王旋
- 作品数：2 被引量：23H指数：2
- 供职机构：黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省海外学人科研资助项目黑龙江省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 高产紫杉醇菌株的诱变选育及其差异表达基因消减cDNA文库的构建被引量：7
- 2011年
- 【目的】选育高产紫杉醇菌株,并构建选育到的高产紫杉醇菌株与出发菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【方法】分别采用硫酸二乙酯和紫外线与硫酸二乙酯复合诱变处理菌株HD1-3孢子;以选育到的高产紫杉醇菌株为tester,菌株HD1-3为driver,应用抑制性消减杂交技术构建选育到的高产紫杉醇菌株与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【结果】试验确定的Nodulisporium sylviforme紫杉醇产生菌HD1-3孢子复合诱变的适宜条件为:将106 cfu/mL孢子悬液经过8%硫酸二乙酯处理15 min后,在电磁搅拌下,用紫外灯(30 w,距离30 cm)照射处理45 s,获得了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇的突变株——UD14-11,其紫杉醇产量从出发菌株HD1-3的232.73±4.61μg/L提高至312.81±7.51μg/L;构建的文库滴度为1.2×107 cfu/mL,阳性克隆率75.3%,片段大小主要集中在300 bp-1.0 kb。【结论】选育到了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇突变株;成功地构建了高产紫杉醇菌株UD14-11与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库,为寻找、分离微生物生物合成紫杉醇相关基因和利用基因工程或代谢工程手段定向设计改造菌株奠定基础。
- 赵凯孙立新王旋李秀凉王歆周东坡
- 关键词：紫杉醇内生真菌诱变育种抑制性消减杂交CDNA文库
- NTG和UV复合诱变选育紫杉醇高产菌株的研究被引量：16
- 2008年
- 对紫杉醇产生菌HD1-3的孢子分别进行了紫外线照射(UV)、亚硝基胍(NTG)和UV+NTG复合诱变处理,筛选制霉菌素抗性突变株。试验所确定的Nodulisporium sylviforme紫杉醇产生菌HD1-3孢子诱变的适宜条件为:将孢子悬液经过3.0mg·mL-1 NTG、处理20min后,在电磁搅拌下,用紫外灯(30w,距离30cm)照射处理45s。共筛选出17株正突变株。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产紫杉醇的诱变菌株——UN25-3,其紫杉醇产量从出发菌株的(232.73±4.61)μg·L-1提高至(327.14±7.63)μg·L-1。
- 赵凯王颖王旋孙宇石平文祥周东坡
- 关键词：紫杉醇内生真菌诱变
