金凤
- 作品数：12 被引量：57H指数：6
- 供职机构：扬州大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 南蛇藤茎提取物对人胶质母细胞瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响及机制被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨南蛇藤茎乙酸乙酯提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)抗人胶质母细胞瘤U251细胞株的增殖和凋亡作用,研究COE抗肿瘤的分子机制,为寻找新的治疗胶质母细胞瘤药物提供依据。方法:以人胶质母细胞瘤细胞株U251为研究对象,设空白组和COE组,应用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]比色法观察COE对细胞活力的抑制作用;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxy uridine,Brd U)标记检测COE对U251细胞增殖的影响;Annexin V/碘化丙啶(PI)双标法检测COE对U251细胞凋亡的作用;透射电镜下观察经COE干预后U251细胞超微结构变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测COE对凋亡标志基因B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,COE能够明显抑制U251细胞的增殖(P<0.05);诱导U251细胞的早期凋亡,电镜下可见到凋亡小体,影响并改变U251细胞超微结构;COE能促进Caspase-3,Bax蛋白表达,降低Bcl-2,Bcl-2/Bax蛋白表达(P<0.05)。结论:COE能有效抑制胶质母细胞瘤U251细胞株的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制与调节Bcl-2和Caspase-3表达有关。
- 顾昊王海波冯俊钱亚云金凤陈珏史有阳陆松花徐佩刘延庆
- 关键词：胶质母细胞瘤U251细胞株透射电镜
- 南蛇藤提取物通过调控基质金属蛋白酶组及其抑制因子抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的研究被引量：21
- 2016年
- 目的探讨南蛇藤提取物(COE)对人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和转移的影响及其分子机制。方法 MTT法检测COE对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测COE对SGC-7901细胞侵袭和转移能力的影响。Western blotting检测经COE作用后的SGC-7901细胞中金属基质蛋白酶(MMPs)MMP2、MMP9和金属基质蛋白酶抑制因子(TIMPs)TIMP1、TIMP3的蛋白水平。RT-PCR检测经COE作用后的SGC-7901细胞中MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP3的m RNA表达情况。结果 Transwell实验显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞穿膜数明显减少并呈一定的浓度依赖性。Western blotting结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞,MMP2、MMP9蛋白的表达水平明显降低,而TIMP1、TIMP3蛋白表达水平明显上调。RT-PCR结果显示,经20、40、80 mg/L COE处理过的SGC-7901细胞中MMP2和MMP9的m RNA水平有轻微升高趋势,而TIMP1和TIMP3的m RNA水平明显大幅上调(P<0.001)。结论 COE能明显抑制人胃癌SGC-7901细胞的侵袭和迁移,其机制可能与下调MMP2、MMP9蛋白水平直接相关。而其作用的实现,很可能是通过直接上调TIMP1和TIMP3的m RNA转录水平从而提高TIMPs蛋白表达水平实现的。
- 王海波顾昊赵雪煜冯俊钱亚云杨林金凤史有阳陆松花刘延庆
- 关键词：南蛇藤胃癌金属基质蛋白酶
- 金龙胶囊对胃癌细胞MGC-803和BGC-823侵袭转移能力的影响被引量：7
- 2018年
