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2015—2017年东北地区猪星状病毒ORF1b基因分子流行病学调查被引量：3: 2019年; 为了解2015—2017年东北地区猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)流行情况,试验采用半巢式RT-PCR方法对2015—2017年东北地区的122份仔猪小肠及粪便样品(107份来自腹泻仔猪,15份来自健康仔猪)进行PAstV检测,对阳性产物进行测序,并对测序结果进行同源性分析及构建系统进化树。结果表明:半巢式RT-PCR扩增得到大小约为422 bp的片段,样品总阳性率为9.02%(11/122),其中腹泻仔猪样品的阳性率为10.28%(11/107),健康仔猪样品的阳性率为0(0/15);有4株PAstV ORF1b基因测序成功;毒株间核苷酸同源性为99.1%~100%,氨基酸同源性为97.4%~100%;与PAstV 2型参考毒株核苷酸的同源性最高,为75.9%~92.3%;获得的4株PAstV均属于PAstV 2型。说明东北地区有PAstV的流行,且以PAstV 2型为主。; 杨丹张备朱金海翟军军孔凡志孙东波; 关键词：腹泻系统进化分析

奶牛乳腺肥大细胞数量与胶原纤维面积的相关性研究被引量：1: 2014年; 为了研究奶牛乳腺肥大细胞的数量与奶牛乳腺胶原纤维面积的相关性,试验对奶牛泌乳期和静止期乳腺进行采样,应用甲苯胺蓝组织化学染色法观察奶牛泌乳期和静止期乳腺肥大细胞数量的变化特点,应用苦味酸天狼猩红染色法观察奶牛泌乳期和静止期乳腺胶原纤维面积的变化特点。结果表明:静止期奶牛乳腺肥大细胞的数量明显比泌乳期多(P<0.01),静止期奶牛乳腺胶原纤维的面积明显比泌乳期大(P<0.01)。静止期奶牛乳腺肥大细胞的数量多,胶原纤维的面积也大;泌乳期的奶牛乳腺肥大细胞的数量少,胶原纤维的面积也小。说明奶牛乳腺肥大细胞的数量与胶原纤维的面积存在明显正相关性(r=0.677,P<0.05)。; 杨彬杨隽徐丹丹孙志鹏朱金海武瑞; 关键词：奶牛肥大细胞胶原纤维泌乳期静止期

中国几省市猪萨佩罗病毒巢式RT-PCR检测与遗传进化分析被引量：1: 2019年; 为了准确了解猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)在中国流行情况及遗传进化规律,试验针对PSV 5’-NTR基因利用巢式RT-PCR方法对2015~2017年来自中国部分省市规模化猪场采集的368份样品进行检测,将阳性样品对VP1基因进行克隆、测序、构建进化树。巢式RT^PCR检测结果表明,368份样品中24份样品为阳性,总阳性率为6.52%;8份样品测序成功,序列分析结果表明核苷酸同源性为77.0%~99.7%,推导的氨基酸序列同源性为83.6%~100.0%,遗传进化分析结果显示,中国地区的PSV病毒呈现出遗传多样性,其中3个毒株与德国参考毒株亲缘关系较近,2个毒株与国内外参考毒株的亲缘关系均较远,变异较大。研究丰富了PSV分子流行病学资料,为进一步研究该病毒提供了参考。; 张备李春秋苏明俊刘秋瑾乔成鹏朱金海孙东波; 关键词：VP1 分子流行病学

2016年黑龙江省猪流行性腹泻病毒S1基因的遗传变异分析被引量：2: 2018年; 为了解2016年黑龙江省猪场内猪流行性腹泻病毒（PEDV）的流行与变异情况,试验利用RT-PCR方法对采自黑龙江省的29份腹泻仔猪的小肠组织样品进行检测,针对PEDV S1基因进行扩增及测序,构建系统进化树,并对其进行系统进化性分析和氨基酸序列插入或缺失突变分析。结果表明：10个S1基因测序成功,鉴定毒株间核苷酸序列同源性为96.2%-99.7%,推导出的氨基酸序列同源性为96.2%-99.5%;与已知的中国HGC-01-2015、FJ-FQ 2014野毒株和美国高致病性毒株USA/Colorado/2013同源性较高,而与经典毒株CV777、中国早期毒株同源性较低;以S1基因构建系统进化树,主要分为GⅠ群和GⅡ群,新鉴定的10株PEDV毒株均属于GⅡb亚群的non S-INDEL型毒株,与经典毒株CV777及亚洲其他地区毒株、欧洲毒株分属于不同亚群;鉴定毒株与亚洲地区常用疫苗株相比,存在相同的突变位点,并集中在S1蛋白的N末端结构域。; 朱金海王恩雨孙东波; 关键词：S1基因系统进化树

