蒋伟
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 供职机构：深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学化学工程更多>>
- α1-抗胰蛋白酶对Ⅱ型糖尿病的药效学研究
- 2018年
- 目的通过建模研究α1-抗胰蛋白酶(AAT)治疗糖尿病的动物药效学。方法将大鼠造成Ⅱ型糖尿病模型,选择血糖值在15~30 mmol/L者用于实验组,AAT分为高(11.5 mg/kg)、低(5.75 mg/kg)两个剂量组,盐酸二甲双胍缓释片做阳性对照。测定血清血糖(GLU)、肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),并进行病理组织学检测。结果与模型组比较,二甲双胍组、AAT低剂量组、AAT高剂量组中GLU均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);TP在二甲双胍组、AAT低剂量组有升高趋势,在AAT高剂量组有降低趋势;三个受试药组TC明显降低;TG在二甲双胍组有升高趋势,在AAT低、高剂量组中均明显降低(P<0.05)。结论 AAT对Ⅱ型糖尿病大鼠模型有明显的降糖、降脂作用,AAT低剂量对TP有升高的趋势,可改善实验动物肾脏和胰腺内胰岛形态的作用。
- 陈献雄张英蒋伟张利王妍
- 关键词：Α1-抗胰蛋白酶血糖
- 大规模细胞培养技术与公共技术服务平台实验室建设浅谈被引量：2
- 2017年
- 我国动物细胞大规模培养技术较发达国家明显落后,难以满足具有重要医用价值生物制品的规模生产需求,深圳市大规模细胞培养技术和细胞资源库公共技术服务平台的建设在一定程度上推进了本行业发展。本文围绕平台建设中实验室的设计、细胞管理和鉴定、微生物污染检测、对外服务机制和网站建设等几个主要方面工作展开探讨。
- 喇文军蒋伟王妍
- 关键词：动物细胞
- 人α1抗胰蛋白酶的分离纯化及其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响
- 2020年
- 目的分离纯化α1抗胰蛋白酶(alpha 1-antitrypsin,AAT),并评价其对C-BSA型大鼠肾炎模型的影响。方法以Cohn组分Ⅳ(Cohn frcationⅣ,FⅣ)为原料,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和S-200凝胶过滤柱层析纯化AAT,底物显色法检测其生物学活性。建立阳离子化小牛血清蛋白型大鼠肾炎模型,分别注射5.75和11.5 mg/kg的AAT,同时设正常组(未建模),隔日经大鼠腹腔注射给药1次,连续注射4周,模型组和正常组注射等体积的PBS。检测各组大鼠的尿常规及24 h尿液总蛋白量,并对肾脏组织进行病理学检查,同时检测肾脏中IgG沉积及AAT、Desmin、Nephrin、Podocin的表达情况。结果纯化的AAT纯度为96%,浓度为11.85 mg/mL,活性回收率为47.67%,比活为5.37。与模型组比较,高剂量AAT组大鼠24 h尿蛋白量明显降低(P<0.05),尿常规部分指标有所改善,肾小球体积增大程度有所减轻;高、低剂量AAT组大鼠肾小球IgG沉积均略减少(P>0.05),肾小球与肾小管AAT阳性表达量明显增加(P<0.001),肾小球Desmin蛋白有减轻趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);高剂量AAT组大鼠肾小球Nephrin及Podocin蛋白均明显增多(P<0.05),低剂量AAT组略有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论本纯化工艺可获得纯度较高的AAT,其对大鼠肾炎具有一定提高疗效的作用。
- 孙兆健蒋伟张英田建明王妍
- 关键词：Α1抗胰蛋白酶分离纯化肾炎
- rhNGF滴眼液与α1-AT注射液联合应用对糖尿病视网膜病变模型大鼠的治疗作用及机制的研究
- 2021年
- 目的:通过动物体内法评价重组人神经细胞生长因子(rhNGF)滴眼液与α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)注射液联合使用对糖尿病眼病模型大鼠的治疗作用及作用机制的研究;方法:制备大鼠糖尿病眼病模型,将成模的大鼠随机分5组——模型组、盐酸二甲双胍片组、rhNGF滴眼液组、rhNGF滴眼液+α1-AT注射液组、盐酸二甲双胍片+α1-AT注射液组,另设一正常对照组.每日给药1次,连续给药5周,给药结束后检测相关的血清生化指标、细胞因子、组织蛋白水平的变化及相关脏器的病理组织学检查;结果:rhNGF滴眼液组、rhNGF滴眼液+α1-AT注射液组对糖尿病眼病模型大鼠血清指标TNF-α、AngⅡ和视网膜的AGE、RAGE及其免疫调控因子P物质、ICAM-1、CD80等有一定的改善作用,但以rhNGF和α1-AT组合物组改善作用更显著.
