张芳芳
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：集美大学水产学院更多>>
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- 日本鳗鲡γ-干扰素诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)基因的克隆鉴定与表达分析
- 2018年
- 在日本鳗鲡(Anguilla japonica)中克隆获得2个γ-干扰素诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)基因AjGILT-1和AjGILT-2,并对其序列进行生物信息学分析,进而利用实时荧光定量PCR分别检测2个基因在不同组织器官中的表达水平,及其在脂多糖(LPS)、聚肌胞苷酸(PolyI:C)刺激和迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染后的表达变化.结果显示:2个基因编码的蛋白序列中均含有GILT家族的特征序列CQHGX2ECX2NX4C、活性位点CXXC、2个糖基化位点和11个保守的半胱氨酸残基,基因组序列均含7个外显子和6个内含子.2个基因启动子中都存在多个转录因子结合位点,如γ-干扰素活化位点以及特化蛋白1结合位点;不同的是AjGILT-1启动子区存在多个核因子-1、激活蛋白-1结合位点及干扰素刺激反应元件,而在AjGILT-2启动子区未发现.AjGILT-1在鳃和肠中表达量最高,而AjGILT-2在性腺、头肾和脾脏中表达量最高;除肠道外,同一组织中AjGILT-2的表达量均高于AjGILT-1.LPS、PolyI:C刺激和E.tarda感染后,AjGILT-1与AjGILT-2的表达在鳃中仅有少数变化,而在头肾和中肾中则变化较明显.综上所述,AjGILT-1和AjGILT-2基因可能参与了日本鳗鲡受病毒和细菌感染后的免疫应答.
- 陈姗张芳芳张芳芳黄贝
- 关键词：日本鳗鲡
- 日本鳗鲡干扰素-Y诱导的溶酶体巯基还原酶的克隆和表达
- 干扰素-γ诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)在MHCII类抗原加工和呈递过程中起着关键作用。本文从日本鳗鲡脾脏中提取RNA继而克隆到两条GILT基因,分别命名为AJGILT-1和AJGILT-2。其中AJGILT-1全长...
- 张芳芳
- 关键词：日本鳗鲡
- 文献传递
- 日本鳗鲡COX-2基因的克隆、鉴定及表达分析被引量：2
- 2015年
- 应用PCR及RACE技术从日本鳗鲡(Anguilla japonica)中克隆获得一个2463 bp环氧化酶基因(Cyclooxygenase-2,AjCOX-2)的cDNA序列.AjCOX-2前体为606肽,含有脊椎动物COX-2的保守结构域,以及加氧酶和过氧化物酶的活性位点.在正常生理条件下,AjCOX-2基因在日本鳗鲡的鳃、鳔和皮肤中高水平转录表达.脂多糖刺激后8 h,AjCOX-2基因在皮肤和鳔中的转录表达显著上调(P<0.05);多聚胞苷酸刺激后8 h,AjCOX-2在皮肤、鳔和鳃中的转录表达显著上调(P<0.05);迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)刺激后8 h,AjCOX-2在鳔中的转录表达也极显著上调(P<0.01).结果表明,AjCOX-2基因是对外来病原刺激的早期响应基因,参与机体抵抗外来刺激物的先天免疫应答.
- 张芳芳熊静段明珠李春艳彭喜霞黄文树
- 关键词：日本鳗鲡COX-2脂多糖迟缓爱德华氏菌
- 日本鳗鲡干扰素-Y诱导的溶酶体巯基还原酶的克隆和表达
- 干扰素-γ诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)在MHCⅡ类抗原加工和呈递过程中起着关键作用.本文从日本鳗鲡脾脏中提取RNA继而克隆到两条GILT基因,分别命名为AJGILT-1和AJGILT-2.其中AJGILT-1全长为...
