黄洋
- 作品数：20 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技基础条件平台建设计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 福氏志贺菌两种血清分型方法的比较
- 2018年
- 目的评价福氏志贺菌两种血清分型方法。方法使用传统血清分型方法和多重PCR血清分型方法对255株福氏志贺菌进行血清型分析。结果传统血清分型方法的分型率为98.4%(251/255),多重PCR血清分型方法分型率为96.1%(245/255),两种方法的分型率经卡方检验,差异无统计学意义(χ2=2.644,P>0.05)。有46株菌(18.0%,46/255)通过这两种血清分型得到的结果不一致。结论两种血清分型方法的分型率差异无统计学意义,但部分结果判断有不同。多重PCR更适用于大量样本的检测,传统血清分型方法可以与其互为补充。
- 徐潇石继春王春娥杨越郑锐李康黄洋陈翠萍叶强
- 关键词：福氏志贺菌统计学
- 鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒国家参考品的研制被引量：3
- 2021年
- 目的研制鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒国家参考品,用于该试剂盒的质量评价。方法收集10株鲍氏不动杆菌和10株阴性参考菌株(同属不同种的不动杆菌及与鲍氏不动杆菌感染部位相同或感染症状相似的病原菌)新鲜培养物,进行灭活、分装。并对参考品进行均匀性及稳定性评估,同时验证其准确性、特异性、重复性、最低检出限。组织7家实验室对制备的参考品开展协作标定。结果成功制备了鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒国家参考品,包括10个阳性参考品、10个阴性参考品、最低检出限参考品和重复性参考品。阳性参考品、最低检出限参考品和重复性参考品Ct值的CV均<2.5%;与-20℃保存的参考品比较,于2~8、25、37℃分别放置3、7、14 d及冻融3、5次后参考品Ct值的差异均无统计学意义(P> 0.05)。制备的参考品具有良好的准确性、特异性、重复性,最低检出限为1.0×10^(3)个/mL。参加协作标定的7家实验室中,除1家出现假阳性结果,其他实验室的准确性、特异性和重复性验证均符合规定;有1家实验室的最低检出限高于1.0×10^(3)个/mL。结论本实验研制的参考品可用于鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒的质量评价。
- 徐潇石继春王春娥李康黄洋李江姣梁丽陈驰叶强
- 关键词：鲍氏不动杆菌核酸参考品试剂盒
- 质控血清09CS中13个肺炎球菌荚膜多糖抗体IgG含量检测范围的确定被引量：2
- 2019年
- 目的 建立09CS作为质控血清用于13价肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗(13PCV)临床血清样本检测中的检测值范围。方法 用WHO推荐的检测人血清中抗肺炎球菌荚膜多糖抗体IgG的定量ELISA,以国际人肺炎球菌标准血清007sp为标准,将09CS作为待测血清,检测其在13个血清型(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型)中抗荚膜多糖抗体IgG含量的值。连续检测09CS血清100余次,计算99%置信区间的各血清型几何平均抗体浓度、标准偏差(SD)和变异系数(CV)。结果 检测得到09C中13个血清型抗荚膜多糖IgG抗体含量以及在99%置信区间(CI)下±2.58倍SD的检测值范围;13个血清型检测结果的CV分别为10.86%、12.52%、13.96%、14.98%、28.77%、11.16%、14.96%、9.31%、10.43%、7.28%、10.86%、12.52%、13.96%,除6A型外,各型CV均低于15%,表明试验间精密度良好;检测次数异常率低于10%。结论 09CS可作为质控血清,用于13价肺炎球菌结合疫苗临床血清中抗荚膜多糖抗体IgG含量的ELISA检测。
- 石刚王欣茹李红刘茹凤郭丽娜卢旭黄洋陈翠萍叶强
- 关键词：肺炎链球菌质控血清酶联免疫吸附测定
- 6群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因的分子生物学研究被引量：3
- 2017年
