李长岭
- 作品数：11 被引量：16H指数：3
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- 二甲双胍对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞增殖的抑制作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的:研究二甲双胍对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞生长的影响,初步探讨二甲双胍抑制Dami细胞增殖的分子机制。方法:将培养的Dami细胞分为空白对照组,1、2、4、8、16和32mmol·L-1二甲双胍处理组;MTT法检测不同浓度二甲双胍作用后Dami细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫印迹分析Cdc2和Cyclin B1蛋白的表达以及Cdc2蛋白的磷酸化修饰。结果:MTT检测,与空白对照组比较,32mmol·L-1二甲双胍处理组0、24、48、72和96h Dami细胞增殖抑制率明显升高[(35.1±2.3)%、(49.7±5.1)%、(78.8±0.9)%、(79.1±3.0)%和(85.2±3.2)%](P<0.01);在二甲双胍处理72h后,1、2、4、8、16和32 mmol·L-1处理组Dami细胞增殖抑制率分别为(33.8±1.3)%、(51.9±2.2)%、(59.4±1.6)%、(65.5±2.0)%、(75.5±0.9%)和(79.1±3.0)%,二甲双胍对Dami细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性。流式细胞术检测,与空白对照组比较,1、2和4mmol·L-1二甲双胍处理组G2/M期细胞比例从(26.0±0.5)%升高至(38.5±1.5)%、(48.4±1.1)%和(58.2±2.7)%,4mmol·L-1二甲双胍处理组G2/M期细胞比例明显高于对照组(P<0.01)。免疫印迹分析,与空白对照组比较,4mmol·L-1二甲双胍处理组Cdc2和Cyclin B1的表达水平明显下降,Cdc2在Try15位点磷酸化明显上调,而在Thr161位点的磷酸化明显下调。结论:二甲双胍能抑制Dami细胞增殖并诱导其发生G2/M期阻滞,其机制可能与Cdc2/Cyclin B1复合物的活化受到抑制有关。
- 李长岭蔺迪邢思宁赵松陈惠鹏周凡马东初
- 关键词：二甲双胍细胞周期
- CIK输注治疗增强肿瘤患者CD3~+/CD56~+前体细胞增殖分化潜能
- 研究背景:作为国家首批准入的第3类医疗技术,在CIK细胞治疗技术应用过程中存在着一些制约其进一步良性发展的问题,其核心是尚未确定评价CIK细胞治疗临床疗效的明确生物学标志物及相关检测手段。目的:探讨自体CIK细胞输注治疗...
- 于卉影孙英慧蔺迪李长岭陈伟马东初
- 关键词：细胞因子诱导杀伤细胞增殖免疫细胞治疗
- 文献传递
- 自体CIK治疗技术细胞制品制备面临的问题与持续改进的思考被引量：4
- 2013年
- 细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)过继免疫细胞治疗技术已经成为肿瘤治疗的重要手段之一。在我国该技术已经进行临床应用,部分省份已经将其纳入医疗保险。然而,该技术在一些方面存在着很多问题,亟待改进。本文主要讨论了在cGMP生产设施设计、建设和管理,CIK制备质量控制和无菌试验等三方面存在的问题,并提出改进意见。
- 马东初于卉影陈伟李长岭
- 蛋白激酶A抑制剂H-89通过调节核糖体蛋白S6激酶1的磷酸化阻断SP600125诱导的CMK细胞多倍体化被引量：1
- 2016年
- 目的研究核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)翻译后修饰在巨核细胞倍体化调控方面的作用。方法 c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89单独或联合处理CMK原始巨核细胞白血病细胞。碘化丙啶(PI)染色,结合流式细胞术检测DNA的相对量,从而进行DNA倍体分析;Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)下游靶分子S6K1表达和磷酸化修饰(Thr389和Thr421/Ser424)的变化。使用分子对接和激酶活性检测分析H-89与S6K1结合的关系以及对激酶活性的影响。结果 SP600125以时间和剂量依赖的方式诱导CMK细胞多倍体化,同时,上调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和下调Thr389的磷酸化。H-89不但部分阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化,而且下调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化。分子对接和激酶活性分析发现H-89通过占据ATP结合位点,抑制S6K1活性。值得注意的是,H-89和SP600125均抑制PKA的活性,而且两者联合进一步抑制了PKA的活性,表明H-89阻断SP600125诱导CMK多倍体化与其对PKA的作用无关,而与S6K1磷酸化修饰状态的改变有关。结论 H-89通过调节S6K1磷酸化阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化。
- 赵松杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕蒲菲菲马东初
- 关键词：巨核细胞
- 核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度被引量：3
- 2016年