胞壁酰二肽对小鼠乳腺组织和乳腺细胞NOD2表达的影响被引量：1: 2016年; 细菌感染是引起奶牛乳腺炎的主要原因,而胞壁酰二肽(MDP)几乎存在于所有细菌中,核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体是天然免疫中对病原微生物的病原体相关分子模式识别的一类感受器,在机体天然免疫应答中发挥重要作用。为了研究MDP对小鼠乳腺组织和乳腺细胞NOD2表达的影响,试验以小鼠为模型,采用不同浓度的MDP在体乳腺内灌注和对体外小鼠乳腺上皮细胞用不同浓度的MDP刺激,观察小鼠乳腺组织的病理组织学变化,乳腺组织及细胞中NOD2、下游的受体作用蛋白2(RIP2)表达的变化,以及炎性细胞因子TNF-α、IL-6的表达变化。结果表明:从乳腺灌注不同浓度MDP后可引起急性乳腺炎,乳腺组织中炎性细胞增多;MDP刺激后乳腺组织及细胞中NOD2、RIP2、TNF-αmRNA表达水平明显升高,细胞IL-6 mRNA表达水平没有明显升高。说明NOD2介导信号途径促使炎性细胞因子的表达。; 刘洋高国强谭浩于震江朱金海徐丹丹孙志鹏杨彬; 关键词：小鼠乳腺组织

奶牛乳腺肥大细胞数量与胶原纤维面积的相关性研究: 研究奶牛乳腺肥大细胞的数量与奶牛乳腺胶原纤维面积的相关性,对奶牛泌乳期和静止期乳腺进行采样,应用甲苯胺蓝组织化学染色法观察奶牛泌乳期和静止期乳腺肥大细胞数量的变化特点,应用苦味酸天狼猩红染色法观察奶牛泌乳期和静止期乳腺胶...; 杨彬杨隽徐丹丹孙志鹏朱金海武瑞; 关键词：奶牛肥大细胞正相关性

2016-2017年中国部分地区TTSuV2流行情况调查与遗传进化分析: 2022年; 为了解2016-2017年中国地区TTSuV2的流行情况以及流行毒株的遗传演化情况,对中国东北、华中、华东、华北、华南、西南、西北7个地区采集的325份仔猪腹泻样品进行PCR检测,并对其中阳性样品的基因组高变区进行克隆与遗传演化分析。结果显示:TTSuV2阳性样品总数为92份,总阳性率为28.31%;成功克隆出目的基因31条,均属于Kappatorquevirus属的TTSuV k2a基因型,且分布于Group1和Group2。基于全长目的基因同源性分析结果显示,31株TTSuV2型鉴定毒株之间的核苷酸同源性为87.5%~99.7%。UTR核苷酸序列比对结果显示,所有鉴定毒株的核苷酸突变位点主要集中在第51~230 nt。ORF2蛋白序列比对结果显示,所有鉴定毒株的氨基酸突变位点主要集中在第39~49 aa;ORF1蛋白序列比对结果显示,氨基酸突变位点主要集中在第19~50 aa。重组分析结果显示,共存在1株潜在重组毒株TTSuV/515。ORF2基因选择压力分析结果显示,3个密码子位点受到正选择压力,4个密码子位点受到负选择压力。; 王德海陈文文朱金海李春秋李鹏孙东波; 关键词：遗传演化分析

奶牛乳腺肥大细胞数量与胶原纤维面积的相关性研究: 为了研究奶牛乳腺肥大细胞的数量与奶牛乳腺胶原纤维面积的相关性,对奶牛泌乳期和静止期乳腺进行采样,应用甲苯胺蓝组织化学染色法观察奶牛泌乳期和静止期乳腺肥大细胞数量的变化特点,应用苦味酸天狼猩红染色法观察奶牛泌乳期和静止期乳...; 杨彬杨隽徐丹丹孙志鹏朱金海武瑞; 关键词：奶牛肥大细胞胶原纤维泌乳期静止期

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朱金海