- 目的：探讨金龙胶囊对人胃癌MGC-803,BGC-823细胞侵袭和迁移能力的影响并对其具体机制进行探讨。方法：体外培养胃癌MGC-803,BGC-823细胞,分为金龙胶囊组（0.1,0.2,0.4,0.8 g·L-1）,空白组和5-氟尿嘧啶（5-FU）组,采用噻唑蓝（MTT）比色法分别检测金龙胶囊对MGC-803,BGC-823细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制率（IC50）;采用细胞侵袭（transwell）小室法和划痕实验检测金龙胶囊处理MGC-803和BGC-823细胞24 h后,细胞侵袭和迁移能力发生改变;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测金龙胶囊处理MGC-803,BGC-823细胞24 h后E-钙黏素（E-cadherin）,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达情况。结果：金龙胶囊能明显抑制MGC-803,BGC-823细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;与空白组比较,金龙胶囊能明细减少MGC-803,BGC-823细胞的穿膜细胞数目,可明显影响2种胃癌细胞的侵袭与迁移能力,并呈明显浓度依赖性（P〈0.05）;金龙胶囊组的划痕距离较空白组明显降低,影响MGC-803,BGC-823细胞迁移,并呈浓度依赖性（P〈0.05）;与空白组比较,金龙胶囊组能够提高MGC-803和BGC-823细胞中E-cadherin蛋白表达,降低MMP-2,MMP-9蛋白表达水平,且呈一定的量效关系（P〈0.05）。结论：金龙胶囊能够抑制人胃癌MGC-803,BGC-823细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,抑制MMP-2,MMP-9表达水平有关。本研究证实了金龙胶囊对胃癌MGC-803,BGC-823细胞抗侵袭转移的部分机制。
- 李丹金凤陶丽倪腾洋王海波冯俊朱光钱亚云丁岩冰Masataka Sunagawa刘延庆
- 关键词：金龙胶囊迁移基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
- 南蛇藤提取物对人食管鳞癌TE-8细胞凋亡的影响被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨南蛇藤提取物对人食管鳞癌TE-8细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:MTT法检测不同质量浓度的南蛇藤提取物作用于TE-8细胞24、48h后细胞的增殖情况。南蛇藤提取物作用TE-8细胞24h后,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;JC-1试剂盒检测线粒体膜电位的损伤;TUNEL法检测DNA损伤情况;Western blot法检测丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白的表达情况。结果:南蛇藤提取物能明显抑制人食管鳞癌TE-8细胞的增殖,呈时间及浓度依赖;南蛇藤提取物能促进细胞凋亡,降低线粒体膜电位,诱导细胞内DNA损伤,阻断MAPK信号通路的表达,呈浓度依赖。结论:南蛇藤提取物能够抑制TE-8细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与南蛇藤提取物抑制MAPK信号通路的表达有关。
- 金凤刘延庆钱亚云陈珏顾昊戴小军王萱怡王海波史有阳陆松花李丹
- 关键词：南蛇藤提取物食管鳞癌凋亡MAPK信号通路
- 南蛇藤提取物增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭能力的研究被引量：6
- 2014年
- 目的:构建高表达抑癌基因Maspin的人胃癌MGC803细胞,研究不同浓度的南蛇藤提取物能否增强Maspin抑制胃癌细胞的侵袭能力。方法:克隆重组GV208-Maspin-EGFP慢病毒表达载体,感染人胃癌MGC803细胞。加入不同浓度的南蛇藤提取物(10、20、40μg·m L-1),Transwell小室法检测药物对高表达Maspin的人胃癌MGC803细胞侵袭能力的影响。结果:成功构建高表达Maspin的人胃癌MGC803细胞模型。各药物组Transwell小室下方穿膜细胞的数目减少,呈现一定的药物浓度依赖性。结论:南蛇藤提取物可增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭的能力。
- 钱亚云曹玲刘延庆姜馨吉兰芳杨林朱耀东陈珏顾昊金凤白云飞
- 关键词：南蛇藤MASPIN胃癌
- 南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响被引量：8
- 2015年
- 目的:利用高表达抑癌基因maspin的人胃癌MGC-803细胞探讨南蛇藤提取物对其凋亡的影响。方法:以人胃癌MGC-803细胞为研究对象,不同质量浓度20,40,80,160,320 mg·L-1南蛇藤提取物作用于MGC-803细胞24,48 h后,MTT法检测南蛇藤提取物对高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞增殖的影响;以不同质量浓度COE组(0,20,40,80 mg·L-1)及32 mg·L-1的5-FU阳性对照处理24 h后,TUNEL法检测南蛇藤提取物对细胞凋亡的影响,Western blot检测对maspin,Bcl-2,Bcl-2L12及Bax蛋白表达的影响。