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谢雪玲
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1
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供职机构:
福建医科大学附属第一医院
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相关领域:
医药卫生
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作者
1篇
谢雪玲
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海峡药学
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2016
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膜型MHC-Ⅰ类分子高表达的GBM U251细胞疫苗的研制及其体外抗瘤作用
2016年
目的探索膜型MHC-Ⅰ类分子高表达人多形性胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞疫苗的制备方法及其体外诱导的抗瘤作用机制。方法U251胶质瘤细胞加入0~2000U·mL^(-1)不同浓度梯度的重组人IFN-γ干预48h;流式细胞仪(FCM)检测不同浓度梯度的重组人IFN-γ诱导后的U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子表达变化情况;取诱导MHC-Ⅰ类分子高表达最高的IFN-γ干预方案作为疫苗的制备方法;体外刺激健康捐献者PBMCs作为效应细胞,MTT比色法检测其对野生型及IFN-γ诱导48h后靶细胞的特异性杀伤活性,同时以抗人HLA-A,B,C行特异性杀伤试验的阻断试验;ELISA法检测效应细胞攻击靶细胞后的IFN-γ、IL-2的分泌情况;FCM检测疫苗刺激前后PBMCs CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例变化。结果 500U·mL^(-1)IFN-γ诱导48h U251细胞胞膜的MHC-Ⅰ类分子表达率最高,达89.9%;高表达膜型MHC-Ⅰ类分子U251细胞疫苗9在体外具有明显特异性的杀瘤活性的诱导能力(P<0.05);体外可分泌大量的IFN-γ和L-2(P<0.05);CD4+、CD8+明显增高(P<0.05)。结论500U·mL^(-1) IFN-γ诱导48h是U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子体外诱导表达的最佳方案;膜型MHC-Ⅰ类分子高表达的U251细胞疫苗休外具有特异性的抗瘤作用,其杀瘤活性与膜型MHC-Ⅰ类分子表达上调有关。
谢雪玲
关键词:
U251细胞
多形性胶质母细胞瘤
MHC-I
细胞疫苗
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