毛丽君
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：东北师范大学生命科学学院遗传与细胞研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- RhoC对卵巢癌细胞的细胞侵袭和迁移能力的影响
- 癌细胞的转移是癌症患者术后复发的一个重要原因,RhoC蛋白在多种肿瘤中表达增加,特别是转移侵袭性较高的肿瘤。RhoC的异常表达对恶性肿瘤的侵袭和转移具有非常重要的意义。
- 毛丽君
- 关键词：SKOV3RHOC基因RNA干涉
- 文献传递
- 5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究被引量：2
- 2009年
- 分离大鼠骨髓间充质干细胞,体外培养呈现成纤维细胞表型,用12μmol/L5-氮胞苷(5-aza)诱导培养,一周后细胞变为细长形成杆状.两周后培养细胞与临近的细胞融合,三周后形成类肌管状结构.通过RT-PCR检测,5-氮胞苷诱导前,间充质干细胞表达α-actin,desmin和MEF-2D,5-aza诱导后表达β-MHC和GATA4.Western Blot分析结果表明α-actin在诱导前后都表达,而myosin则在诱导后才表达.免疫荧光标记α-actin和β-MHC,证实了上述结果,即在5-氮胞苷诱导前后细胞表达α-actin,诱导后myosin才在细胞质中表达,Myosin和β-MHC是心肌细胞特异表达的蛋白.上述结果表明骨髓间充质干细胞具有向新生心室肌分化的潜能,这些诱导分化的细胞为心肌梗塞移植治疗提供一种潜在的供体细胞.
- 郭伟祥卢天成杨涛董春光毛丽君于英林王兴智朱筱娟
- 关键词：骨髓间充质干细胞5-氮胞苷分化
- RhoC-miRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞系中稳定表达被引量：1
- 2009年
- 目的体外合成RNA干涉小分子构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA真核表达载体,分析其在人卵巢癌细胞SKOV3中稳定表达情况。方法设计并合成单链oligo,经退火形成双链的DNAoligo,将其与线性的pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR质粒连接,构建重组质粒pcD-NATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA真核表达载体,经扩增、筛选、鉴定及测序后,用脂质体法将重组质粒转染SKOV3细胞,筛选稳定转染细胞系、观察转染细胞的形态并进一步通过Western印迹法检测细胞内RhoC蛋白表达。结果重组质粒进行PCR鉴定及DNA序列测定证实DNAoligo已被成功连接到载体中并且序列完全正确;经重组质粒转染的SKOV3细胞24h后的荧光显微镜下观察到少量细胞带有绿色荧光信号,RhoC-miRNA稳定转染的SKOV3细胞形态变圆,折光性增强,收缩不铺展。Western印迹结果显示,与SKOV3细胞株及pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-neg细胞相比,pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA细胞中RhoC蛋白表达水平明显降低,表明所设计的RhoC-miRNA能有效抑制SKOV3细胞中内RhoC蛋白表达。结论该实验成功构建了RhoC-miRNA真核表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-RhoC-miRNA,利用脂质体法将其转染卵巢癌细胞后,能有效地抑制细胞内RhoC蛋白表达,为进一步研究RhoC的功能及探讨以RhoC为靶点的基因治疗提供了研究平台。
- 潘颖毛丽君孙艳霞任淑萍施恒亮朱筱娟
- 关键词：RHOC蛋白真核表达载体
