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姜坤
姜坤
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
青岛农业大学动物科技学院
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发文基金:
公益性行业(农业)科研专项
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张峥
中国水产科学研究院黄海水产研究...
成君军
中国科学院武汉病毒研究所
石正丽
中国科学院武汉病毒研究所
黄健
青岛农业大学动物科技学院
刘庆慧
中国水产科学研究院黄海水产研究...
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转染
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细胞转染
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WSSV
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293T细胞
机构
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作者
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刘庆慧
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黄健
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石正丽
1篇
成君军
1篇
姜坤
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张峥
传媒
1篇
安徽农业科学
年份
1篇
2010
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真核表达载体pcDNA3.1(+)-vp28的构建及其在细胞中的表达
被引量:3
2010年
[目的]为研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白与虾细胞之间的作用机制奠定基础。[方法]采用PCR扩增方法构建含白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28的真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-vp28,用磷酸钙共沉淀法将重组质粒转染到293T细胞中,采用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物。[结果]VP28的PCR扩增产物在琼脂糖凝胶电泳中呈现出1条634bp左右的条带,与GenBank中vp28的序列完全一致。对pcDNA3.1(+)-vp28转染后的阳性单克隆菌落进行PCR鉴定、扩大培养和质粒提取,并对所得质粒进行HindⅢ和BamⅢ双酶切,获得了5409和610bp左右的2条带,与预期结果一致;所获扩增产物与vp28序列完全一致,说明重组质粒pcDNA3.1(+)-vp28被成功转染到293T细胞中;SDS-PAGE和Westernblot检测结果显示,pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中的表达产物与预期结果相符。[结论]pcDNA3.1(+)-vp28在293T细胞中可成功表达VP28。
姜坤
黄健
张峥
成君军
石正丽
刘庆慧
关键词:
WSSV
VP28
细胞转染
293T细胞
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