- 目的利用分子生物学方法,对25株6群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因(cps loci)进行研究。方法采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术,对25株6群肺炎链球菌进行分型;依据Gen Bank中收录的6群肺炎链球菌cps loci设计合成引物,以25株肺炎链球菌基因组DNA作为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行基因测定及分析;采用相邻合并分析(neighbour-joining analysis),根据MLST的7个管家基因和wciP、wzy、wzx这三个cps loci的代表基因分别绘制出系统发育树。结果根据MLST技术分析发现7株新的ST型菌株。25株6群肺炎链球菌cps loci的G+C含量为35.4%~35.5%,均属于I类;所有6C型wzy基因均有6个碱基的缺失。根据MLST的7个管家基因绘制的系统发育树,并根据cps loci的3个代表基因wciP、wzy和wzx绘制的系统发育树,差异很大。3个代表基因绘制的系统发育树,6C型为进化距离比较远的分枝,6A型和6B型的分枝进化距离相对较近;6D型与6B型在同一分枝内。结论获得了25株6群肺炎链球菌ST型和全长cps loci,完善了6群肺炎链球菌的菌种档案。
- 陈琼龙新星李红黄洋王春娥陈翠萍叶强
- 关键词：多位点序列分型系统发育树
- 铜绿假单胞菌核酸检测用试剂盒国家参考品的研究被引量：1
- 2022年
- 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)为假单胞菌属的一种革兰氏阴性菌,也被称为绿脓杆菌。在自然界水、土壤与空气中均广泛存在[1]。铜绿假单胞菌污染常见于凉拌菜、熟肉制品、饮用水等食品领域。例如在水源水或成品水中检出铜绿假单胞菌,甚至多批次样品的检出率大于10%,为一种重要的水源和食源性致病菌[2-4]。因此在我国饮用天然矿泉水(GB 8537-2016)[5]和包装饮用水(GB 19298-2014)[6]的国家标准中均明确规定不得检出铜绿假单胞菌。此外,在2015年我国颁布的《化妆品安全技术规范》也要求化妆品中不得有铜绿假单胞菌检出[7]。铜绿假单胞菌作为医院内感染的主要病原菌之一,在机体免疫力低下时,例如术后和恶性肿瘤的患者容易感染本菌,且铜绿假单胞菌的耐药性强,在治疗时往往需要使用多种抗生素进行联合用药[8-9]。因此,快速而准确地鉴定出铜绿假单胞菌对保障食品安全和人民健康具有重要的意义。
- 梁丽陈驰石继春王春娥龙新星刘茹凤黄洋李康徐潇李江姣徐颖华叶强
- 关键词：铜绿假单胞菌国家参考品核酸检测饮用天然矿泉水凉拌菜熟肉制品
- 11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因的分子生物学研究被引量：5
- 2018年
- 目的利用分子生物学方法,研究7株11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因(cps loci)。方法根据11群肺炎链球菌荚膜多糖合成相关基因设计合成5对特异性引物,以7株肺炎链球菌基因组DNA作为模板进行PCR扩增,并对扩增产物进行序列测定及基因序列比对,确定其血清型。多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术分析7株11群肺炎链球菌序列型(ST)。采用相邻合并分析(neighbour-joining analysis),根据MLST的7个管家基因和cps基因分别绘制系统发育树。结果根据wcw C、gct和wcj E等3个基因产物确定5株原11A型肺炎链球菌为11A型,无11E型;根据wcwR和gct等2个基因产物确定2株原11B型肺炎链球菌为11B型。获得7株不包括4个合成调控基因(wzg、wzh、wzd和wze)的11群肺炎链球菌cps loci,长度为11～12 kb,11A型具有12个开放式阅读框(ORF),11B型具有11个ORF。5株11A型肺炎链球菌部分cps基因序列差异较大; 2株11B型肺炎链球菌部分cps基因序列相似性高于99%。根据MLST分析发现3种新的ST型。根据MLST的7个管家基因绘制的系统发育树和cps基因绘制的系统发育树差异很大。结论从分子水平上确定了11A和11B血清型。获得了5株11A型和2株11B型肺炎链球菌ST型和部分荚膜多糖合成相关基因(cps loci),完善了11群肺炎链球菌的菌种档案。
- 陈琼龙新星李红李康黄洋陈翠萍叶强
- 关键词：多位点序列分型系统发育树
- 不同品牌胎牛血清用于肺炎链球菌调理吞噬作用的比较被引量：2
- 2019年
