张继威
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:吉林农业大学中药材学院更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 抗菌肽CM与haFGF改构体融合基因的构建与表达被引量:1
- 2009年
- 构建重组改构体aFGF28-154和抗菌肽CM基因的融合基因,使其在大肠杆菌系统中融合表达,以期获得具有靶向FGFR高表达肿瘤细胞的抗肿瘤融合蛋白。利用PCR引物延伸的方法拼接得到带有G4S铰链的天蚕素—蜂毒素杂合肽CM与aFGF28-154的融合基因,插入大肠杆菌表达载体pET20b中,构建表达质粒pET-CM-aFGF28-154,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),氨苄青霉素抗性筛选重组转化子。IPTG诱导4 h后,菌液经超声破碎,以包涵体形式表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的18%。将包涵体溶解并通过差速离心除去部分杂蛋白,透析复性并用Heparin Sepharose CL-6B亲和层析,目的蛋白得到初步纯化,为进一步研究蛋白的生物学活性奠定了基础。
- 解佳森肖业臣秦玉侠王会岩张继威李校堃
- 关键词:融合基因