张凌燕
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 甘蔗花叶病毒E株系外壳蛋白基因原核表达载体的构建与表达(英文)被引量：3
- 2006年
- 目的:用原核表达的方法获取大量带6个His标记的甘蔗花叶病毒E株系(ScMV-E)外壳蛋白(CP)。方法:用带有BamHⅠ和SalⅠ酶切位点的特异引物,以带有多个基因的重组质粒pNUSCP为模板,扩增出片段长度为942bp的ScMV-E外壳蛋白基因,亚克隆到pMD18-T载体上,转化E.coliDH5α,经双酶切检测获得阳性克隆。BamHⅠ和SalⅠ双酶切阳性克隆质粒,回收目的片段ScMV-E的CP基因。把目的片段插入表达载体pET29a(+),转化E.coliBL21(DE3),测序。结果:阳性质粒pET29a-CP在E.coliBL21(DE3)中得到大量特异表达。SDS-PAGE分析表明,该蛋白的相对分子质量约36000,与预测一致。结论:以上方法可以得到带6个His标记的目的蛋白,有利于纯化并获取高纯度的ScMV-E的外壳蛋白。
- 江克清阙友雄许莉萍张凌燕
- 关键词：甘蔗花叶病毒外壳蛋白基因原核表达
