宋佳雯
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：上海大学生创新活动计划中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 蛋白质谷氨酰胺酶发酵条件的初步优化被引量：1
- 2014年
- 蛋白质谷氨酰胺酶在食品行业中具有广泛的应用前景,通过对蛋白质的脱酰胺基作用,可以促进植物蛋白的溶解、乳化和起泡等。对产吲哚金黄杆菌产生蛋白质谷氨酰胺酶的代谢曲线和发酵培养基配方进行研究,结果表明,发酵液氨浓度和pH值随发酵时间延长而升高,发酵12 h酶活最高,发酵培养基初始pH值为5.2时酶活最高;通过单因素试验,确定乳糖和蔗糖为最适碳源,大豆蛋白胨和多聚蛋白胨为最适氮源;正交试验结果表明,大豆蛋白胨、乳糖和Tween 80最适浓度分别为1.2%、0.7%和0.15%,培养基优化后酶活最高为0.661 U/mL。
- 何灿宋佳雯黄迪关静张扬郑烨陈曦乐朱晨旦岑院汉凤孙仁强赵怡姗成楠张艳芳高红亮
- 关键词：培养基
- 医用级微生物谷氨酰胺转胺酶纯化工艺的建立
- 王志珍宋佳雯陈璐田苏陈中山金明飞
- 微生物蛋白质谷氨酰胺酶的初步分离纯化
- 2014年
- 蛋白质谷氨酰胺酶可以特异性地水解蛋白质和多肽的谷氨酰胺残基,研究了产吲哚金黄杆菌产生的微生物蛋白质谷氨酰胺酶的代谢曲线和初步的分离纯化。发酵过程中pH升高,氨浓度增加,到14 h时酶活达到最高为0.359 U/mL。发酵液离心去上清液经3 kD滤膜超滤4倍时,纯化倍数和得率都最高。超滤液加入4倍体积无水乙醇沉淀蛋白质,酶的得率最高为72.7%。沉淀用缓冲液复溶后,经过SP-Sepharose Fast Flow离子交换层析分离,得到单一峰。经过多步纯化后酶得率为31.72%,纯化倍数为124倍,经SDS-PAGE电泳鉴定为单一条带,分子量约为20 kD。
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- 关键词：超滤乙醇沉淀离子交换层析SDS-PAGE
- 基因组重排筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株被引量：3
- 2017年
- 谷氨酰胺转胺酶(TGase)的产量不足的问题一直限制其工业化生产规模,故采用基因组重排的方法,筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株。通过对不同制备条件下原生质体纯度和形成率的考量,获得制备原生质体的最优条件为以6mg/ml的溶菌酶浓度进行酶解,酶解时间2h。再优化融合条件,以2min紫外灭活和40min热灭活结合的方法挑选出融合子。通过两轮基因组重排,经过96孔板发酵高通量筛选和摇瓶发酵复筛验证,获得了一株产酶达7.12U/ml的茂源链霉菌,相比最初选用菌株的平均酶活提高65.5%。发酵结果显示,酶活提高的原因可能是在重组后原酶成熟更快、更彻底,且得到的菌株遗传稳定性良好。证明基因组重排能够有效提高菌株的产酶水平,同时为谷氨酰胺转胺酶产量提高提供理论依据。
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- 关键词：基因组重排高通量筛选
- 谷氨酰胺转胺酶新菌种的诱变育种
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