郝天智
- 作品数：16 被引量：51H指数：5
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市应用基础研究项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 核因子-кB靶向性寡核苷酸“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏TNF-α的作用被引量：6
- 2004年
- 目的 探讨NF кB靶向性寡核苷酸 (ODN)“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏TNF α的作用。方法 Wistar大鼠 96只 ,随机分成对照组、创伤性炎症组、“圈套”ODN组和变异“圈套”ODN组。运用凝胶阻滞实验检测创伤性炎症术后肝脏组织NF кB的活性及合成“圈套”ODN的体外竞争抑制试验 ,用RT PCR检测大鼠肝脏组织TNF αmRNA水平 ,ELISA检测大鼠肝脏组织TNF α的蛋白水平。结果 大鼠创伤性炎症术后 3h肝脏NF кB的活性开始升高 ,术后 12h达高峰。肝脏组织TNF αmRNA水平和蛋白水平也明显上升 ,与NF кB的活性改变一致 ,“圈套”ODN在体外能有效地抑制NF кB活性。“圈套”ODN治疗后大鼠肝脏组织TNF α的表达明显下降 ,肝脏功能明显好转 ,而变异“圈套”ODN没有效果。结论 NF кB靶向性“圈套”ODN通过特异性抑制NF кB活性 ,可以有效地抑制创伤性炎症大鼠肝脏炎症介质TNF α的释放 ,从而改善肝脏功能。
- 杨文军梁华平徐祥时德郝天智国华李德卫
- 关键词：创伤性炎症
- 圈套寡核苷酸抑制NIH3T3细胞α2Ⅰ型胶原基因表达的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 研究激活剂蛋白 1(activatorprotein 1,AP 1)圈套寡核苷酸 (decoy oligodeoxynu cleotides,Decoy ODNs)对成纤维细胞α2Ⅰ型胶原表达的影响 ,探讨病理性瘢痕的基因治疗。 方法 设计合成针对AP 1的Decoy ODNs,用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞 ,观察Decoy ODNs在细胞中的分布 ;用凝胶迁移变动分析 (electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)研究Decoy ODNs对AP 1的抑制作用 ,采用RT PCR观察其对细胞胶原合成的影响。 结果 AP 1的Decoy ODNs可在体外竞争抑制核转录因子AP 1的活性 ;阳离子脂质体可以将Decoy ODNs转染进入细胞浆及细胞核从而发挥作用 ;Decoy ODNs作用 2 4h后 ,NIH3T3细胞α2Ⅰ型胶原mRNA的表达明显降低。 结论 Decoy ODNs可以通过拮抗核转录因子AP 1的活性而抑制α2Ⅰ型胶的表达。
- 郝天智梁华平吕凤林徐祥国华王付龙杨文军罗艳李磊
- 关键词：圈套寡核苷酸NIH3T3细胞基因表达成纤维细胞
- 近70%门静脉分支高位结扎对大鼠肝脏结构和功能的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 观察近 70 %门静脉分支高位结扎对大鼠肝脏结构和功能的影响。方法Wistar大鼠 6 0只 ,随机分成假手术对照组和门静脉结扎组。观察术后 0 5、1、2、3、7和 14d肝脏大体结构和血浆转氨酶的变化。用TUNEL法对结扎侧肝细胞凋亡进行定量分析 ,光学显微镜下观察对侧肝细胞的增殖情况 ,透射电子显微镜下观察结扎侧肝脏的超微结构改变。结果 70 %门静脉分支高位结扎后 ,结扎侧肝叶呈进行性萎缩变小 ,对侧则成比例的代偿性增生。在整个观察过程中 ,全肝的总重量维持恒定 ,肝脏功能基本保持正常。TUNEL显示结扎侧肝细胞在术后凋亡明显增加 ,于第2天达高峰 ,同时对侧肝细胞却明显增殖。电子显微镜显示结扎侧肝脏早期出现典型的凋亡改变 ,晚期明显纤维化。结论 近 70 %门静脉分支高位结扎后 ,结扎侧由于肝细胞大量凋亡呈进行性萎缩 ,对侧则成比例的代偿性增生 ,全肝的总重量和肝脏功能保持正常。
- 杨文军梁华平时德徐祥李德卫郝天智
- 关键词：肝脏结构
- AP-1圈套寡核苷酸抑制NIH3T3细胞胶原表达的实验研究
- 增生性瘢痕及瘢痕疙瘩又称病理性瘢痕，是创面过度修复的结果，不仅影响美观，而且常常伴有刺痛、瘙痒等症状以及肢体的运动、功能障碍，严重影响患者的生活质量及身心健康。目前用于治疗病理性瘢痕的方法很多，但治疗效果均不理想。其疗效...
