杨墨
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 亚急性28天动式吸入染毒纳米级炭黑气溶胶致小鼠肺组织损伤作用研究
- 【目的】建立亚急性28天动式吸入纳米级炭黑气溶胶小鼠染毒模型,探讨纳米级炭黑亚急性呼吸道染毒对小鼠肺组织损伤作用。【方法】电子显微镜检测炭黑颗粒大小和聚集情况。使用炭黑气溶胶发生器和气泵,将炭黑气溶胶与稀释气流通过管路吹...
- 杨墨张荣牛勇鱼涛孟涛郑玉新
- 关键词：炭黑纳米级
- 文献传递
- 丝裂原活化蛋白激酶信号通路在氯乙酸诱导人支气管上皮细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路在氯乙酸诱导的人正常支气管上皮细胞16HBE凋亡过程中的作用。方法用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L氯乙酸处理16HBE细胞24 h后，应用CCK-8和LDH法检测细胞存活情况，采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况，并用免疫印迹法检测MAPK信号通路蛋白p38、ERK1/2、JNK的磷酸化。用MAPK通路特异性抑制剂（SB203580、U0126、SP600125）预处理16HBE细胞1 h，再用2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后，检测加入抑制剂后p-p38、p-ERK1/2、p-JNK的表达水平及细胞活力和凋亡的变化。结果随着氯乙酸染毒浓度的增加，用CCK-8法和LDH法检测的细胞存活率逐渐降低，相关系数分别为-0.902和-0.825（P〈0.05），均具有较好的剂量效应关系，且CCK-8法检测效能明显优于LDH法，差异有统计学意义（P〈0.05）。氯乙酸可诱导16HBE细胞凋亡，1.5、2.0、2.5 mmol/L氯乙酸所致细胞凋亡率分别为17.2%±4.0%、24.6%±4.2%和39.3%±5.7%，均明显高于对照组（5.6% ± 3.0%），差异有统计学意义（P〈0.05）。氯乙酸染毒组p38和ERK1/2蛋白磷酸化水平存在时间、剂量依赖性关系；与对照组比较，16、24 h组p-p38蛋白水平分别是对照的2.1和2.6倍，差异有统计学意义（P〈0.01），p-ERK1/2蛋白水平分别比对照降低了37%和52%，差异有统计学意义（P〈0.05），而p-JNK蛋白各时间点均无明显变化；染毒24 h后，2.0、2.5 mmol/L组p-p38蛋白水平分别是对照组的1.9和2.6倍，差异有统计学意义（P〈0.01），p-ERK1/2蛋白水平分别比对照组降低了40%和50%，而JNK蛋白各组未见明显磷酸化。与对照组和氯乙酸染毒组比较，抑制剂对照组和抑制剂组p-p38、p-ERK1/2及p-JNK蛋白均明显减少；与对照组比较，氯乙酸染毒组和p-38、ERK及JNK通路抑制剂组细胞活力分别下降了28%、18%、36%和26%，凋亡率分别为对照组的7、4、8和7倍，
- 孟涛杨墨李云霞贾强于功昌戴宇飞
- 关键词：氯乙酸丝裂原活化蛋白激酶上皮细胞
- TDI职业暴露所导致的淋巴细胞亚群和细胞因子及趋化因子的变化
- 【目的】二异氰酸甲苯酯（Toluene diisocyanate,TDI）是一种工业化学物,职业接触可引起哮喘。为探讨TDI致哮喘的早期效应标志物,本研究采用横断面分子流行病学设计,分析TDI暴露所导致的作业工人淋巴细胞...
- 苗盼盼孟涛贾强牛勇纪玉青杨墨巨睿邵华郑玉新戴宇飞
- 关键词：二异氰酸甲苯酯淋巴细胞亚群细胞因子
- 文献传递
- 纳米级炭黑颗粒的小鼠亚急性吸入毒性研究被引量：5
- 2016年
- [目的]探讨纳米级炭黑颗粒的小鼠亚急性吸入毒性效应,为纳米级炭黑危险性评价提供毒理学数据。[方法]8周龄雄性C57BL/6小鼠分为低质量浓度(后称"浓度")组(15 mg/m^3)、高浓度组(30 mg/m^3)和阴性对照组(滤过空气)。通过气溶胶发生器将纳米级炭黑吹入染毒柜中,每天染毒6 h,连续染毒28 d。染毒期间,动态监测染毒柜内炭黑颗粒的空气动力学直径、颗粒的空间分布及浓度变化。末次染毒后24 h,取静脉血进行血液学及临床生化检查;采集心、肺、肝、脾、肾等脏器组织,称重后计算脏器系数,并行组织病理学检查;支气管灌洗肺组织后,镜下对灌洗液中细胞进行分类计数并测定总蛋白浓度。[结果]染毒28 d期间,低浓度组炭黑浓度约为(15.31±3.30)mg/m^3,高浓度组为(30.05±14.20)mg/m^3。与对照组相比,各组小鼠染毒期间饲料和水的消耗量及其体重变化差异均无统计学意义。与对照组相比,各浓度组染毒小鼠血生化指标未见明显变化,而血常规指标中仅红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容在染毒组中略有增加(P<0.01或P<0.05)。高浓度组小鼠肺脏器系数高于低浓度组和对照组(P=0.016),各浓度组心、肾脏器系数降低(P=0.001,P<0.01)。病理检查可见各浓度组小鼠肺组织呈灰黑色,支气管腔、肺泡腔内均可见炭黑颗粒物沉积,肺间质可见吞噬炭黑颗粒的巨噬细胞,且高浓度组炭黑颗粒沉积更多;浓度组小鼠肺组织损伤病理评分分别为(6.63±1.13)和(9.80±0.38),明显高于对照组(1.66±0.55)。与对照组相比,低、高浓度组肺泡灌洗液中总细胞数、淋巴细胞数、中性粒细胞数和嗜酸性粒细胞数均明显增加(均P<0.01)。[结论]28 d反复吸入纳米级炭黑主要引发小鼠肺组织损伤,本结果也可为开展纳米级炭黑肺毒性研究提供较为理想的模型和可靠的分析手段。
