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2009-2014年深圳市龙岗区人群流感抗体水平监测被引量：2: 2015年; 目的了解深圳市龙岗区监测点人群的流感抗体水平,为预防和控制流感疫情提供依据。方法应用血凝集抑制试验对不同年龄组人群的血清进行流感抗体检测。结果 2009~2014年我区人群中各型流感病毒的抗体阳性率均在40%以下,新H1N1、H1N1、H3N2、BV和BY的人群抗体阳性率分别为31.3%、32.5%、36.0%、18.6%和28.4%,BV抗体的阳性率低于其余4种抗体,差异有统计学意义（χ2=21.25,P〈0.05）。抗体几何平均滴度（GMT）分别为46.1、41.7、47.9、35.5和66.1,BY的GMT最高,与其余4种型别抗体差异有统计学意义（χ2=31.02,P〈0.05）。不同年龄组人群的流感抗体效价主要以1∶20、1∶40和1∶80为主。结论我区人群B型（Victoria）流感免疫抗体水平较低,应提高对易感人群的免疫接种水平。; 陈应坚梁克峰李静媚刘渠赖妙儿王琼瑶吴滨周健明; 关键词：流感抗体血凝抑制试验

新型虫媒病毒——南定病毒的研究进展被引量：2: 2017年; 近年来新发传染病不断出现和流行,其中虫媒病毒性疾病对人类健康的威胁正逐步增加。全球首株南定病毒是从越南一名脑炎患者脑脊液中分离得到的新型病毒,并在致倦库蚊等多种库蚊中也发现了该病毒,因分离该病毒的地点位于越南的南定(Nam Dinh)省,2011年日本科学家Nga将其命名为南定病毒。作者于2013年在国内首次从致倦库蚊中发现和分离了南定病毒。本文就新型虫媒病毒—南定病毒的特征和研究概况进行综述。; 王德全刘渠梁克峰周健明; 关键词：虫媒病毒

新蚊媒病毒南定病毒的生物学特征研究被引量：1: 2016年; 目的探讨我国首次分离的蚊媒病毒南定病毒(Nam Dinh virus,NDi V)的生物学特征及对培养细胞和昆明小鼠的致病能力。方法连续9 d观察NDi V对C6/36细胞的病变效应(CPE);用空斑法测定NDi V滴度;采用3日龄小鼠脑内接种NDi V方法检测病毒毒力;中和实验以免疫后灭活的昆明小鼠血清为中和抗体,在C6/36细胞中接种NDi V和中和抗体,作用1 h后继续培养7~9 d,逐日观察并记录细胞病变情况;采用Taq Man-MGB Probe Real-timePCR方法对C6/36细胞中NDi V核酸进行检测,观察病毒增殖情况。结果 NDi V接种C6/36后,第5天出现明显的CPE,测得病毒滴度为9.25×10~6PFU/ml,利用Reed-Muench法计算NDi V对昆明小鼠半数致死量(LD_(50))为10^(4.12)/ml,NDi V感染小鼠后,具有较强的免疫原性,且攻毒保护率较高。病毒抗血清组半数组织培养感染剂量(TCID_(50))<10^(-1),而对照组TCID_(50)为10^(-3.5),中和指数>1 000,病毒核酸检测结果显示,接种3 d后,NDi V核酸呈明显阳性,病毒核酸量随病毒接种后时间的延长而增加。结论 NDi V对C6/36细胞和昆明小鼠具有一定的致病力和较强的抗原性。; 王德全刘渠梁克峰周建明周俊立刘晓娜; 关键词：生物学特征毒力

NDiV致病性初步研究及实时荧光PCR检测方法的建立: 目的：　　Nam Dinh virus（以下简称NDiV）是近年新发现的虫媒病毒，本课题组在国内首次成功从成蚊中分离，但该病毒流行病学意义和检测方法尚鲜见报道。本次研究拟建立一种特异、快速检测成蚊中NDiV的实时荧光定量...; 梁克峰; 关键词：虫媒病毒传染病致病作用荧光定量PCR; 文献传递

南定病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的建立被引量：1: 2016年; 目的制备南定病毒（NDiV）标准血清，建立ELISA检测方法，为在人群中监测南定病毒感染状况提供方法。方法用南定病毒感染3周龄SPF级BALB／c小鼠，分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB／c小鼠，免疫血清用IFA法进行鉴定；南定病毒感染C6／36细胞，制备ELISA抗原，确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最伟工作浓度，建立南定病毒ELISA检测方法，进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备南定病毒免疫血清，以IFA测定血清效价为1：320，与呼吸道合胞病毒、腺病毒均无交叉反应；建立了ELISA检测方法，确立了各种试剂的最佳工作浓度，其中酶结合物最佳工作浓度为1：10000，抗原为2．3μg／ml，阳性参考血清为1：200；ELISA检测灵敏度为1：3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4．56％和5．17％，板间为3．38％和6．64％。稳定性实验相财偏差均小于20％。结论本研究制备的南定病毒免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清；建立的ELISA方法重复性、稳定性好，敏感性和特异性强，可用于南定病毒血清抗体检测。; 王德全刘渠周健明梁克峰刘晓娜朱礼平王婧颖; 关键词：ELISA方法