- 郝天智
- 关键词：核转录因子AP-1
- 文献传递
- 创伤患者单核细胞人类白细胞抗原DR的表达及其对感染并发症的预测价值被引量：8
- 2004年
- 目的 探讨创伤患者单核细胞人类白细胞抗原 DR(HL A DR)抗原分子的表达变化规律 ,及其对伤后感染并发症的预测价值。方法 应用流式细胞仪连续监测 5 4例创伤患者伤后单核细胞 HL A DR抗原分子的表达 ,并根据创伤严重程度分组进行分析。另对 34例严重创伤患者 ,根据其感染发生与否及严重程度分组进行分析。结果 创伤患者伤后单核细胞表达 HL A DR的阳性细胞率和平均荧光强度均出现降低 ,以伤后 2 d达到低谷 ,之后逐渐恢复 ;与健康对照相比 ,中度和重度创伤患者单核细胞 HL A DR抗原分子出现明显的低表达 ;轻度创伤患者与健康对照相比 ,重度与中度创伤患者相比 ,HL A DR的表达变化均无明显的差异。另外 ,严重创伤患者单核细胞 HL A DR的表达变化与感染并发症发生与否及严重程度有明显的相关性 ;非感染患者伤后 2 d单核细胞 HL A DR的表达降到最低 ,随后逐渐恢复正常 ;局部感染患者伤后前 4 d单核细胞 HL A DR的表达明显低于非感染患者 ,6 d后逐渐恢复正常 ;并发全身感染患者 ,伤后单核细胞 HL A DR的表达阳性细胞率于伤后 1～ 14 d,平均荧光强度于伤后 2～ 14 d均明显低于局部感染患者。死亡的 2例患者 ,单核细胞 HL A DR的表达持续低下直至死亡。结论 严重创伤患者单核细胞 HL A DR分子表达量明显降?
- 胡承香徐祥梁华平吕凤林沈利群郝天智
- 关键词：创伤HLA-DR感染并发症
- NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸抑制肾小球系膜细胞IL-6的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 设计合成靶向NF κB的哑铃形“圈套”ODNs ,并检测其对NF κB转录活性和肾小球系膜细胞IL 6表达的抑制效应。方法 采用电泳迁移率改变实验 (EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF κB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞 ,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将 2、4、8mg L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞 ,6h后用LPS刺激 ,收集转染后 8、12、18h上清和细胞。用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测上清IL 6蛋白表达 ,逆转录PCR(RT PCR)法检测IL 6mR NA转录。结果 哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF κB与其顺式元件的结合 ;4、8mg L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞IL 6转录和表达。结论 靶向NF κB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF κB的转录活性 ,从而对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子IL
- 张建国王惠民国华郝天智杨文军
- 关键词：NF-ΚB白细胞介素6
- NF-κB靶向性哑铃形"圈套"寡核苷酸对肾小球系膜细胞TNF-α的表达抑制作用的研究
- 2004年
- 目的:本实验设计合成靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对肾小球系膜细胞TNF-α表达的抑制效应。方法:以NF-κB顺式作用元件κB序列为模板,设计包含两个拷贝的κB序列,长度为58个碱基的环状IDNs,合成后部分序列做FAM标记,行转染效率鉴定实验。提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4、8 mg／L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6h后用LPS刺激,收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清TNF-α蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测TNF-αmRNA转录。结果:阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转染入肾小球系膜细胞;4、8mg／L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α转录和表达。结论:靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TNF-α的表达具有抑制效应。