- 蒋伟王妍田建明宋莲莲韦康章蓉
- 关键词：糖尿病视网膜病变血清生化指标
- 重组人神经生长因子真核表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达与纯化
- 2018年
- 研究构建了重组人神经生长因子(Recombinant human nerve growth factor,rhNGF)的一种真核表达载体,并转化毕赤酵母GS115.在h NGF基因序列基础上对其进行毕赤酵母偏好密码子分析与改造,然后构建重组质粒p PIC9K-h NGF,经PCR、酶切及测序验证后,转化酵母,利用遗传霉素筛选出高效表达rhNGF的重组酵母.表达产物经SDS-PAGE分析,结果见一条与h NGF分子质量15.7kDa相当的条带,蛋白表达量约为52.86%.将表达产物经初步纯化和进一步精提后,纯度超过98%.分别以鼠NGF产品和人NGF标准品为对照,利用TF-1细胞/MTS比色法检测NGF活性,结果表明rh NGF具有良好的生物学活性,其活性和比活性分别为5.0U/m L和253U/mg,高于鼠NGF产品(2.6 U/mL,130U/mg),与hNGF标准品相当(5.0 U/mL,250 U/mg).
- 黄志立蒋伟周烨沈丽王妍
- 关键词：人神经生长因子真核载体毕赤酵母生物活性
- 不同培养基对皮肤来源的成纤维细胞增殖、衰老及胶原蛋白分泌的影响被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨不同培养基组成对皮肤成纤维细胞的增殖、衰老及胶原蛋白分泌的影响。方法:采用两步酶消化法从健康人耳后皮肤中获得成纤维细胞,依据培养基种类不同分为A组(FM无血清培养基)、B组(DMEM+10%FBS)、C组(RPMI-1640+10%FBS)、D组(DMEM+F12(1∶1)+10%FBS),采用MTT法、细胞划痕实验、酶联免疫吸附实验、β-半乳糖苷酶试验、软琼脂克隆形成试验比较不同培养基对细胞增殖、迁移、胶原分泌、老化、变异的影响。结果:采用酶消化法在2d^4d内即可从组织块中获得大量成纤维细胞;其中B、D组较A、C组细胞增殖较快,且趋势与MTT细胞增殖相同;划痕实验显示B、D组较A、C组向缺损部位迁移更为明显;此外,D组胶原蛋白分泌量高于其余三组(P<0.05),且连续传代30次后,细胞无明显衰老及瘤变迹象。结论:两步酶消化法可快速高效的从人组织块中获得成纤维细胞,且采用DMEM+F12(1∶1)完全培养基有利于促进细胞增殖、分泌胶原蛋白及延缓细胞衰老。
- 喇文军林孝发蒋伟王妍尹卫民林嘉欢林峰
- 关键词：成纤维细胞培养基胶原蛋白细胞增殖原代培养
- 重组人神经生长因子在大肠埃希菌中的表达及活性测定被引量：1
- 2018年
- 目的在大肠埃希菌中表达重组人神经生长因子(recombinant human nerve growth factor,rhNGF),并检测其活性。方法通过密码子优化,设计表达rhNGF的基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-hNGF,转化大肠埃希菌BL21pLyS(DE3)中,IPTG诱导表达。表达的蛋白经层析纯化后,SDS-PAGE及HPLC法检测纯度,Lowry法检测蛋白浓度,TF-1细胞增殖法检测生物学活性。结果构建了融合表达rhNGF的大肠埃希菌表达系统,表达的3批外源蛋白纯化后纯度均达到100%,比活分别为5.5×10~5、6.8×10~5和7.4×10~5 IU/mg,均高于小鼠颌下腺提取的NGF标准品。结论成功表达了rhNGF,纯化后纯度高,比活强,为规模化生产hNGF提供了参考。
- 沈丽黄志立蒋伟林钰琼王妍
- 关键词：神经生长因子大肠埃希菌活性
- 重组人干扰素α1b含片对大鼠免疫功能的调节作用被引量：2
- 2019年