2009—2014年深圳市龙岗区中小学校甲型H1N1聚集性疫情流行动力特征被引量：4: 2017年; 目的通过2009—2014年深圳市龙岗区中小学校甲型H1N1流感聚集性疫情流行传播特征分析,揭示疫情传播规律,为流感新病毒的科学防控提供理论依据。方法对龙岗区2009—2014年中小学校甲型H1N1流感聚集性疫情流行特征进行描述、曲线拟合和相关分析,比较疫情的即时传播速率、扩散方式和基本再生数R0。结果 6年间学校甲型H1N1疫情60起,病例数1 034例,平均罹患率10.50%,病例主要发生在小学人群(67.12%),聚集性疫情基本再生数R0在8~10之间,高于社会一般人群。2009年流行期,疫情高发,流行动力强,累积病例曲线和即时速率呈幂函数方式增长。罹患率与发病人数(r=-0.431,P<0.01)和持续时间(r=-0.386,P<0.01)均呈负相关,发病人数与疫情持续时间呈正相关(r=0.601,P<0.01),传播方式为突破班级限制向全校传播。一般防控措施效果不明显。2013年疫情小活跃期,疫情流行动力微弱,持续时间短,疫情为班内局部传播,报告后立即得到有效控制。结论 2009—2014年深圳市龙岗区中小学校甲型H1N1疫情流行动力高于社会一般人群,2009年甲型H1N1流感聚集性疫情流行动力强于2013年,主要与人群抗体水平有关,应根据疫情的流行动力情况制定策略和采取相应的防控措施。; 孙春云刘渠谢显清李刚刘凤仁叶伟雄周健明梁克峰; 关键词：聚集性疫情动力学特征

国内首次发现的新型虫媒病毒——南定病毒致C6/36细胞病变情况研究被引量：2: 2016年; 目的探讨国内首次分离的南定病毒致白纹伊蚊细胞病变情况。方法用长成单层的白纹伊蚊细胞感染本课题组在国内首次发现的南定病毒,观察细胞病变情况和进行分子生物学检测。结果南定病毒接种白纹伊蚊细胞后,7d开始出现病变,细胞固缩,单层细胞稀疏,细胞之间空隙增大,直到细胞数量减少,细胞间空隙增大,单层消失,空白对照生长正常,TCID50为1.41×10-6PFU/ml。应用TaqMan-MGB Probe Real Time PCR技术,检测细胞病变孔的培养液,荧光PCR结果均出现"S"扩增曲线,显示均存在NDiV核酸。用TaqMan-MGB Probe Real Time PCR制作相对定量标准曲线,6个稀释度的Ct值标准曲线R2≈1.0,呈线性关系。结论南定病毒能够引起白纹伊蚊细胞出现明显细胞病变效应。; 王德全刘渠周建明梁克峰周俊立; 关键词：细胞病变效应

实时荧光PCR检测Nam Dinh病毒方法的建立及初步应用被引量：4: 2015年; 目的建立一种快速、特异检测Nam Dinh病毒（NDi V）的实时荧光PCR方法。方法根据Gen Bank和本实验室分离的NDi V进行序列比对,找出保守序列（Rd Rp）并设计特异引物和Taq Man-MGB探针,通过调整引物、探针浓度,优化其反应条件,对方法做灵敏度、特异性、稳定性实验,以评价反应体系。结果 NDi V的Taq Man-MGB实时荧光PCR检测方法用时短,灵敏度高,最低检测下限为0.1 PFU。与登革热1-4血清型病毒、流行性乙型脑炎、人呼吸道合胞病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒无交叉反应,特异性良好;将4份核酸含量不同的标准样品重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为1.67%-3.68%,稳定性较高。通过监测,龙岗区蚊虫携带NDi V概率为18.00%。结论NDi V的Taq Man-MGB实时荧光PCR方法是一种快速、特异、灵敏、稳定性好的方法,可应用于流行病学环境监测,提高病毒的快速检测能力。; 梁克峰刘渠王德全周健明金玉娟陈应坚李静媚甘莉萍杨慧; 关键词：NAM 实时荧光定量PCR TAQ

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梁克峰

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