- 张建国王惠民国华郝天智杨文军
- 关键词：肾小球系膜细胞ODNTNF-Α转染
- 核因子-κB靶向性寡核苷酸“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏损伤的作用被引量：14
- 2003年
- 目的 探讨核因子 κB(NF κB)靶向性寡核苷酸 (ODN )“圈套”策略对创伤性炎症大鼠肝脏损伤的作用。方法 Wistar大鼠 96只 ,随机分成对照组、创伤性炎症组、“圈套”ODN组和变异“圈套”ODN组 ,各组动物分别于术后 3、6、12、2 4、48和 72h分批处死。运用凝胶迁移变动分析 (EMSA)检测创伤性炎症术后肝脏组织NF κB的活性及合成“圈套”ODN的体外竞争抑制试验。检测血清转氨酶水平 ,在光镜下观察肝细胞损伤程度 ,电镜下观察肝脏超微结构改变 ,以线粒体的肿胀程度作为肝细胞损伤的评价指标。结果 创伤性炎症后 3h肝脏NF κB的活性开始升高 ,12h达高峰 ,72h后基本恢复正常。“圈套”ODN在体外能有效地抑制NF κB活性。血清ALT含量在伤后明显上升 ,于 2 4h达高峰 ,肝细胞出现明显的水肿、变性和坏死 ,肝小叶结构破坏明显。“圈套”ODN治疗 6h后 ,大鼠血清ALT水平明显降低 ,肝小叶结构损伤明显好转 ,线粒体的肿胀明显减轻。结论 NF κB靶向性“圈套”ODN通过特异性抑制NF κB活性 。
- 杨文军梁华平徐祥李德卫时德郝天智
- 关键词：创伤性炎症核因子-ΚB肝脏损伤
- NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对肾小球系膜细胞细胞因子表达的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 设计合成靶向 NF-κB的哑铃形圈套 ODNs,并检测其对 NF-κB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子 (IL - 6和 TGF-β1)表达的抑制效应。方法 采用电泳迁移率改变实验 (EMSA)体外检测哑铃形圈套 ODNs对 NF-κB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞 ,随机分为正常对照组、L PS刺激组、哑铃形圈套 ODNs处理组、无关圈套 ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将 2、4、8mg/ L 不同剂量哑铃形圈套 ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞 ,6 h后用 L PS刺激 ,收集转染后 8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)法检测上清细胞因子蛋白表达 ,逆转录 PCR(RT- PCR)法检测细胞因子 m RNA转录。结果 哑铃形圈套 ODNs在体外能有效地抑制 NF-κB与其顺式元件的结合 ;4、8mg/ L剂量哑铃形圈套 ODNs可明显抑制 L PS诱导的大鼠肾小球系膜细胞 IL - 6和 TGF-β1 转录与表达。结论 靶向 NF- κB的哑铃形圈套 ODNs在体外可抑制 NF- κB的转录活性 。
- 张建国王惠民国华郝天智杨文军
- 关键词：细胞因子
- 圈套寡核苷酸影响腹腔巨噬细胞炎症介质表达的实验研究被引量：3
- 2003年
- 目的 设计合成靶向核因子 -κB(NF -κB)的哑铃形圈套寡核苷酸 (ODNs) ,并检测其抗炎效应。 方法 提取大鼠腹腔巨噬细胞 (pMΦ) ,随机分为正常对照组、单纯内毒素 (LPS)组、圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。收集正常对照组和单纯LPS组LPS刺激后 1,2 ,6 ,12 ,18,2 4h上清及细胞 ;采用阳离子脂质体按质量比为 4∶1的比例分别介导 2 ,4,8mg L圈套ODNs转染大鼠pMΦ细胞 ,6h后用LPS刺激 ,收集转染后 8,12 ,18h上清及细胞。细胞免疫组化法分析LPS刺激前后p6 5表达与分布变化 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测上清中肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )蛋白表达 ,逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)法检测TNF -α、IL - 6和IL - 10mRNA转录。 结果 4,8mg L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠pMΦTNF -α、IL - 6转录和表达。 结论 靶向NF -κB的哑铃形圈套ODNs具有拮抗炎症介质转录和表达的功能。
- 国华梁华平吕凤林徐祥郝天智王付龙杨文军
- 关键词：炎症基因治疗核因子-ΚB圈套寡核苷酸巨噬细胞