- 目的探讨重组人干扰素α1b(recombinant human interferonα1b,rhIFNα1b)含片对大鼠免疫功能的调节作用。方法将大鼠按体重随机分为模型组(空白基质片干粉)、阳性对照组(匹多莫德)及rhIFNα1b含片低(1 000 IU/片)、中(10 000 IU/片)、高(50 000 IU/片)剂量组,每组14只,给予相应药物,每日1次,连续给药3周,于首次给药第7、9天经腹腔注射环磷酰胺,60 mg/kg,同时设正常对照组(10只),末次给药8 h后开始禁食,24 h后称量大鼠体重,计算胸腺及脾脏系数,检测血清及脾脏细胞中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IFNα水平,同时检测血清、唾液中IgG及IgA水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠体重及胸腺系数均明显降低(P <0. 05),血清中IL-2、IL-4、TNF-α、IFNα、IgG及IgA水平均明显下降(P <0. 01),脾脏中IL-4、TNF-α及IFNα水平均明显下降(P <0. 01),唾液中IgG及IgA水平均明显下降(P <0.01)。与模型组比较,各剂量rhIFNα1b含片组大鼠的体重、胸腺及脾脏系数差异均无统计学意义(P> 0. 05);血清及脾脏中IL-2、IL-4、TNF-α及IFNα水平有不同程度的升高;血液及唾液中IgA水平明显升高(P <0. 05)。结论中、高剂量的rhIFNα1b含片对大鼠免疫功能具有明显的改善作用。
- 何利思蒋伟韦康田建明王妍
- 关键词：重组人干扰素Α1B含片免疫功能环磷酰胺白细胞介素肿瘤坏死因子
- 聚乙二醇修饰重组人粒细胞集落刺激因子的生物学活性验证
- 2018年
- 通过细胞集落实验和体外活性实验,对聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的体外生物学活性进行对照验证,为临床应用提供理论依据.通过小鼠骨髓瘤细胞集落实验研究PEG修饰前后rhG-CSF因子对细胞集落形成的影响;按照药典(2015版)标准,采用新型染剂CCK-8、MTS和原染剂MTT,对PEG-rhG-CSF和rhG-CSF进行体外生物学活性的测定.结果显示,PEG-rhG-CSF对小鼠骨髓瘤细胞集落形成的作用明显强于rhG-CSF(P<0.05),集落数目多(38.5±4.2个),集落大且密集;新型染剂CCK-8在体外生物学活性的测定效果最好,R^2超过0.995,曲线拟合更好,在最适体外生物活性范围内(0.1~400 IU·mL^(-1)),PEG-rhG-CSF吸光度值(0.75±0.027)明显高于rhG-CSF(0.36±0.036).聚乙二醇修饰在体外药效方面显示了更强的长效特征,对体外生物学活性有增强效应,重复性良好,回收率较高.
- 蒋伟张静李欢欢王妍
- 关键词：聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性
- 高职院校园林类专业创新型技能人才分层培养模式的探索——以深圳职业技术学院为例
- 2022年
- 为了满足行业企业对不同层次技能人才特别是高端创新型技能人才的需求,深圳职业技术学院风景园林设计专业基于广泛的市场调研并经过不断的实践探索,构建了园林类专业“1+3”创新型技能人才分层培养模式,即采用“校内课程模块+实际工程项目训练、职业技能大赛集训和实战、顶岗实习就岗就业等3种培养途径”模式分“普才”“专才”“优才”“精英”4个层级对学生进行分层培养。同时,在实施“1+3”创新型技能人才分层培养模式的过程中,同步进行了专业教学改革,为培养园林领域的专项技术能手和技能精英提供了强有力的保障。一是内化行业标准,建设项目化课程,强化校内课程对学生基础能力的培养;二是依托实际工程项目开展实战教学,加强学生综合素质的培养;三是重视对技能大赛的指导,以赛促学,以赛带训,促进学生专业技能的不断提高;四是提供具有针对性的顶岗实习机会,落实“就岗就业”,加强学生就业适应能力的锻炼。经过几年的实践,“1+3”创新型技能人才分层培养模式的实施取得了一定的成效:一是丰富了高职院校园林类专业人才培养的理论和实践;二是为高职院校与园林行业企业的合作提供了新思路;三是促进了高职院校园林类专业人才培养质量的提升,学生的专业技能水平显著提高,屡获各类技能大赛奖项,学习积极性和主动性得到激发,专业认同感显著提升,毕业生的就业率稳中有升、就业满意度逐年提高;四是增强了高职院校园林类专业的影响力。
- 方长发谢利娟刘学军蒋伟苏琳娜
- 关键词：高职院校园林类专业