结果:南蛇藤提取物(20,40,80,160,320 mg·L-1)能明显抑制高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞的增殖,呈现时间及浓度依赖性;与空白组比较,不同质量浓度的南蛇藤提取物(20,40,80 mg·L-1)作用24 h后,镜下显示,随着药物浓度升高,细胞数目减少,形态变圆,胞浆浓缩,出现凋亡小体,TUNEL结果表明南蛇藤提取物(20,40,80 mg·L-1)能促进细胞凋亡,Western blot结果显示南蛇藤提取物(20,40,80,160 mg·L-1)可呈浓度依赖性地增加抑癌基因maspin蛋白的表达,降低Bcl-2,Bcl-2L12的表达,均具有明显的统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论:南蛇藤提取物能够抑制高表达maspin的人胃癌MGC-803细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与南蛇藤提取物促进抑癌基因maspin的表达以及抑制Bcl-2,Bcl-2L12的表达有关。
- 曹玲钱亚云刘延庆朱耀东杨林陈珏顾昊白云飞金凤
- 关键词：南蛇藤胃癌MASPIN基因凋亡
- 南蛇藤提取物靶向maspin抑制胃癌转移机制被引量：1
- 2014年
- 利用过表达maspin的人胃癌MGC803细胞,加入不同浓度的南蛇藤提取物(20、40、80、160μg·mL^(-1))作用24 h后,Western blotting法分析南蛇藤提取物增强抑癌基因maspin的抑制胃癌转移的作用及分子机制。结果表明:与对照组相比,Akt、p-Akt、ERK、P38蛋白的表达水平显著降低,且呈现一定的剂量依赖性。说明南蛇藤提取物能够增强抑癌基因maspin的抑制胃癌转移的作用,其分子机制可能与PI3K/Akt和MAPK信号转导通路相关。
- 钱亚云曹玲刘延庆杨林朱耀东陈珏顾昊金凤白云飞
- 关键词：南蛇藤胃癌抑癌基因
- 南蛇藤提取物对过表达mTOR的人肝癌HepG2细胞株的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:构建过表达雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)的人肝癌HepG2细胞,并研究中草药南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb.提取物对该细胞的影响。方法:利用分子生物学技术,将GV238-mTOR重组质粒转染人肝癌HepG2细胞,分别用荧光素酶活性检测和Western Blot实验,分析转染后的细胞中mTOR的表达水平。人肝癌HepG2/mTOR^(++)细胞中,加入不同浓度的南蛇藤提取物(20、40、80、160、320μg·m L^(-1))作用24 h后,分析南蛇藤提取物对mTOR蛋白的作用。结果:经转染的人肝癌HepG2细胞中,mTOR蛋白的表达水平显著增加。南蛇藤提取物明显抑制肝癌细胞的增殖,并明显降低细胞内mTOR蛋白的表达。结论:本实验成功获得能稳定过表达mTOR的人肝癌HepG2细胞株。南蛇藤提取物明显抑制肝癌细胞内mTOR蛋白的表达水平。
- 钱亚云陆松花赵雪煜杨婷史有阳金凤刘延庆
- 关键词：南蛇藤肝癌过表达雷帕霉素靶蛋白
- 交叉对话信号的分子绝缘——对创新药物设计的思考被引量：1
- 2017年
- 生物信号通路的交叉对话(cross-talk)是指众多信号通路共享同一关键组分,形成一种蝴蝶领结(bow-tie)样的网络拓扑结构。交叉对话对终末基因的调节表现出功能冗余、协同及拮抗,同时又要避免通路之间互相串扰带来的信号噪音或信号溢出,进化出一套维持细胞对不同外界应激产生特异性应答的绝缘(insulation)机制,对维持细胞内稳态有着非常重要的生物学意义。交叉对话及其分子绝缘机制提示:对话分子对细胞命运调控的两重性,要求实现靶向对治疗有利的对话分子而避开对治疗不利的对话分子;对话分子以大分子复合物为功能载体,在信号绝缘中对话分子互作界面构象的高度可塑性,设计开展药物结合与药理活性关联性研究。因此,以信号通路的交叉对话及其分子绝缘机制指导创新药物设计,对解决当前药物研发的瓶颈和临床困境具有重大的指导意义。
- 陶丽金凤王海波钱亚云孙云陆茵刘延庆
- 关键词：信号转导药物设计
- 南蛇藤提取物对人肝癌细胞HepG2上皮间质转化的影响被引量：8
- 2014年
- 目的:结合体内外实验研究南蛇藤提取物对人肝癌细胞Hep G2上皮间质转化的作用及分子机制。方法:取对数生长期Hep G2细胞,除对照组外,分别给予南蛇藤提取物10、20、40、80、160μg·m L-1培养,采用Western Blotting法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平;斑马鱼胚胎,于受精后48 h开始给药,正常组给予E3缓冲液,DMSO组为含1%DMSO的E3缓冲液,南蛇藤组各药物浓度分别为10、20、40、80、160μg·m L-1;给药24 h后,以Western Blotting法检测m TOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,南蛇藤提取物各浓度组明显增加E-cadherin的表达量,降低vimentin和m TOR信号通路相关蛋白的表达水平。结论:南蛇藤提取物能在一定程度上逆转人肝癌细胞EMT,其分子机制可能与m TOR信号通路相关,m TOR可作为临床治疗肝癌的新靶点。
- 钱亚云金凤曹玲史有阳陆松花姜馨吉兰芳严妍李丹雍军刘延庆
- 关键词：南蛇藤肝癌上皮间质转化斑马鱼信号通路