- 杨墨孟涛牛勇鱼涛沈美丽宾萍张利平郑小美戴宇飞牛侨郑玉新
- 关键词：炭黑病理学
- 氯乙酸致人支气管上皮细胞16HBE的凋亡机制研究被引量：3
- 2016年
- [目的]探讨氯乙酸对人支气管上皮细胞16HBE氧化应激以及线粒体凋亡通路的影响。[方法]以16HBE细胞为研究对象,将实验分为对照组和0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的氯乙酸染毒组,染毒24 h后检测细胞存活率、凋亡率及超氧化物歧化酶(SOD)活力;染毒0.25、0.5、1、8、24 h后检测细胞内活性氧(ROS)水平;染毒8、24 h后检测线粒体膜电位以及Bcl-2和Bax m RNA表达水平。用1.5、2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后,检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、Caspase-9、Caspase-3、PARP-1凋亡相关蛋白的表达水平。[结果]随氯乙酸染毒浓度升高,染毒24 h后细胞存活率、SOD活力和线粒体膜电位呈剂量依赖性下降(r=-0.902、-0.732和-0.863,P<0.05),而细胞凋亡率呈剂量依赖性上升(r=0.914,P<0.05)。与对照组相比,1.5、2.0、2.5 mmol/L剂量组细胞存活率分别降低了12%、20%和30%,SOD活力分别降低了9%、21%和30%,线粒体膜电位分别降低了11%、18%和24%,而细胞凋亡率分别是对照组的3、4和7倍。各剂量组细胞内ROS水平呈先升高后降低的趋势,在染毒0.5 h达到峰值,与对照组相比分别增加了15%、35%、48%和55%(P<0.05),染毒1 h后反而降低。染毒各时间点染毒浓度与ROS水平均存在剂量-效应关系(r=0.756、0.893、0.735、0.667和0.653,均P<0.05);相关性分析表明染毒24 h后ROS水平与细胞凋亡率呈明显正相关(r=0.826,P<0.05)。染毒8、24 h两个时间点,染毒浓度与Bcl-2、Bax m RNA表达量存在剂量效应关系(8 h:r=-0.634和0.754,24 h:r=-0.773和0.823,P<0.05);与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度≥1.5 mmol/L时Bcl-2 m RNA和蛋白表达明显下调,而Bax m RNA和蛋白表达明显上调(P<0.05);相关性分析表明Bax m RNA表达与ROS水平具有正相关(r=0.886和0.824,P<0.05),而Bcl-2m RNA表达与ROS水平具有负相关(r=-0.862和-0.815,P<0.05)。与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度2.5 mmol/L时细胞色素C、活化的Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量显著增加,�
- 孟涛苗盼盼杨墨贾强戴宇飞
- 关键词：氯乙酸氧化应激活性氧凋亡线粒体通路
- 吸入炭黑气溶胶对小鼠肺组织氧化和抗氧化系统的影响
- 2020年
- 目的探讨反复吸入炭黑气溶胶对小鼠肺组织氧化应激水平和抗氧化因子核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)及其调控的抗氧化酶水平的影响,分析持续暴露后肺组织氧化应激和氧化防御的关系。方法C57BL/6小鼠置于动式全身吸入柜中,每天6 h吸入炭黑气溶胶15.06和29.61 mg·m^-3连续14 d。末次染毒后,光镜和电镜下观察肺组织病理结构的变化;ELISA法测定肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)水平;化学荧光法检测肺组织单细胞内活性氧(ROS)水平;荧光定量PCR和Western印迹法检测肺组织Nrf2及抗氧化酶亚铁血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO-1)和谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)mRNA和蛋白表达水平。结果炭黑气溶胶15.06和29.61 mg·m^-3组小鼠肺组织细胞出现炭黑颗粒沉积、毛细血管充血、炎细胞浸润、肺泡和支气管上皮损伤及肺间隔增宽等改变,且肺损伤评分分别为正常对照组的2.96和4.02倍(P<0.01)。与正常对照组相比,炭黑气溶胶15.06和29.61 mg·m^-3组肺组织SOD,GSH-Px和CAT活性明显下降,细胞内ROS和肺组织MDA水平明显升高(P<0.05);肺组织抗氧化酶HO-1,NQO-1和GCLC mRNA表达显著上调(P<0.05),Nrf2 mRNA表达无显著差异;Nrf2蛋白总体水平未见显著变化,但胞质Nrf2蛋白水平显著下调而胞核Nrf2蛋白水平显著上调(P<0.05);HO-1,NQO-1和GCLC蛋白水平均显著上调(P<0.05)。相关分析显示,HO-1,NQO-1和GCLC mRNA水平与细胞内ROS水平呈正相关,相关系数分别为0.785,0.699和0.720(P<0.01)。结论持续吸入炭黑气溶胶可造成小鼠肺组织细胞内炭黑颗粒的沉积,诱导肺组织的氧化应激,并促使Nrf2从胞质转位到胞核,上调抗氧化酶HO-1,NQO-1和GCLC的表达。
- 孟涛宋佳阳杨墨尉杰忠段化伟
- 关键词：炭黑气溶胶吸入染毒氧化应激
