李影
- 作品数:4 被引量:40H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:环境保护公益性行业科研专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程更多>>
- 多杀性巴氏杆菌Lon蛋白酶的原核表达及ATPase活性的检测被引量:1
- 2014年
- 为表达多杀性巴氏杆菌(P.multocida)Lon蛋白及检测其生物活性,本研究通过PCR扩增P.multocida C51-17株Lon基因,将其克隆到质粒pET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET30a-Lon,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白Lon,采用Ni-NTA His-Bind Resin纯化目的蛋白。SDS-PAGE结果表明,重组蛋白Lon分子量大小约为97 ku,主要以可溶性蛋白形式表达;western blot检测结果表明,重组表达蛋白能够被P.multocida阳性血清识别;ATPase活性检测试验表明,纯化的重组蛋白Lon具有ATPase活性,其将ATP降解为ADP的酶活性可以达到27 708.47μmol/(mg·min)。本研究表达了P.multocida Lon重组蛋白,并且测定其ATPase活性,为进一步研究Lon蛋白在P.multocida致病中的作用奠定了基础。
- 王淑亚郭东春李影王雅静刘家森姜骞曲连东
- 关键词:多杀性巴氏杆菌原核表达ATPASE活性
- pH和磷对铅胁迫下芥菜生长和土壤酶活性的影响被引量:3
- 2013年
- 采用盆栽试验研究不同pH和磷酸盐浓度对铅污染土壤种植的芥菜生物量和铅吸收的影响,及铅浓度与土壤酶活性的关系。结果表明,芥菜地下部分铅含量明显高于芥菜地上部分。土壤酸化有可能导致土壤中铅的溶出释放,在试验中,土壤pH为5.0时,土壤中铅的释放最多,芥菜生长和土壤酶活性受到的影响最大。土壤中铅与磷酸结合成难溶性的磷酸铅,当土壤中施加的磷浓度为300mg/kg时,土壤中铅的释放量最少,芥菜生长和土壤酶活性受到的影响最小;土壤中铅的释放溶出与土壤酶活性相关性较大,同时二者易受土壤pH和磷含量的影响,因此把土壤中铅的释放溶出与土壤酶活性结合起来作为判断土壤铅污染程度指标更合适。
- 翟娜曲娟娟闫璐李影闫雷
- 关键词:PH磷酸盐芥菜释放量土壤酶活性铅胁迫
- 多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达被引量:1
- 2014年
- 为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理,采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因,并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中,将重组表达载体pET30a—prfA转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导表达,进行SDS—PAGE分析和Western—blot分析。结果显示,这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95.6%~100%,在氨基酸水平上的同源性为98.9%~100%。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45.6ku,与预期的大小一致,以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应,具有良好的反应原性。
- 李影郭东春王淑亚张爱芹胡晓亮王雅静刘家森姜骞曲娟娟曲连东
- 关键词:多杀性巴氏杆菌原核表达
- 一株耐铅细菌的分离鉴定及其吸附特性研究被引量:36
- 2013年
- 从某铅矿区土壤中筛选出一株耐铅细菌,对其进行初步鉴定,并对Pb2+吸附特性和机理进行研究.16SrDNA序列相似性分析表明,该菌属于节杆菌属,将其命名为Arthrobacter scleromaeLY-1.菌株最大耐Pb2+浓度为500mg.L-1,此外,菌株对Zn2+、Cu2+、Ni2+、Co2+等重金属也有一定的耐受性.在初始Pb2+浓度为100mg.L-1、投菌量(鲜重)为10g.L-1、pH为6.0、温度为30℃、吸附时间为25min时,吸附Pb2+效果较好,此时吸附率为99.61%,吸附容量为9.96mg.g-1,吸附等温方程符合Langmuir模型.透射电镜观察和红外光谱分析显示,菌株LY-1对Pb2+的吸附主要是细胞表面的吸附,菌体细胞表面的多种活性基团与Pb2+发生络合作用.
- 金羽曲娟娟李影顾海东闫立龙孙兴滨
- 关键词:铅节杆菌