- 目的 比较不同品牌的胎牛血清用于HL-60细胞分化,以及配制成调理缓冲液后对肺炎链球菌调理吞噬杀菌力的影响。方法 采用5个不同品牌(品牌1~5)的胎牛血清用于HL-60细胞分化培养液和调理缓冲液的配制,计算分化后细胞活力,并进行肺炎链球菌调理吞噬杀菌试验,比较对照孔菌数和质控血清的调理指数。结果 与品牌1胎牛血清分化细胞的活力相比较,品牌5分化的细胞活力差异具有统计学意义(P=0.023,P<0.05),而品牌2、3、4分化细胞的活力差异均不具有统计学意义(P=0.129、0.186、0.440,P>0.05);使用品牌5分化的细胞,对3、6A、7F、9V、14、18C、19A、19F血清群/型调理指数因为调理吞噬后菌落数过少,无法计算。使用品牌5配制的调理缓冲液,对3、9V、19F血清群/型调理指数因为调理吞噬后菌落数过少,无法计算。结论 为保障肺炎链球菌调理吞噬试验的稳定性,建议对试验过程中使用的胎牛血清进行筛选。
- 黄洋徐潇李康李江姣杜慧竟郑锐孙文媛叶强
- 关键词：肺炎链球菌胎牛血清
- 肺炎链球菌蛋白疫苗的研究进展被引量：2
- 2018年
- 肺炎链球菌是导致发病率和致死率最主要的病原之一,特别是在儿童和老年人中。目前市售的肺炎链球菌疫苗由于其血清学的限制,具有很大的局限性,因此迫切需要研制更为经济且有广谱保护性的肺炎链球菌蛋白疫苗。肺炎链球菌的毒力因子及表面表达的抗原作为其潜在的蛋白疫苗成分,已经取得了很大的进展。本文总结了已经进入临床试验的肺炎链球菌蛋白疫苗的成分、结构特征、作用机制以及现阶段动物试验和临床研究的进展,以利于我们更好地了解肺炎链球菌蛋白疫苗的研发动态,为开发功能性抗体评价的新方法提供参考。
- 黄洋叶强
- 关键词：肺炎链球菌疫苗蛋白质
- 金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品的研制被引量：2
- 2021年
- 目的研制金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品。方法将10株金黄色葡萄球菌和10株阴性对照代表性菌株分别在适宜条件下复苏培养,制备合适浓度的菌悬液,并加热灭活和分装。随机抽样不同候选参考品样品10支进行均匀性分析,并将样品分别置于2~8、25、37℃条件下保藏以及反复冻融,评价标准物质的稳定性。同时对候选参考品的准确性、特异性、重复性、最低检出限进行分析,并组织8家实验室进行协作标定。结果制备了由阳性、阴性、重复性和最低检出限样品组成的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用候选参考品。不同候选参考品不同样品间的Ct值的变异系数在1.23%~3.86%之间,表明制备候选参考品均匀性良好。同时证实P1~10阳性和最低检出限候选参考品样品在反复冻融及加速破坏条件下稳定性良好。应用3个不同厂家生产试剂盒进行重复性验证实验显示,样本的Ct值均小于5.0%,表明候选参考品的重复性良好。除P6阳性候选参考品样品不能被部分试剂盒检出,其余阳性参考品样品均能成功检测、最低检出限为1.0×10^(3)个/m L。协作标定结果进一步表明阳性、阴性、重复性和最低检出限候选参考品均符合国家参考品的各项要求。结论研制的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品已获得批准,可用于金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒的质量控制和评价。
- 陈驰梁丽王春娥石继春龙新星刘茹凤黄洋李康徐潇李江姣徐颖华叶强
- 关键词：金黄色葡萄球菌核酸国家参考品均匀性稳定性
- 应用分子生物学方法鉴定6群肺炎链球菌血清型被引量：7
- 2016年
- 目的利用分子生物学方法,鉴定26株6群肺炎链球菌的血清型。方法利用6群肺炎链球菌荚膜多糖相关基因设计合成6对特异性引物,PCR扩增26株肺炎链球菌,并对PCR产物进行基因序列的测定及分析。结果26株肺炎链球菌cpsD蛋白229个氨基酸中有7个突变点,第220~222位均没有缺失;其中,19株肺炎链球菌具有与wci Nα蛋白氨基酸序列完全一致的氨基酸组成,第150位均为Ala,第38位均为Asp,其余7株与wciN_α蛋白氨基酸序列没有相似性,但与wciN_β蛋白氨基酸序列相似性超过99%;15株wciP蛋白第195位为Ser,11株wci P蛋白第195位为Asn。综合分析比对后,26株6群肺炎链球菌中,11株属于6A型肺炎链球菌,8株属于6B型肺炎链球菌,4株属于6C型肺炎链球菌,3株属于6D型肺炎链球菌。结论分子生物学方法可用于6群肺炎链球菌血清型的鉴定,为完善6群肺炎链球菌的菌种档案提供了实验依据。
- 陈琼李康梁丽龙新星黄洋石继春叶强
- 关键词：肺炎链球菌血清型
