示猪感染P1后,与对照组相比,实验组的血小板平均体积(MPV)无显著差异,而血小板计数(PLT)和血小板压积(PCT)在接种后8d明显降低,血小板体积分布宽度(PDW)在接种后17d显著降低。; 温立斌何孔旺杨汉春吕立新郭容利周俊明钟书霖; 关键词：广西巴马小型猪

中国猪群存在Torque teno Virus(TTV)感染被引量：9: 2010年; 为了探讨中国猪群TTV的感染现状以及是否存在新的基因亚型，基于TTV1和TTV2相对保守的5’非翻译区（5’UTR）设计引物，采用PCR法对2008～2009年采集于中国江苏省的138份猪血清进行了检测。结果表明，中国猪群，TTV1的感染率为15．9％，TTV2的为34．8％，共感染率为5．8％。所扩增片断的核苷酸序列分析结果表明，中国TTV1和TTV2流行毒株之间的核苷酸同源性分别为87．3％～93．8％和74．8％～99．1％，与GenBank其他TTV1和TTV2毒株的同源性分别为69．6％～100．0％和74．8％～99．1％。系统进化分析结果表明，中国TTV1和TTV2流行毒株存在新的基因亚型。; 温立斌何孔旺杨汉春郭容利李成仁钟书霖茅爱华倪艳秀张雪寒周俊明吕立新俞正玉李彬王小敏

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1被引量：14: 2009年; 该研究旨在建立快速、敏感和特异的检测类猪圆环病毒因子P1的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法,用于P1的早期诊断。以感染P1的猪血清DNA提取物为模板,采用PCR扩增P1 101 bp的基因片段,将其克隆至pMD18-T载体,重组质粒测序并进行同源性分析;以阳性质粒为模板,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测。经测序证实扩增片段属于P1,所建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1的反应在101-108拷贝/μL之间具有良好的线性关系,反应的检出下限为10拷贝/μL,而对猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测为阴性,表明该方法敏感、特异。成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1载量的方法,为P1致病机制和机体免疫保护机制的研究提供了技术平台。; 温立斌何孔旺杨汉春郭容利周俊明钟书霖; 关键词：P1 荧光定量PCR 熔解曲线

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钟书霖