公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

白蜡虫ws基因RNAi载体构建及原核表达dsRNA被引量：3: 2018年; [目的]构建白蜡虫(Ericerus pela)蜡酯合酶(wax synthase,WS)基因干扰载体并建立其体外dsRNA(doublestranded RNA,dsRNA)原核表达体系,低成本大量制备白蜡虫ws基因的dsRNA。[方法]克隆白蜡虫蜡酯合酶基因ws片段,连入L4440载体,将重组质粒转入大肠杆菌HT115感受态细胞,经IPTG诱导获得与目的片段相对应的dsRNA。[结果]白蜡虫ws基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体成功构建,重组质粒转入HT115感受态细胞经IPTG诱导后菌体成功表达dsRNA,dsRNA的平均获得量1 705 ng·m L^(-1)。[结论]该研究通过原核表达白蜡虫ws基因的dsRNA,为后续利用RNAi实验研究白蜡虫ws基因功能及作用机理奠定基础。; 王雪庆赵遵岭孙涛陈晓鸣杨璞; 关键词：白蜡虫原核表达 DSRNA

白蜡虫蜡酯合酶基因cDNA全长克隆及原核表达被引量：1: 2016年; 白蜡虫（Ericerus pela）是我国特有的资源昆虫,泌蜡是白蜡虫二龄雄虫最为特化的性状[1]。白蜡虫分泌的白蜡在食品、医药、纺织等行业具有重要的经济价值[2]。白蜡的主要成分是26酸26酯[3],已有研究表明,蜡酯的生物合成在动植物中存在保守途径[4]。蜡酯生物合成的第一步由脂酰辅酶A还原酶催化脂酰辅酶A转化为脂肪醇,第二步由蜡酯合酶（WS）催化脂肪醇和脂肪酸的酯化反应[5]。; 刘博文王雪庆孙涛亓倩于淑惠杨璞陈晓鸣; 关键词：白蜡虫原核表达

玛咖贮藏根总RNA提取方法的比较被引量：1: 2018年; 为了筛选出适合玛咖贮藏根总RNA的提取方法,本研究比较了改良异硫氰酸胍法、CTAB法、Trizol法和E.Z.N.A.TM Plant mi RNA Kit试剂盒法等4种方法对玛咖根总RNA提取的效果。结果表明:改良异硫氰酸胍法提取效果不理想,CTAB法存在DNA污染;Trizol法和E.Z.N.A.TM Plant mi RNA Kit试剂盒法能有效去除多糖,提取出质量高、完整性好的RNA,OD260/OD280值大部分都在1.8~2.0之间,但Trizol法提取RNA的平均得率(156.3μg/g)是E.Z.N.A.TMPlant mi RNA Kit试剂盒法提取RNA的平均得率(48.6μg/g)的3.2倍,说明Trizol法可作为玛咖根总RNA提取的首选方法。; 尚瑞广李丽孙涛王兵益; 关键词：玛咖 RNA TRIZOL法

白蜡虫蜡酯合酶在昆虫细胞Sf9中的表达被引量：2: 2016年; [目的]本研究欲利用Bac-to-Bac表达系统,在Sf9细胞中表达WS。[方法]将WS编码序列克隆到质粒p FastBac^(TM)HT B后,转化大肠杆菌DH10Bac^(TM),经抗性和蓝白斑筛选,获得重组杆粒r Bacmid/Epel WS。将r Bacmid/EpelWS转染Sf9细胞。[结果]免疫荧光标记检测表明:WS在受感染细胞的细胞质中表达。[结论]本研究成功表达了白蜡虫WS,为白蜡虫WS的生化特性研究奠定了基础。; 亓倩于淑惠孙涛王雪庆刘博文杨璞陈晓鸣; 关键词：白蜡虫

白蜡虫热激蛋白序列分析被引量：4: 2016年; [目的]了解白蜡虫泌蜡高峰期所表达的热激蛋白及其序列特征。[方法]从白蜡虫转录组数据库筛选获得hsp10、hsp20、hsp40、hsp60、hsp70、hsp90基因序列,进行序列联配和进化树分析,并对hsp40、hsp60、hsp90基因在不同温度下mRNA相对表达量情况进行荧光定量PCR检测。[结果]从白蜡虫转录组数据库中共筛选出32条hsp基因序列,序列分析发现它们与目前已报道的序列具有很高一致性,大部分含有保守区域和特征序列,能够与同目昆虫基因聚为一支。hsp40、hsp60、hsp90基因均能被温度诱导。[结论]在白蜡虫泌蜡高峰期共鉴定到32个热激蛋白非重复序列基因(unigene):hsp10 unigene 3个,hsp20 unigene 1个,hsp40 unigene 11个,hsp60 unigene 1个,hsp70 unigene 13个,hsp90 unigene 3个。; 孙涛王雪庆赵遵岭于淑慧陈晓鸣刘魏魏亓倩杨璞; 关键词：白蜡虫热激蛋白温度胁迫荧光定量PCR

