李健
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：复旦大学附属儿科医院临床检验中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 急性肺损伤患者诱导性多能干细胞系的建立被引量：1
- 2014年
- 目的利用急性肺损伤患者皮肤成纤维细胞构建诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)系。方法采用慢病毒介导逆转录的方法,将含有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog四个因子的混合慢病毒转染人皮肤成纤维细胞,诱导出胚胎干细胞样克隆。根据人胚胎干细胞的特性,利用AP染色、实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术、免疫荧光、畸胎瘤形成实验对获得的iPS细胞进行鉴定。结果获得的iPS细胞镜下观察呈典型的ES样克隆状生长,圆形或椭圆形,与饲养层细胞分界清楚;AP染色阳性,RT-PCR及免疫荧光检测iPS细胞高表达人胚胎干细胞标志性基因及蛋白,移植到免疫缺陷鼠体内能够形成向三胚层分化的畸胎瘤。结论成功建立了急性肺损伤患者iPS细胞系,可为急性肺损伤的发病机制研究和临床药物筛选提供良好的细胞模型。
- 丁桃李阳唐睿珠张旋云雨李健王殿华
- 关键词：急性肺损伤皮肤成纤维细胞诱导性多能干细胞
- 内毒素血症大鼠心肌组织miRNA差异表达被引量：6
- 2015年
- 目的分析内毒素又称脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)血症大鼠心肌组织mi RNA表达谱变化,探讨mi RNA在内毒素血症心肌损伤中的作用。方法 20只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)和LPS组(n=10)。LPS组腹腔注射LPS 10 mg/kg,对照组腹腔注射等量生理盐水。24 h后颈脱臼处死大鼠,取心肌组织。Real-time PCR检测TLR4、TNF-α、IL-1β表达水平,透射电镜观察其超微结构变化。mi RNA芯片筛选心肌组织中差异表达的mi RNA,Real-time PCR验证候选mi RNA实际表达水平。结果LPS组大鼠心肌组织TLR4、TNF-α、IL-1β表达明显升高,心肌细胞发生胞质空泡,线粒体水肿、结构破坏等超微结构改变。芯片技术及Real-time PCR证实LPS组大鼠心肌组织中mi R-194-3p,mi R-344a-3p,mi R-465-3p,mi R-501-5p,mi R-3596c,mi R-185-3p,mi R-877显著上调,mi R-208b-3p,mi R-547-3p,mi R-141-3p,mi R-28-5p,mi R-3585-5p显著下调。结论内毒素血症大鼠心肌组织中发现的这些差异表达mi RNA可能与其心肌损伤发生有关。
- 丁桃李阳唐睿珠张旋云雨李健王殿华
- 关键词：内毒素血症脂多糖心肌损伤MIRNA基因表达谱
