童攒
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
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- 基于BAC同源重组高效构建小鼠胚胎干细胞Nanog基因报告体系
- 2007年
- Nanog是最新发现的一个在胚胎干细胞(ES细胞)中特异表达,并在保持ES细胞多能性的机制中有重要作用的转录因子.Nanog基因的表达能非常灵敏地随ES细胞的分化而下调,使之成为指示ES细胞多能性最理想的标志基因之一.本研究基于细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)同源重组技术,并改进了将报告基因敲入目的位点的重组方案,高效构建了小鼠ES细胞(mES细胞)的Nanog/EGFP报告体系.基因打靶后的mES细胞具有与其源mES细胞相同的特性,并能稳定地将Nanog与EGFP(enhanced green fluorescence protein)的表达偶联.此报告体系能通过EGFP的表达有效报告Nanog基因的表达水平,从而对mES细胞分化或未分化状态作出明显指示.本研究为mES细胞自我更新和分化的研究提供了一个理想的实验体系,不仅能用于进一步优化mES细胞的培养体系,对研究Nanog的表达调控及其与其他维持mES细胞多能性的因子和途径之间的关系也有深远的意义.
- 范彦童攒尤洁芳杜立颖邹方东丁明孝邓宏魁
- 关键词：小鼠胚胎干细胞NANOG细菌人工染色体同源重组
- 人ACE2转基因小鼠对SARS-CoV的易感性被引量：7
- 2007年
- 目的建立敏感的SARS小动物模型。方法通过显微注射技术,将编码SARS-CoV细胞受体的人血管紧张素转换酶(hACE2)基因导入小鼠的基因组中制备了hACE2转基因小鼠,在小鼠ACE2(mACE2)启动子的调控下,hACE2蛋白在转基因小鼠的肺脏、心脏、肾脏和小肠表达。我们观察了野生型和转基因小鼠在SARS冠状病毒接种后病原学和病理学方面的反应。结果在接种后第3天和第7天,病毒能够更有效地在转基因小鼠的肺脏复制,而且转基因小鼠出现更严重的肺损伤。肺组织的损伤包括肺间质充血、出血,单核细胞、淋巴细胞浸润及血浆蛋白的渗出,肺泡上皮细胞增生、脱落,此外,在转基因小鼠的某些器官还发现了血管炎、变性和坏死等病理变化。在转基因小鼠的肺上皮细胞、血管内皮细胞和脑神经细胞检测到病毒抗原。结论转基因小鼠比野生型小鼠对SARS病毒更易感,而且表现出更接近SARS患者的病理变化。
- 杨秀红邓巍童攒刘燕霞张连峰朱华高虹黄澜刘亚莉马春梅徐艳峰丁明孝邓宏魁秦川
- 关键词：SARS病毒ACE2转基因小鼠动物模型