白蜡虫雄虫真蛹转录组分析被引量：3: 2016年; [目的]蛹期对于白蜡虫雄虫发育和交配具有重要意义,但目前缺乏对于白蜡虫真蛹基因转录情况的分析,本研究旨在获得白蜡虫真蛹转录组数据,了解其转录组特征。[方法]采用Illumina Hi Seq 2000进行高通量测序,并进行生物信息学分析;采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测3个热激蛋白基因(hsp)在不同虫态中的表达动态。[结果]共获得63 957条unigene、63 272个开放阅读框(ORF)、9 561个SSR分子标记,unigene平均长度674 bp,共有14 327条unigene获得了注释,Gene Ontology(GO)注释和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)注释分析表明,很多基因参与的功能与白蜡虫蛹期的生理特征吻合。[结论]该转录组数据为白蜡虫基因功能鉴定和蛋白组学分析研究奠定了数据基础。; 于淑惠亓倩孙涛王雪庆杨璞冯颖; 关键词：白蜡虫转录组 UNIGENE 热激蛋白

越冬白蜡虫微生物多样性分析被引量：3: 2017年; [目的]了解白蜡虫越冬时体内微生物的多样性,比较昆明与长春越冬虫体内微生物种类和数量的差异,为了解白蜡虫低温适应机制提供有用信息。[方法]采用Miseq高通量测序方法对昆明越冬雌成虫(KM)和长春越冬雌成虫(CC)体内细菌16s rRNA及真菌ITS基因进行测序,利用Usearch软件进行细菌和真菌OTU(Operational Taxonomic Unit)划分,并利用Mothur软件对OTU进行分类学分析和多样性指数分析。[结果]细菌KM和CC样品中共得到344个OTU,真菌KM和CC样品中共得到230个OTU。细菌共鉴定到15门、137属,在KM中乳球菌属占主要比例(29.78%),而在CC中立克次氏体占主要比例(55.77%),真菌中共鉴定到6门、83属,在KM中仅鉴定到41个属,而CC中鉴定到75个属,其中线虫草科无法归类的属在2个样品中均为优势菌群,但CC中含量远低于KM。[结论]昆明与长春越冬虫体内细菌及真菌种类和数量均不相同,与昆明越冬虫不同,需要应对极端低温的长春越冬虫体内立克次氏体为优势菌群。; 孙涛王雪庆赵遵岭于淑慧杨璞; 关键词：白蜡虫群落组成立克次氏体

白蜡虫蜡花微生物多样性分析被引量：4: 2016年; 【目的】探究白蜡虫Ericerus pela(Chavannes)雄若虫分泌的蜡花中微生物的多样性,比较不同厚度蜡花(随雄若虫发育蜡质层厚度增加)中细菌及真菌的种类和变化。【方法】采用Mi Seq高通量测序方法对不同发育阶段白蜡虫雄若虫分泌的蜡花中细菌16S rRNA和真菌ITS进行测序,利用Mothur软件计算蜡花中细菌和真菌的操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)及其丰富度、Alpha多样性分析。【结果】细菌3个样品共获470个OTU,真菌2个样品共获264个OTU。细菌共鉴定出18门30纲92科173属;真菌共鉴定出3门15纲43科68属。其中丛毛单胞菌属Comamonas细菌在蜡花中为优势菌,分别占前、中、后期雄若虫分泌的蜡花中细菌总量的79.79%,41.61%和46.86%;枝胞属Cladosporium在前期雄若虫分泌的蜡花中占真菌总量的17.01%,隐球菌属Cryptococcus在后期雄若虫分泌的蜡花中占真菌总量的60.84%,是蜡花中真菌重要组成部分。【结论】不同发育阶段雄若虫分泌的蜡花中细菌及真菌群落存在差异,随着蜡花厚度增加,细菌多样性先增加后减少,而真菌多样性降低。; 王雪庆于淑惠孙涛赵遵岭陈晓鸣杨璞; 关键词：白蜡虫蜡花真菌群落组成物种多样性

全选清除导出

共1页<1>

孙涛