王宝珠
- 作品数：3 被引量：13H指数：1
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 基于CRISPR/Cas9技术构建Plcz1基因敲除小鼠模型
- 2022年
- 目的利用CRISPR/Cas9系统构建精子特异性磷脂酶C zeta-1(phospholipase C zeta1,Plcz1)基因敲除(Plcz1)小鼠模型,探讨Plcz1基因在雄性小鼠生育过程中的作用。方法选择小鼠Plcz1基因第6、7外显子作为靶位点,前后两个位点设计2对sgRNA序列,再将2对sgRNA以Golden Gate方法插入pX330A质粒中,构建pX330-sgRNA重组质粒。经扩增、纯化后,将重组质粒显微注射进小鼠受精卵原核中,进行胚胎移植至代孕母鼠,F0代小鼠出生后,提取其尾DNA进行PCR鉴定和DNA测序分析。通过F0代与野生型小鼠交配得到F1代小鼠,F1代交配繁殖至F2代获得Plcz1基因缺失的小鼠纯合品系,Plcz1与野生型小鼠交配,分析Plcz1雄鼠的生育能力。结果成功构建pX330-sgRNA重组质粒,通过繁育和测序筛选获得3只Plcz1雄鼠(Plcz1、Plcz1、Plcz1),对3只小鼠进行目的基因测序发现:(1)Plcz1:Plcz1基因第6、7外显子区域缺失3078 bp;(2)Plcz1:第7外显子区域缺失7 bp,该小鼠在饲养过程中死亡;(3)Plcz1:Plcz1基因第6外显子区域缺失1 bp。结论利用CRISPR/Cas9,成功获得Plcz1雄性小鼠,Plcz1雄性小鼠可育,但与野生型小鼠相比,其生育能力明显下降。
- 曹彬彬蔡瑶王宝珠饶喻王超苟克勉王涛
- 关键词：基因敲除小鼠
- 激素剂量、品系及周龄对小鼠超数排卵的影响
- 目的：采用孕马血清促性腺激素(PMSG)和人促绒毛膜性腺激素(hCG)对不同品系和周龄的小鼠进行超数排卵处理，比较分析激素(PMSG／hCG)注射剂量、小鼠品系和周龄对超排效果的影响，以便获得比较优良的超排方法。结果：(...
- 宋绍征杜庆辉陈则东龚文王宝珠王怡成勇
- 关键词：超数排卵品系周龄
- 激素剂量、小鼠品系及周龄对超数排卵的影响被引量：13
- 2011年
- 目的采用孕马血清促性腺激素(PMSG)和人促绒毛膜性腺激素(hCG)对不同品系和周龄小鼠进行超数排卵处理,比较激素(PMSG/hCG)注射剂量、小鼠品系和周龄对超排效果的影响,以便获得比较优良的超排方法。结果 1)激素剂量为PMSG(10 IU/只)+hCG(10 IU/只)的超排效果优于PMSG(5 IU/只)+hCG(5 IU/只),但无显著差异(P>0.05);2)相同剂量时I,CR小鼠和C57BL/6J小鼠的超排效果显著优于BALB/c小鼠和FVB小鼠(P<0.05);3)5周龄与8周龄的小鼠比较,8周龄超排效果较好,但差异不显著(P>0.05)。结论采用10 IUPMSG+10 IU hCG的组合对8周龄的ICR、C57BL/6J进行超排处理效果相对较好。
- 宋绍征王怡王宝珠杜庆辉陈则东龚文成勇
- 关键词：超数排卵激素周龄品系小鼠