- 目的探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用。方法采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激酶A抑制剂H-89阻断SP600125药物作用,流式细胞术分析表型(CD41a、CD42a和CD42b)和DNA倍性,Western blot法检测S6K1相关蛋白的表达及磷酸化修饰位点的变化。结果 SP600125诱导多倍体化和真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)磷酸化。然而,SP600125诱导多倍体化的程度不同,对Dami细胞作用最强、HEL细胞次之、Meg-01细胞最弱。而且SP600125上调Dami细胞的S6K1Thr421/Ser424磷酸化并下调Thr389磷酸化,仅上调HEL细胞的Thr389磷酸化,对Meg-01细胞的S6K1无影响。虽然H-89下调SP600125诱导的3种细胞系中4E-BP1磷酸化,但只部分阻断Dami细胞多倍体化及下调S6K1 Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化。尽管H-89上调Meg-01细胞和HEL细胞的S6K1 Thr389磷酸化,但其对Thr421/Ser424磷酸化无影响,而且也不能阻断两者的多倍体化。表型分析显示3种细胞系处于不同的分化水平,即Dami细胞最高、HEL细胞次之、Meg-01细胞最低。结论SP600125诱导巨核细胞白血病细胞系的多倍体化依赖于不同分化程度的细胞系内S6K1对SP600125诱导磷酸化修饰的应答。
- 王丽丽杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕赵松马东初
- 关键词：巨核细胞
- 肿瘤患者自体CIK细胞输注增强再次制备时CD3^+CD56^+细胞的体外扩增能力被引量：6
- 2014年
- 目的探讨自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)输注治疗对再次制备CIK细胞亚群的构成和活性的影响。方法选取经2个疗程CIK细胞治疗的患者201例,分为CIK治疗后90 d内(含90 d)制备检测组和大于90 d制备检测组。台盼蓝拒染法检测细胞增殖;流式细胞术分析CD3、CD4、CD8,CD56和NKG2D受体表达情况的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果 CIK细胞输注治疗后90 d内再次制备CIK细胞的CD3+CD56+细胞百分率(16.7±9.1)%,与CIK细胞输注治疗前相比(13.5±8.6)%,显著增加(P<0.01),而且,表面受体NKG2D表达水平((84.1±10.8)%,也比CIK细胞输注治疗前明显增高((81.1±14.8)%)(P<0.05)。与此相反,CIK细胞输注治疗后导致再次制备时,CIK细胞群体中CD3+CD4+百分率(15.2±9.7)%,与CIK输注治疗前(17.6±12.5)%相比,显著下降(P<0.01)。值得注意的是,CIK细胞输注治疗后超过90 d再次制备CIK细胞的CD3+CD56+细胞分布和NKG2D受体表达,与CIK细胞输注治疗前相比均无明显变化,但CIK细胞输注治疗后仍可导致再次制备时,CIK细胞群体中CD3+CD4+百分率(14.5±9.4)%,与CIK细胞输注治疗前相比(18.2±12.9)%,明显下降(P<0.01)。另外,2组再次制备CIK细胞的总数和体外细胞杀伤活性无明显差异。结论 CIK细胞输注治疗有助于提高肿瘤患者CD3+CD56+细胞前体细胞,在相同CIK细胞培养制备体系中增殖、定向分化和活化的能力,该作用持续时间不超过90 d,因此,CIK细胞治疗疗程间隔时间不应超过90 d。
- 于卉影孙英慧蔺迪李长岭陈伟马东初
- 关键词：细胞因子诱导杀伤细胞增殖免疫细胞治疗
- CIK输注治疗增强肿瘤患者CD3+/CD56+前体细胞增殖分化潜能
- 研究背景:作为国家首批准人的第3类医疗技术,在CIK细胞治疗技术应用过程中存在着一些制约其进一步良性发展的问题,其核心是尚未确定评价CIK细胞治疗临床疗效的明确生物学标志物及相关检测手段.目的:探讨自体CIK细胞输注治疗...
- 于卉影孙英慧蔺迪李长岭陈伟马东初
- 关键词：细胞因子诱导杀伤细胞增殖免疫细胞治疗
- 核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度
- 目的探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用。方法采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激酶A...
- 王丽丽杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕赵松马东初
- 关键词：巨核细胞
- 自体CIK治疗技术细胞制品制备面临问题与持续改进的思考
- K过继免疫细胞治疗技术已经成为肿瘤治疗的重要手段之一.在我国该技术已经进行临床应用,部分省份已经将其纳入医疗保险.然而,该技术的一些方面,存在很多亟待改进的问题.本文主要讨论了在cGMP生产设施设计、建设和管理,CIK制...
- 马东初于卉影陈伟李长岭
- 关键词：无菌试验
- 核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度
- 目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用。方法 采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激...
- 王丽丽杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕赵松马东初
- 关键词：巨核细胞
- 文献传递
