王秀亮
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力研究被引量：4
- 2007年
- 目的构建人整合素(integrin)β1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pGenesil-integrin β1),建立integrin β1剔降血管内皮细胞株,观察integrin β1对EA.hy926细胞株增殖的影响。方法合成integrin β1siRNA模板,经退火后插入到pGenesil-1荧光载体。阳性重组质粒经DoTAP转染至EA.hy926细胞中。蛋白印迹观察pGenesil-integrin β1表达载体对目的蛋白integrin β1表达的抑制效率,绘制转染基因前后细胞生长曲线。结果经酶切、测序验证,pGenesil-integrin β1重组质粒构建成功。转染细胞后,可明显抑制integrin β1的表达。整合素β1基因剔降血管内皮细胞株细胞增殖减慢,与EA.hy926细胞株相比,生长曲线右移。结论成功构建了pGenesil-integrin β1重组质粒,建立了integrin β1下调细胞株,下调integrin β1表达对血管内皮细胞增殖产生负调控作用。
- 梁光萍苏踊跃陈建闫德雄陈卫王秀亮罗向东
- 关键词：整合素Β1RNA干扰血管内皮细胞
- 人β1整合素远端启动子542bp报告基因载体构建和鉴定及启动活性分析
- 目的以人整合素β1启动子基因序列为模板,构建并鉴定整合素β1远端启动子中542bp片段的荧光素酶报告基因载体pGL3-542,分析人β1整合素在HaCat细胞中核心启动片段。方法:以本室构建的含整合素β1全长启动子174...
- 王秀亮陈卫梁光萍陈建苏踊跃杨陈罗向东
- 文献传递
- 整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力的研究
- 目的构建人整合素β1基因的小干扰 RNA（siRNA）表达载体（pGenesill-integrin β1）,建立 integrin β1剔降血管内皮细胞株,观察 integrin β1对 EA.hy926细胞株增殖的影...
- 梁光萍苏踊跃陈建闫德雄陈卫王秀亮罗向东
- 文献传递
- 人β1整合素启动子核心启动序列初步分析
- 2009年
- 目的:分析人β1整合素在HaCat细胞中核心启动片段。方法:以本室构建的含整合素β1全长启动子1745bp基因序列(-1745bp～+11bp)的重组载体pGL3-1756为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出整合素β1启动子-845bp～-304bp间基因序列,克隆至荧光素酶表达载体pGL3basic,构建含正确目的基因重组载体pGL3-542。用pGL3-1756、和pGL3-542质粒转染人表皮细胞株HaCat进行活性分析。结果:酶切及序列测定表明,克隆后插入pGL3basic中的启动子片段与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,且插入方向正确。在人永生化表皮细胞株(HaCat细胞)中构建的pGL3-542载体具有很强的启动活性。结论:成功构建了整合素β1远端启动子542bp片段载体,在HaCat细胞中具有非常强的启动活性。人整合素β1整合素启动子核心启动序列可能位于-845bp～-304bp。
- 王秀亮陈卫梁光萍陈建苏踊跃杨程罗向东
- 关键词：整合素Β1启动子