- 张芳芳
- 关键词：日本鳗鲡
- 日本鳗鲡肝脏表达抗菌肽2基因的克隆与表达被引量：7
- 2016年
- 为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡(Anguilla japonica)肝脏表达抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450 bp,开放阅读框编码89个氨基酸。其成熟肽含有LEAP-2保守基序"C-X5-C-X4-C-X4-C"。AJLEAP-2基因组结构与其他脊椎动物LEAP-2相同,都包含有三个外显子。利用荧光定量PCR检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡不同组织/器官中的表达,发现其转录子在肝脏中表达量最高,是内参基因(β-acHn)的6倍;其次是肠道,但其表达量仅为肝脏的1/130。此外,还检测了AJLEAP-2在日本鳗鲡玻璃鳗(Glass eel)阶段的转录表达水平,结果显示,玻璃鳗中AJLEAP-2的转录表达量仅低于黑仔期的肝脏,为黑仔鳗肠道表达量的2倍。LPS和迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)刺激能显著上调鳗鲡血液中AJLEAP-2的转录表达,刺激16h后上调倍数最高,分别为对照组的86倍和12倍。此外,LPS刺激72h和E tarda刺激8h后,肠道中AJLEAP-2显著上调表达(P<0.05),为对照组的8倍。Poly I:C刺激24h后,血液中AJLEAP-2转录表达显著下调。结果表明,AJLEAP-2在日本鳗鲡抗细菌感染过程中起重要的作用。
- 段明珠黄贝梁英张芳芳聂品黄文树
- 关键词：抗菌肽日本鳗鲡迟缓爱德华氏菌
- 日本鳗鲡的C-型和G-型溶菌酶研究被引量：3
- 2017年
- 研究以日本鳗鲡(Anguilla japonica Temminck et Schlegel)为研究对象,根据其基因组数据库,预测并扩增出2类,共5个溶菌酶基因,包括1个C-型溶菌酶和4个G-型溶菌酶,分别命名为AJLys C、AJLysG1、AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4。它们的cDNA全长分别为811、749、1352、1175和733 bp,编码143、193、185、185和187个氨基酸。Signal P预测表明,AJLys C和AJLysG1的N-端分别包括15和19氨基酸的信号肽,另外3种溶菌酶没有信号肽。基因组分析显示,AJLys C、AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4的基因结构与其他鱼类的同类溶菌酶的基因结构相似,C-型溶菌酶具有4个外显子,G-型则具有5个。但是,AJLysG1的基因结构与其他鱼类G-型溶菌酶不同,具有6个外显子,与其他鱼类溶菌酶的蛋白序列比较,发现AJLysG1缺失其他G-型溶菌酶存在的第2个酶活性位点氨基酸,即天冬氨酸Asp。AJLys C与其他很多物种的C-型溶菌酶具有较高的同一性,如与牙鲆的同一性为72.7%。G-型溶菌酶中AJLysG2、AJLysG3、AJLysG4彼此之间以及与其他物种G-型溶菌酶的同一性相对较高;而AJLysG1与其他物种以及与其他3种G-型溶菌酶的同一性均不高,且都在50%以下。组织表达分析显示,所有5个溶菌酶基因在12种检测的组织中均有表达。C-型溶菌酶在胃及免疫相关组织的表达量较高;G-型溶菌酶在各组织/器官中的表达则差异较大,AJLysG1在皮肤和肌肉中的表达量最高,AJLysG2在免疫组织/器官如血液、头肾、体肾和鳃中表达量较高。经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)刺激48h后,这5个溶菌酶基因在组织/器官中的表达量均有上调,其中在血液、肠道和头肾等的上调较为显著。此外,研究尝试重组表达这些抗菌肽,获得了AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4基因在鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)细胞中的表达,重组蛋白表现出对溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)生长的明显抑制作用。文章较全面地研究了�
- 杨勇黄贝黄文树段明珠张芳芳聂品
- 关键词：日本鳗鲡溶菌酶重组蛋白抑菌活性
